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羟基红花黄色素A对鼠Lewis肺癌移植瘤抑制作用及VEGF表达的影响

作　者: 高亭
导　师: 段凤英
学　校: 南昌大学医学院
专　业: 内科学
关键词: 羟基红花黄色素A Lewis肺癌移植瘤血管内皮生长因子免疫组化
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：研究羟基红花黄色素A（hydroxysafflor yellowA，HSYA）对C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用，并探讨其对移植瘤血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)表达的影响。方法：将Lewis肺癌细胞培养足够数量后制备成细胞悬液并细胞计数，使细胞数>107/ml，然后将这些细胞悬液接种于30只近交系C57BL/6小鼠左侧肋腹皮下，造成为荷瘤小鼠模型，造模1周后将30小鼠随机分为5组，每组6只，分别为生理盐水组（对照组），0.2ml/只,2次/日；环磷酰胺组（CTX），25mg/kg/只,每2日1次；及HSYA组均为每天给药2次，其中小剂量组0.35mg/kg/只、中剂量组0.70mg/kg/只、大剂量组1.4mg/kg/只作用于动物模型。观察各组小鼠的饮食、进水、活动情况，并观察小鼠移植瘤体积大小，记录移植瘤最长径（a）与最短经（b），按公式V=ab2×0.52（mm3)计算移植瘤的近似体积，之后对小鼠第8、14、20天的体积进行比较，并在造模第22天处死所有小鼠，于无菌条件下摘取移植瘤组织并称重，计算抑瘤率；应用免疫组化法及图像分析技术检测移植瘤组织中VEGF表达的积分光密度。结果：HSYA中、小剂量组在瘤株接种第8天、第14天及第20天移植瘤体积与生理盐水组比较有显著性差异（P<0.05）；第22天，在平均瘤重上，与生理盐水组比较也有显著性差异（P<0.05）；在移植瘤组织VEGF表达上，中、小剂量组与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05)。而HSYA大剂量组移植瘤在体积、瘤重、VEGF表达上均与生理盐水组比较无显著性差异。结论：中药羟基红花黄色素A（HSYA）对改善Lewis肺癌小鼠的一般生活状况及抑制C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤的生长与剂量相关。中药羟基红花黄色素A（HSYA）的抗肿瘤机制之一可能是通过减少血管内皮生长因子（VEGF）表达,从而达到抑制肿瘤新生血管生成的作用。

全文目录

摘要  3-4
ABSTRACT  4-9
第1章引言  9-12
  1.1 背景和目的  9-10
  1.2 国内外研究现状  10-12
第2章材料与方法  12-20
  2.1 实验材料  12-14
    2.1.1 细胞株  12
    2.1.2 试验动物  12
    2.1.3 主要实验仪器  12-13
    2.1.4 主要试剂  13
    2.1.5 试剂配制  13-14
  2.2 实验方法  14-20
    2.2.1 实验器械的清洁与消毒  14-15
    2.2.2 Lewis 肺癌细胞的培养、传代、冻存和复苏  15-17
    2.2.3 Lewis 肺癌荷瘤小鼠模型的建立  17
    2.2.4 观察各组小鼠移植瘤生长情况  17
    2.2.5 计算抑瘤率  17
    2.2.6 SP 免疫组化法测血管内皮生长因子（VEGF）表达  17-18
    2.2.7 病理切片制备及观察  18-19
    2.2.8 统计方法  19-20
第3章结果  20-29
  3.1 HSYA 对 C57BL/6 荷瘤小鼠生活状况的影响  20
  3.2 C57BL/6 小鼠 Lewis 肺癌移植瘤体积变化情况  20-21
  3.3 C57BL/6 小鼠 Lewis 肺癌各组移植瘤重量及肿瘤生长抑制率  21-22
  3.4 HSYA 对 Lewis 肺癌移植瘤血管生成的病理影响  22-25
  3.5 HSYA 对 Lewis 肺癌移植瘤 VEGF 表达的影响  25-29
第4章讨论  29-34
第5章结论  34-35
致谢  35-36
参考文献  36-39
攻读学位期间的研究成果  39-40
综述  40-45
  参考文献  44-45

羟基红花黄色素A对鼠Lewis肺癌移植瘤抑制作用及VEGF表达的影响

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