乳鼠心肌细胞Cx43表达的作用目的：探讨不同TNF-α浓度作用下，乳鼠心肌细胞（NRCM）Cx43表达的变化情况及特点。方法：培养原代乳鼠心肌细胞。将培养的原代乳鼠心肌细胞随机分为4组：TNF-α干预组、TNF-α+螯合剂组、正常对照组、螯合剂组。原代心" />
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TNF-α对乳鼠心室肌细胞Cx43表达的影响

作　者: 钱程
导　师: 陈志坚
学　校: 华中科技大学
专　业: 心血管内科学
关键词: TNF-α Cx43磷酸化 Cx43非磷酸化 乳鼠心肌细胞 P38MAP信号途径 乳鼠原代 心肌细胞 SB203580
分类号: R541
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


第一部分TNF-α对心肌细胞 的学位论文">乳鼠心肌细胞Cx43表达的作用目的：探讨不同TNF-α浓度作用下，乳鼠心肌细胞（NRCM）Cx43表达的变化情况及特点。方法：培养原代乳鼠心肌细胞。将培养的原代乳鼠心肌细胞随机分为4组：TNF-α干预组、TNF-α+螯合剂组、正常对照组、螯合剂组。原代心肌细胞培养48h后，TNF-α干预组细胞与不同浓度的TNF-α共同孵育。螯合剂组细胞除加TNF-α处理外，加用RhTNFR:Fc预先处理，正常组不做任何处理。24h后，采用WesternBlot法和激光共聚焦显微镜共同检测Cx43的表达情况。结果：与正常组对比，在TNF-α干预组，随着TNF-α浓度的增加，磷酸化的Cx43(P-Cx43)表达减少(p<0.05)，非磷酸化的Cx43(NP-Cx43)含量增加(p<0.05)；与TNF-α干预组比，TNF-α+螯合剂组磷酸化Cx43表达减少的幅度降低(p<0.05)，非磷酸化Cx43表达增加的幅度也减少(p<0.05)，这两组之间的差别具有统计学意义。单加螯合剂组Cx43表达无明显改变。激光共聚焦的结果与westernblot的结果一致。结论：在TNF-α的作用下，乳鼠心室肌细胞Cx43的表达发生了变化，即磷酸化的Cx43表达减少，非磷酸化的Cx43表达增多。TNF-α螯合剂可以部分阻断这一作用。第二部分TNF-α调节Cx43表达的调控机制目的：研究TNF-α调节Cx43的表达的作用机制方法：培养乳鼠原代心肌细胞。将培养的乳鼠原代心肌细胞随机分为四组：正常对照组、TNF-α干预组、TNF-α+P38MAP信号阻断剂组（SB203580）、P38MAP信号阻断剂(SB203580)组。乳鼠原代心肌细胞培养48h后，依据上述分组做相应处理。24h后，采用WesternBlot法和激光共聚焦显微镜共同检测Cx43的表达情况。结果：与TNF-α干预组相比，TNF-α+P38MAP信号阻断剂组磷酸化Cx43表达减少的幅度有所降低(p<0.05)，非磷酸化Cx43表达增加的幅度也有所降低(P<0.05)，趋向于正常组。单用P38MAP信号阻断剂组Cx43含量与正常相比，无显著差异。结论：TNF-α可以通过P38MAPK信号途径，调节乳鼠心室肌细胞Cx43的表达。P38MAPK信号通路是TNF-α调节乳鼠心室肌细胞Cx43表达的重要信号通路。

全文目录


英文缩略词表及中文对照  5-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-11
前言  11-16
  参考文献  13-16
第一部分 TNF-a对乳鼠心室肌细胞Cx43表达的作用  16-34
  材料与方法  16-23
  结果  23-30
  讨论  30-32
  参考文献  32-34
第二部分 TNF-a调控乳鼠心室肌细胞Cx43表达的机制  34-44
  1. 材料  34-35
  2. 试验方法  35-37
  4. 激光共聚焦法检测心肌细胞 的学位论文">乳鼠心肌细胞Cx43表达变化  37-38
  结果  38-41
  讨论  41-42
  参考文献  42-44
综述  44-57
  参考文献  48-57
致谢  57

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