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不同生长时期人参中主要活性成分的比较研究

作　者: 陈雨
导　师: 赵雨
学　校: 长春中医药大学
专　业: 中药学
关键词: 人参生长时期活性成分变化
分类号: R284.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的分别以五年生人参不同生长时期（出苗期、展叶期、开花期、绿果期、红果期、果后参根生长期及枯萎期）的不同部位（根、茎、叶）为材料，考察人参生长发育过程中皂苷、糖、蛋白等主要活性成分变化趋势，为人参有效成分的合理开发以及提高人参资源的高效利用提供科学依据。方法采用高效液相色谱法（HPLC）考察人参总皂苷以及Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3等8种单体皂苷的含量变化动态；应用3、5二硝基水杨酸法、苯酚-硫酸法及碘显色法考察总糖、还原糖、可溶性多糖及淀粉的含量变化动态；采用高通量转录组测序技术，考察超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶（PPO）、抗坏血酸氧化还原酶（APX）及苹果酸脱氢酶（MDH）等人参重要活性蛋白的基因表达量变化。结果1人参根中皂苷Rg1、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3含量变化动态相似，均在果后参根生长期时含量最高；皂苷Re在展叶期含量最高；总皂苷在红果期含量最低，果后参根生长期含量最高。人参根中总糖含量在展叶期以前成明显下降趋势，从展叶期到果后参根生长期呈现上升趋势；还原糖含量整体呈上升趋势，只在进入枯萎期后有所下降；可溶性多糖含量从出苗期到红果期维持在一个较为恒定的水平，进入果后参根生长期以后逐渐升高，到达枯萎期时有所下降；淀粉含量从出苗期开始呈上升趋势，在结果期达到最高，此后一直维持在此水平直至枯萎期。随着人参的生长发育，人参根中SOD、MDH表达量没有差异变化，POD、CAT及PPO的表达出现下调趋势，APX的表达发生上调。2人参茎中人参皂苷Rg1、Re、Rd含量在人参生长过程中没有明显变化，皂苷Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rg3及总皂苷含量在展叶期最高，随后有所下降，并稳定在同一水平。整个生长发育时期，人参茎中总糖、还原糖、可溶性多糖以及淀粉含量均维持在一个相近水平，且含量较低。随着人参生长发育的进行，POD活力变化较为剧烈，绿果期表达量最低，展叶期表达量最高；中SOD、PPO表达量基本没有差异变化；APX、CAT表达上调，MDH表达下调。3人参叶中8种人参皂苷的含量明显高于另外两个部位中的含量，皂苷Rg1、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rg3的含量在果后参根生长期时到达最高，皂苷Rd在绿果期时达到最高；皂苷Re的含量是8种单体皂苷中最高的，且在人参生长进入到红果期时迅速达到最高，最高含量与最低含量相差20倍；总皂苷在红果期是含量最高。在人参整个生长发育时期过程中，人参叶的总糖、还原糖、可溶性多糖以及淀粉含量均维持在一个较低水平。人参叶中SOD表达量变化较为剧烈，展叶期最高，绿果期最低；PPO及APX表达量基本没有差异变化；POD表达下调；CAT表达上调；MDH表达量变化较为剧烈，以红果期最高，开花期最低。结论1以五年生人参不同生长时期（出苗期、展叶期、开花期、绿果期、红果期、果后参根生长期及枯萎期）的三个部位（根、茎、叶）为材料，分别以HPLC方法、苯酚-硫酸法及高通量测序技术对人参中单体皂苷、稀有皂苷、总皂苷、糖类成分及重要活性蛋白等表达量进行检测。2皂苷Rg1、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3及总皂苷的含量于果后参根生长期时人参叶中含量最高。皂苷Re的含量于红果期时人参叶中含量最高。3人参中总糖、还原糖、水溶性多糖及淀粉的含量在果后参根生长期时人参根中含量最高。4SOD、POD表达量最高值出现在开花期人参根中，CAT、MDH表达量最高值出现在红果期时人参叶中，PPO表达量最高值出现在开花期时人参叶中，APX表达量最高值出现在果后参根生长期时人参叶中。5果后参根生长期时皂苷类成分在人参叶中含量最高；糖类成分在人参根中含量最高；SOD、POD在人参根中表达量最高，CAT在人参茎中表达量最高，PPO、APX、MDH在人参叶中表达量最高。

全文目录

中文摘要  7-9
ABSTRACT  9-12
英文缩略语  12-13
前言  13-14
文献综述  14-21
  1 人参的物候期  14-15
    1.1 出苗期  14
    1.2 展叶期  14
    1.3 开花期  14
    1.4 绿果期  14
    1.5 红果期  14
    1.6 果后参根生长期  14-15
    1.7 枯萎期  15
  2 人参中主要活性成分的检测研究  15-17
    2.1 皂苷的检测研究  15-16
    2.2 多糖的检测研究  16
    2.3 蛋白的检测研究  16-17
  3 有效成分的药理作用  17-20
    3.1 人参皂苷的药理作用  17-18
    3.2 多糖的药理作用  18-19
    3.3 蛋白的药理作用  19-20
  4 本研究的内容和意义  20-21
实验研究  21-28
  1 实验材料  21-23
    1.1 植物材料  21
    1.2 主要试剂  21-22
    1.3 仪器  22-23
    1.4 其他材料  23
  2 实验方法  23-28
    2.1 样品的制备  23
    2.2 人参皂苷的测定  23-24
    2.3 人参中总糖的测定  24
    2.4 人参中还原糖的测定  24-25
    2.5 人参中多糖的测定  25
    2.6 人参中淀粉的测定  25
    2.7 人参蛋白的检测  25-28
结果与分析  28-47
  1 不同生长时期的人参样品分类  28
  2 人参生长发育过程中不同部位的皂苷含量变化动态  28-40
    2.1 人参皂苷 Rg1 的含量变化动态  28-29
    2.2 人参皂苷 Re 的含量变化动态  29-30
    2.3 人参皂苷 Rf 的含量变化动态  30-31
    2.4 人参皂苷 Rb1 的含量变化动态  31-33
    2.5 人参皂苷 Rc 的含量变化动态  33-34
    2.6 人参皂苷 Rb2 的含量变化动态  34-35
    2.7 人参皂苷 Rd 的含量变化动态  35-37
    2.8 人参皂苷 Rg3 的含量变化动态  37-38
    2.9 人参总皂苷的含量变化动态  38-39
    2.10 果后参根生长期时皂苷类成分含量在不同部位的差异  39-40
  3 人参生长发育过程中不同部位的糖类变化分析  40-43
    3.1 人参中总糖的含量变化动态  40
    3.2 人参中还原糖的含量变化动态  40-41
    3.3 人参中可溶性多糖的含量变化动态  41-42
    3.4 人参中淀粉的含量变化动态  42
    3.5 果后参根生长期时糖类成分含量在不同部位的差异  42-43
  4 人参生长发育过程中关键蛋白的基因表达变化分析  43-47
    4.1 人参根中 SOD、POD、CAT、PPO、APX、MDH 的变化  43-44
    4.2 人参茎中 SOD、POD、CAT、PPO、APX、MDH 的变化  44-45
    4.3 人参叶中 SOD、POD、CAT、PPO、APX、MDH 的变化  45-46
    4.4 果后参根生长期时关键蛋白表达量在不同部位的差异  46-47
讨论  47-49
  1 生长发育过程中的皂苷含量变化  47
  2 人参生长发育过程中糖类的含量变化  47-48
  3 人参生长发育过程中关键蛋白（酶）的变化  48-49
结论  49-50
致谢  50-51
参考文献  51-56
附录：攻读硕士学位期间发表论文  56

不同生长时期人参中主要活性成分的比较研究

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