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PI3K/AKT信号通路在神经母细胞瘤细胞增殖和分化中的作用研究

作　者: 冯瑞华
导　师: 王珊
学　校: 重庆医科大学
专　业: 儿科学
关键词: 神经母细胞瘤 PI3K/AKT 增殖分化
分类号: R739.41
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

第一部分PI3K/AKT信号通路在神经母细胞瘤细胞增殖中的作用研究目的：探讨PI3K/AKT信号通路在神经母细胞瘤细胞增殖中的作用。方法：体外培养人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞，取对数生长期细胞，接种于96孔板，接种浓度（1-5）×105/ml，每孔100ul。接种24小时后，给予LY294002处理细胞，作用24h、48h；更换无血清培养基继续培养12h后用IGF-1处理细胞，作用12h、24h；MTT法测每组细胞OD值，计算细胞存活率。结果：24h、48h后LY294002组细胞存活率小于对照组，且细胞存活率随药物浓度及作用时间的增加而降低，差异有统计学意义，对照组各浓度之间差异无统计学意义；12h、24h后IGF-1组与对照组相比，细胞存活率增加，差异有统计学意义。结论：PI3K/AKT信号通路与神经母细胞瘤细胞的增殖过程密切相关，抑制PI3K/AKT信号通路可显著阻碍神经母细胞瘤细胞增殖，而PI3K/AKT信号通路激动剂可促进神经母细胞瘤增殖。第二部分PI3K/AKT信号通路在神经母细胞瘤细胞分化中的作用研究目的：探讨PI3K/AKT信号通路在神经母细胞瘤细胞分化中的作用。方法：体外培养人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞，取对数生长期细胞，接种于6孔板，接种浓度（1-5）×10~6/ml，每孔2ml。接种24小时后，给予LY294002处理细胞；IGF-1各组先更换无血清的培养基培养细胞12h后，再用IGF-1处理细胞；LY294002作用48h后，IGF-1作用12h后，倒置显微镜下观察细胞形态有无分化改变，荧光定量PCR（FQ-PCR）法检测TrkA基因mRNA的表达水平。结果：形态学观察，LY294002组和IGF-1组均未出现明显的分化形态学改变。FQ-PCR显示LY294002组细胞TrkA表达水平较DMSO对照组、空白对照组降低，差异有统计学意义；IGF-1组TrkA表达水平较DMSO对照组、空白对照组之间差异无统计学意义。结论：PI3K/AKT信号通路可能参与了神经母细胞瘤细胞的分化过程，抑制PI3K/AKT信号通路可能抑制神经母细胞瘤细胞分化。

全文目录

符号说明  5-7
摘要  7-9
ABSTRACT  9-12
前言  12-14
第一部分 PI3K/AKT 信号通路在神经母细胞瘤细胞增殖中的作用研究  14-24
  1 材料与方法  14-17
  2 结果  17-20
  3 讨论  20-23
  参考文献  23-24
第二部分 PI3K/AKT 信号通路在神经母细胞瘤细胞分化中的作用研究  24-37
  1 材料与方法  24-29
  2 结果  29-33
  3 讨论  33-36
  参考文献  36-37
结论  37-38
文献综述  38-49
  参考文献  45-49
致谢  49-50
攻读硕士期间发表的论文  50-51

PI3K/AKT信号通路在神经母细胞瘤细胞增殖和分化中的作用研究

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