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镉对泥蚶脂质代谢的影响研究
作 者: 郭利攀
导 师: 张虹
学 校: 浙江工商大学
专 业: 食品科学与工程
关键词: 泥蚶 元素 抗氧化物酶 脂质过氧化 磷脂 代谢
分类号: S917.4
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
本文主要分为三个部分。第一部分,从我国沿海重金属污染加剧的现状出发,以传统养殖贝类泥蚶为研究对象,建立并优化了火焰原子吸收光谱法(FAAS)和电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)用于分析泥蚶中24种矿物元素含量,并对测定结果进行安全性评价,重点对镉元素在泥蚶体内的分布情况进行了分析;第二部分,根据镉元素在泥蚶体内含量的差异,对泥蚶鳃和内脏团中的抗氧化酶活性和脂质过氧化产物的含量进行测定,探讨镉元素对泥蚶脂质过氧化的影响;第三部分,采用直接进样电喷雾串联质谱法(ESI-MS/MS)测定泥蚶肌肉中磷脂的分子种和含量,并结合镉元素在泥蚶体内含量的差异,探讨镉元素对泥蚶磷脂代谢的影响。首先,本文建立了FAAS法和ICP-MS法用于分析泥蚶矿物元素组成,优化了样品前处理条件和仪器参数,结果表明,待测元素在相应浓度范围内的线性良好(R2:0.9957-0.9999)、检出限低(LOD:0.0018-0.3316)、灵敏度高,回收率(79.28%-102.36%)和精密度(RSD<5%)均满足分析要求。元素分析结果表明,泥蚶肌肉中K、Ca、Na、Mg、Fe和Zn等元素含量比较高,可以作为人体矿物元素的良好来源。基于相关限量标准的风险评价结果表明,泥蚶肌肉中的重金属元素Hg、Pb和Cr的含量均符合农产品安全质量-无公害水产品安全要求(GB18406.4-2001)、无公害食品-水产品中有毒有害物质限量(NY5073-2006)和欧盟委员会法规(EC629-2008),但Cd含量超标,所有样品中的Cd含量均超过国标(GB18496.4-2001)0.1mg/kg的标准,超标率为100%。结合美国环境保护署(USEPA)和世界卫生组织食品添加剂合作专家委员会(JECFA)的健康风险模型进行评价,结果表明,Mn、Fe、Cu、Zn、Pb、Hg和Cr风险值均在可接受的范围之类,但Cd风险值较大,应该采取一定的监控和治理措施。其次,根据泥蚶体内镉含量的差异,对其鳃和内脏团中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量进行了测定,探讨镉元素对泥蚶脂质过氧化的影响,结果表明,在不同的镉含量的样品中,泥蚶鳃和内脏团的SOD、CAT、GSH-Px活性和MDA含量存在较大的差异。在鳃中,SOD活性与镉含量整体呈负相关性,CAT活性、GSH-Px活性和MDA含量与镉含量整体呈正相关性;在内脏团中,SOD活性、GSH-Px活性和MDA含量与镉含量整体呈正相关性,CAT活性与镉含量整体呈负相关性。多元逐步回归分析结果表明,泥蚶中镉含量与抗氧化物酶活性和丙二醛含量存在显著的相关性。再次,本文建立并优化了ESI-MS/MS测定磷脂的方法,利用串联三重四级杆质谱的母离子扫描(PIS)和中性丢失扫描(NLS)功能,对泥蚶肌肉中的磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)和磷脂酰肌醇(PI)进行定性和定量分析,探讨镉元素对泥蚶磷脂代谢的影响。结果表明,泥蚶肌肉中共鉴定了31种PC、39种PE和14种PI,其含量和分子种随着镉含量的不同而呈现不同的变化规律:PC和PE总含量随着镉含量的增加而增加,PI总含量随着镉含量的增加而减少;分子种PC34:1、PC40:6、LPE28:4和PE36:5含量随着镉含量的增加而增加,分子种PC36:5、PC38:5、PE38:5、PE38:4、PI22:3、 PI38:5和PI38:4随着镉含量的增加而减少。多元逐步回归分析结果表明,泥蚶中镉含量与磷脂含量之间存在显著的相关性。
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全文目录
摘要 3-6 ABSTRACT 6-13 第一章 绪论 13-23 1.1 引言 13 1.2 泥蚶的营养价值与矿物元素分析 13-16 1.2.1 泥蚶的营养价值 13-14 1.2.2 泥蚶中矿物元素及其分析方法 14-16 1.3 镉对抗氧化酶活性与脂质过氧化的影响 16-19 1.3.1 镉的危害 16 1.3.2 脂质抗氧化酶概况 16-19 1.3.3 镉与抗氧化酶和脂质过氧化的关系 19 1.4 镉对磷脂代谢的影响 19-21 1.4.1 磷脂概况 19-20 1.4.2 磷脂研究方法 20 1.4.3 脂质代谢研究现状及镉与磷脂代谢的关系 20-21 1.5 选题背景、研究意义及研究内容 21-23 1.5.1 选题背景与研究意义 21-22 1.5.2 研究内容 22-23 第二章 泥蚶营养成分与矿物元素分析及安全性评价 23-40 2.1 材料、试剂与仪器 23-24 2.1.1 材料 23-24 2.1.2 试剂 24 2.1.3 仪器 24 2.2 实验方法 24-28 2.2.1 样品预处理 24-25 2.2.2 一般营养成分测定 25 2.2.3 矿物元素测定 25 2.2.4 仪器参数 25-26 2.2.5 健康风险评价方法 26-28 2.3 结果与讨论 28-38 2.3.1 样品预处理条件的选择 28 2.3.2 火焰原子吸收光谱法与电感耦合等离子体质谱法 28-32 2.3.3 泥蚶一般营养成分与矿物元素含量 32-36 2.3.4 安全性评价 36-38 2.4 小结 38-40 第三章 镉对泥蚶抗氧化酶活性及脂质过氧化的影响 40-53 3.1 材料、试剂与仪器 40-41 3.1.1 材料 40 3.1.2 试剂 40 3.1.3 仪器 40-41 3.2 实验方法 41-42 3.2.1 样品预处理 41 3.2.2 酶的提取 41 3.2.3 酶活性及丙二醛含量的测定方法 41 3.2.4 数据处理 41-42 3.3 结果与讨论 42-50 3.3.1 镉对泥蚶鳃和内脏团中SOD活性的影响 42-44 3.3.2 镉对泥蚶鳃和内脏团中CAT活性的影响 44-46 3.3.3 镉对泥蚶鳃和内脏团中GSH-Px活性的影响 46-48 3.3.4 镉对泥蚶鳃和内脏团中MDA含量的影响 48-50 3.4 重金属元素与抗氧化酶活性及丙二醛含量的相关性 50-52 3.5 小结 52-53 第四章 镉对泥蚶磷脂代谢的影响 53-74 4.1 材料、试剂与仪器 53-54 4.1.1 材料 53-54 4.1.2 试剂 54 4.1.3 仪器 54 4.2 实验方法 54-55 4.2.1 样品预处理 54 4.2.2 磷脂提取 54-55 4.2.3 质谱参数 55 4.2.4 磷脂的直接进样电喷雾串联质谱分析 55 4.2.5 数据处理 55 4.3 结果与讨论 55-71 4.3.1 质谱参数优化 55-56 4.3.2 磷脂总含量变化 56-61 4.3.3 磷脂分子种及其含量的变化 61-71 4.4 重金属元素与磷脂含量的相关性 71-73 4.5 小结 73-74 第五章 总结与创新点 74-76 5.1 总结 74-75 5.2 创新点 75-76 参考文献 76-86 附录一 中英文名词术语对照表 86-87 附录二 研究生期间发表的论文 87-88 致谢 88-89
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中图分类: > 农业科学 > 水产、渔业 > 水产基础科学 > 水产生物学 > 水产动物学
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