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Visfatin对心肌细胞炎性因子ICAM-1，VCAM-1表达的影响

作　者: 李文蕾
导　师: 霍洪亮
学　校: 东北师范大学
专　业: 生理学
关键词: Visfatin 心肌细胞 ICAM-1 VCAM-1
分类号: R363
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 39次
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内容摘要


LPS和Visfatin对细胞损伤方面的研究虽然有很多报道,但是有关两者对心肌细胞炎症共同作用的报道很少,所以有必要进行更加深入的研究。[研究背景]：Visfatin是最近几年发现的由内脏脂肪分泌的脂肪因子,对细胞的炎性产生及发展有一定的促进作用。LPS是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分,是内毒素的特异性抗原,能够引起机体的微循环障碍。本文主要是研究Visfatin在LPS诱导的心肌细胞炎症作用方面的机制。[实验原理]：心肌细胞在LPS炎性模型中加入Visfatin,细胞外刺激使得I-κB激酶复合体活化, I-κB磷酸化,使得以无活性形式存于细胞浆中的NF-κB和I-κB的复合体分离,NF-κB暴露核定位位点,游离的NF-κB迅速移位,进入到细胞核,与特异性KB序列结合,诱导相关基因转录,引起粘附因子ICAM-1和VCAM-1的表达,诱导了白细胞的聚集和粘附,导致了多种炎症因子的表达,从而产生心肌损伤。[实验方法]：MTT法检测了不同浓度下的LPS和Visfatin对心肌的损伤程度,确定实验浓度。利用RT-PCR检测了粘附因子的mRNA表达情况后,并用Western blot法检测了相应蛋白表达,最后通过Western blot法检测了NF-κB p65的入核及I-κB的磷酸化情况。[实验结果]：在LPS、Visfatin单独处理的心肌细胞中发现ICAM-1和VCAM-1的表达量对比对照组均有所增加,二者共同作用时发现粘附因子的表达量明显高于单独处理组,而这个过程是通过I-KB的活化导致NF-κB入核,最终引起了下游粘附因子的表达途径,从而引起了心肌细胞的损伤,活性下降。结论：Visfatin对LPS诱导的原代心肌细胞炎性因子ICAM-1和VCAM-1的表达具有显著的促进作用,而这一过程是通过I-κB的磷酸化降解释放出NF-κB复合体,增加了NF-κB p65的入核,启动了下游的粘附因子mRNA和蛋白的表达。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-6
目录  6-8
引言  8-14
  1.1 Visfatin  8-10
    1.1.1 Visfatin的发现  8-9
    1.1.2 Visfatin在糖尿病和肥胖病人中的作用  9-10
    1.1.3 Visfatin对炎症反应的影响  10
  1.2 LPS  10-11
    1.2.1 LPS的结构及功能  10-11
    1.2.2 LPS的毒性反应  11
    1.2.3 LPS炎性产生的原因及结果  11
  1.3 NF-κB  11-13
    1.3.1 NF-κ B的结构与功能  11-12
    1.3.2 NF-κ B活化的机制  12
    1.3.3 NF-κ B与炎症因子表达的关系  12-13
  1.4 研究目的及意义  13-14
实验材料与方法  14-20
  2.1 材料  14-15
    2.1.1 实验动物  14
    2.1.2 实验试剂与耗材  14
    2.1.3 实验仪器  14-15
  2.2 实验方法  15-19
    2.2.1 心肌细胞的分离培养  15
    2.2.2 实验分组  15-16
    2.2.3 心肌细胞的形态学观察  16
    2.2.4 MTT法  16
    2.2.5 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)  16-17
    2.2.6 Western blot  17-19
  2.3 数据分析  19-20
结果  20-29
  3.1 不同时期下心肌细胞的形态学观察  20-21
  3.2 Visfatin、LPS对心肌细胞存活率的影响  21-22
  3.3 Visfatin对LPS诱导下的两种粘附因子ICAM-1、VCAM-1表达的影响  22-24
  3.4 Visfatin对LPS诱导的心肌I-κBα的磷酸化的影响  24-26
  3.5 Visfatin对LPS诱导的心肌NF-κB p65入核的影响  26-27
  3.6 Visfatin与核转录因子NF-κB的抑制蛋白I-κB、NF-κ B p65入核及ICAM-1和VCAM-1的mRNA及蛋白表达的相关性  27-29
讨论  29-32
结论  32-33
创新点  33-34
参考文献  34-39
英文缩写  39-40
致谢  40

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 病理学 > 病理生理学
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