学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

氯霉素和呋喃唑酮代谢物检测技术和监测研究

作　者: 萨仁托雅（Tuoya Saren）
导　师: 张峰
学　校:
专　业: 海洋生物
关键词: 化学发光 分子印迹 氯霉素 呋喃唑酮代谢物 药物残留 水产品
分类号: S859.84
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
下　载: 4次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


一、本文对比研究了化学发光酶联免疫分析（CLEIA）与酶联免疫分析（ELISA）技术检测水产品中呋喃唑酮代谢物(AOZ)和氯霉素（CAP）残留。结果显示：通过对两种药物残留检测证明， CLEIA分析方法线性范围和检测限均优于ELISA分析方法且两种免疫分析法的添加回收率具有很好的相关性。CLEIA检测AOZ检出限为0.01μg/kg，线性范围为0.01μg/kg~2.56μg/kg，检测CAP的检出限为0.016μg/kg，线性范围为0.025μg/kg~6.4μg/kg。ELISA法检测AOZ检出限为0.1μg/kg，线性范围为0.1μg/kg~1.62μg/kg；CAP的检出限为0.05μg/kg，线性范围为0.05μg/kg~4.05μg/kg。CLEIA法检测CAP批内RSD小于11.3%，批间RSD小于20.9%，检测AOZ批内RSD小于11.1%，批间RSD小于18.3%，符合《兽药残留酶联免疫试剂(盒)备案参考评判标准》的规定。二、应用CLEIA检测和监测了大连及周边地区几种水产品中CAP和AOZ残留。结果如下：（1）在2013年3、6、9和12月采集的样品中，大连地区魁蚶、仿刺参、菲律宾蛤仔、大连紫海胆和虾夷扇贝的食用组织未检测出呋喃唑酮代谢物（AOZ）。在2013年11月采集的样品中，庄河、营口和锦州地区几种食用贝类中AOZ未超标。（2）大连地区几种贝类不同时间检测结果显示，菲律宾蛤仔、魁蚶、虾夷扇贝三种贝类都不同程度检测出有氯霉素（CAP）残留。在3月的采集样品中，菲律宾蛤仔体内CAP平均含量为0.0893μg/kg；魁蚶体内CAP平均含量为0.069μg/kg；虾夷扇贝体内CAP平均含量为0.0741μg/kg。在6月的采集样品中，菲律宾蛤仔体内CAP残留量平均含量为0.0907μg/kg；魁蚶体内CAP平均含量为0.061μg/kg；虾夷扇贝体内CAP平均含量为0.0657μg/kg。在9月的采集样品中，菲律宾蛤仔体内CAP残留量平均含量为0.1166μg/kg；魁蚶体内CAP残留量平均含量为0.0676μg/kg；虾夷扇贝体内CAP平均含量为0.072μg/kg。在12月的采集样品中，菲律宾蛤仔体内CAP残留量平均含量为0.1444μg/kg；魁蚶体内CAP平均含量为0.0693μg/kg；虾夷扇贝体内CAP平均含量为0.076μg/kg。菲律宾蛤仔体内CAP残留量有升高趋势，魁蚶、虾夷扇贝含量四季度变化不大。（3）庄河、营口和锦州几种食用贝类中检测出有氯霉素残留，庄河地区的縊蛏CAP含量为0.201μg/kg，虾夷扇贝CAP含量为0.108μg/kg，四角蛤蜊CAP含量为0.562μg/kg，紫石房蛤CAP含量为0.229μg/kg，太平洋牡蛎0.435μg/kg。营口地区的菲律宾蛤仔CAP含量为0.205μg/kg，中国蛤蜊CAP含量为0.298μg/kg，文蛤CAP含量为0.530μg/kg，栉孔扇贝CAP含量为0.107μg/kg。锦州地区的中国蛤蜊CAP含量为0.199μg/kg，魁蚶CAP含量为0.105μg/kg，菲律宾蛤仔CAP含量为0.810μg/kg。庄河地区的四角蛤蜊和太平洋牡蛎，营口地区的文蛤，锦州地区的菲律宾蛤仔等存在氯霉素残留超标现象。三、建立了一种应用分子印迹聚合物替代抗体测定氯霉素的直接竞争酶联免疫法。以氯霉素为模板分子，甲基丙烯酸为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，乙腈为致孔剂，偶氮二异丁腈为引发剂采用沉淀聚合法合成氯霉素分子印迹聚合物。60℃下聚合反应20h，模板分子、功能单体、交联剂的摩尔比为1:4:20，模板分子的物质的量为0.25mmol，溶剂的量为35ml，引发剂的量为20mg时，合成的分子印迹聚合物对氯霉素的吸附效果最佳。合成的氯霉素分子印记聚合物具有高稳定性、强的特异吸附性、可重复使用等特点。将此印记聚合物作为氯霉素的人工抗体代替氯霉素试剂盒中的抗体，并与化学发光免疫检测方法联用来检测水产品种氯霉素的残留量。用0.1%聚乙烯醇甲醇与水溶液将氯霉素分子印迹聚合物固定在96孔板上。采用直接竞争反应模式，以辣根过氧化物酶作为标记物，以过氧化氢（H2O2）--鲁米诺（luminol）为发光体系，以氯霉素分子印迹聚合物捕获氯霉素，测量化学发光强度定量检测氯霉素。结果显示方法的线性范围为0.15~4.80μg/kg，线性方程为y=-3336.96x+18165.06，相关系数为0.98，检出限为0.10μg/kg，回收率在85.3%~92.6%之间，批内RSD小于9.2%，批间RSD小于16.6%。

全文目录


摘要  4-6
Abstract  6-11
第一章 综述  11-25
  1 呋喃唑酮及其代谢物概述  11-13
    1.1 呋喃唑酮及其代谢物概况  11-12
    1.2 国内呋喃唑酮残留现状  12
    1.3 国内外呋喃唑酮及其代谢物检测发展与现状  12-13
  2 氯霉素概述  13-16
    2.1 氯霉素概况  13-14
    2.2 国内氯霉素残留现状  14-15
    2.3 国内外氯霉素检测发展与现状  15-16
  3 化学发光免疫分析法研究与进展  16-18
    3.1 化学发光免疫分析（Chemiluminescence Immunoassay,CLIA）原理  16
    3.2 化学发光免疫分析类型  16-18
      3.2.1 直接化学发光免疫分析  16-17
      3.2.2 化学发光酶免疫分析  17
      3.2.3 电化学发光免疫分析  17-18
    3.3 化学发光免疫分析技术的应用  18
    3.4 展望  18
  4 分子印迹技术研究与应用进展  18-25
    4.1 分子印迹技术原理和制备方法  19-21
      4.1.1 分子印迹技术原理  19-20
      4.1.2 分子印迹技术制备方法  20-21
    4.2 分子印迹技术的应用  21-23
      4.2.1 分子印迹用于分离分析  21-22
        4.2.1.1 色谱分离  21
        4.2.1.2 固相萃取  21-22
        4.2.1.3 膜分离  22
      4.2.2 分子印迹用于免疫分析  22
      4.2.3 分子印迹在传感器方面的应用  22-23
      4.2.4 分子印迹在酶催化方面的应用  23
    4.3 存在的问题与展望  23-25
第二章 化学发光免疫分析与酶联免疫分析水产品药物残留检测比较研究  25-34
  1 材料与方法  25-29
    1.1 试剂与仪器  25-26
    1.2 药品  26-27
      1.2.1 药品配制  26
      1.2.2 化学发光底物液配制及可靠性验证  26-27
    1.3 实验方法  27-29
      1.3.1 样品前处理  27-28
      1.3.2 化学发光酶联免疫分析方法和酶联免疫分析方法[111]  28
      1.3.3 化学发光免疫分析法检测仿刺参中 CAP 和 AOZ 的标准曲线和检出限  28
      1.3.4 精密度的测定  28-29
      1.3.5 准确度的测定  29
      1.3.6 化学发光免疫分析法和酶联免疫分析法的相关性分析  29
  2 实验结果  29-32
    2.1 化学发光免疫分析法检测仿刺参中 AOZ 和 CAP 的标准曲线和检出限  29
    2.2 精密度的测定  29-30
    2.3 准确度的测定  30
    2.4 化学发光免疫分析法和酶联免疫分析法的相关性分析  30-32
  3 结论  32-33
  4 讨论  33-34
第三章 大连及周边地区几种水产品中氯霉素和呋喃唑酮代谢物残留情况监测  34-41
  1 材料与方法  34-37
    1.1 样品采集  34-35
    1.2 样品保存  35
    1.3 化学发光免疫分析法检测几种水产品中氯霉素和呋喃唑酮代谢物残留  35-37
      1.3.1 试剂与仪器  35-36
      1.3.2 实验方法  36-37
        1.3.2.1 药品的配制  36
        1.3.2.2 样品前处理  36
        1.3.2.3 化学发光酶联免疫分析方法[111]  36-37
  2 结果  37-39
    2.1 大连及其周边地区水产品中氯霉素和呋喃唑酮代谢物残留量  37-39
  3 结论  39-40
  4 讨论  40-41
第四章 氯霉素分子印迹-化学发光免疫分析检测技术研究  41-49
  1 材料与方法  41-43
    1.1 试剂与仪器  41-42
    1.2 实验方法  42-43
      1.2.1 紫外分光光度分析  42
      1.2.2 分子印迹聚合物的制备  42
      1.2.3 吸附性能研究  42
      1.2.4 氯霉素分子印迹-化学发光免疫分析法  42-43
      1.2.5 氯霉素分子印迹-化学发光免疫分析法的标准曲线、检出限、精密度和回收率  43
  2 结果  43-47
    2.1 紫外分光光度分析  43-44
    2.2 聚合物的选择  44-45
    2.3 吸附时间的选择  45
    2.4 CAP-MIP 的吸附特异性  45-46
    2.5 氯霉素分子印迹-化学发光免疫分析法的标准曲线、检出限、精密度和回收率  46-47
    2.6 样品分析与试剂盒验证  47
  3 结论  47-48
  4 讨论  48-49
参考文献  49-57
攻读学位期间发表论文情况  57-60
致谢  60

相似论文

  1. 罗丹明B和罗丹明6G的印迹聚合物制备及性能,O631.3
  2. 负载铈活性炭催化臭氧化氯霉素研究,X703
  3. 芴甲氧羰基-D-色氨酸及D-苯丙氨酸分子印迹聚合物的制备及分离性能研究,O631.3
  4. 奶粉中三聚氰胺分析方法研究及快速测定体系的建立,O657.3
  5. 温州水产品加工业的现状与发展对策的研究,F326.4
  6. 联萘酚与氨基酸及其衍生物分子印迹聚合物的制备及手性分离,O631.3
  7. 分子印迹聚合物微球的制备及特性评价,O631.3
  8. 流动注射化学发光法测定环境水中有机污染物的研究,X832
  9. 用于药物成分分离的分子印迹聚合物微球的制备、性能及其检测应用研究,O631.3
  10. 光谱法和分子模拟研究氯霉素—环糊精包合作用,TQ461
  11. 分子印迹聚合物的制备及其在固相萃取中的应用,O631.3
  12. 磁性分子印迹聚合物的制备与性能评价,O631.3
  13. 基于金纳米的分子探针研究,TB383.1
  14. 分子印迹聚合物微球的制备及其在固相萃取中的应用,O631.3
  15. 电化学原位制备分子印迹聚合物及其表征,O631.3
  16. 牺牲硅胶法制备烟酸分子印迹聚合物及其性能研究,O631.3
  17. 基于双边FTA视角的中国与挪威水产品贸易研究,F323.7
  18. S-布洛芬分子印迹膜制备及其手性拆分性能的研究,O631.3
  19. 犬诱导发情及发情期体内生殖激素的测定,S829.2
  20. 抗氯霉素单克隆抗体的制备及一步式化学发光酶免疫分析方法的建立,S852.43
  21. 新型分子印迹聚合物的制备及吸附性能的研究,O631.3

中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 兽医药物学 > 兽医毒物学 > 动物性食品中化学物残留
© 2012 www.xueweilunwen.com