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胃癌SGC-7901细胞株侧群细胞分选及生物学特性的初步研究

作　者: 荣黎
导　师: 吴小翎
学　校: 重庆医科大学
专　业: 内科学
关键词: 胃癌SGC-7901细胞肿瘤干细胞侧群细胞 Musashi-1 CD44
分类号: R735.2
类　型: 博士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：分选人胃癌SGC-7901细胞株中的侧群（side population，SP）细胞并初步研究其相关生物学特性。方法：以人胃癌细胞株SGC-7901为研究对象，通过荧光染料Hoechst33342进行细胞染色，对照组同时加入维拉帕米做拮抗对照，应用流式细胞仪检测并分选SP细胞和nonSP细胞。CCK-8法观察两组细胞的体外增殖活性；无血清并添加生长因子的培养基培养以观察两组细胞的自我更新能力；两组细胞常规培养1周后复测SP细胞比例以观察不对称分裂能力；体外耐药实验观察两组细胞对化疗药物5-FU的耐药性；western-blot检测ABCG2蛋白和bcl-2蛋白表达情况；荧光定量PCR检测干细胞相关基因Musashi-1mRNA和CD44mRNA在两组细胞中的表达差异；异种移植实验观察两组细胞在裸鼠体内的成瘤能力。结果：胃癌SGC-7901细胞株中SP细胞的比例大致在2.3+0.78%左右，相对于nonSP细胞，SP细胞具有较强的体外增殖活性（P<0.05）；在无血清培养基中能形成明显的肿瘤球；具有较强的不对称分裂能力；对5-FU的耐药存活率明显高于nonSP细胞（P<0.05）；高表达耐药蛋白ABCG2和抗凋亡蛋白bcl-2；SP细胞中干细胞相关基因Musashi-1mRNA和CD44mRNA的相对表达量明显高于nonSP细胞（P<0.05）；在裸鼠皮下种植2×10~3个SP细胞可以产生肿瘤，而皮下种植2×10~4个nonSP细胞也未能见到肿瘤形成。结论：人胃癌SGC-7901细胞株中存在数量极少的SP细胞，该SP细胞亚群具备肿瘤干细胞的相关生物学特性。

全文目录

英汉缩略语名词对照  5-7
摘要  7-9
ABSTRACT  9-11
前言  11-16
第一部分胃癌 SGC-7901 细胞株侧群细胞分选及生物学特性的研究  16-29
  1.材料  16-18
  2.方法  18-21
  3.结果  21-26
  4.讨论  26-29
第二部分胃癌侧群细胞耐药性研究及干细胞相关基因检测  29-45
  1.材料  29-32
  2.方法  32-37
  3.结果  37-42
  4. 讨论  42-45
全文总结  45-46
参考文献  46-51
文献综述  51-67
  参考文献  62-67
致谢  67-68
博士期间发表的论文  68-69

胃癌SGC-7901细胞株侧群细胞分选及生物学特性的初步研究

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