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细粒棘球蚴的流行病调查及CO1与ND1基因序列分析

作　者: 李滨
导　师: 杨莲茹
学　校: 内蒙古农业大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 细粒棘球蚴 流行病学调查 CO1基因 ND1基因
分类号: S855.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


为了解细粒棘球蚴种株和人畜感染情况,确定内蒙古地区细粒棘球蚴的基因型。本研究对内蒙古一些地区(巴彦淖尔市、锡林郭勒盟、乌兰察布市、鄂尔多斯市)2938只羊、113头牛进行了细粒棘球蚴病流行病学调查,并对锡林浩特市某医院6名患者肝脏手术摘取的包囊进行了鉴定。与此同时,还在内蒙古部分地区(巴彦淖尔市、锡林郭勒盟、乌兰察布市)采集了226份犬粪,采用ELISA方法对犬细粒棘球绦虫粪抗原进行了检测。对流行病学调查获得的细粒棘球蚴包囊,通过PCR技术,对其CO1和ND1基因部分序列进行了克隆和测序,将测出的细粒棘球蚴CO1基因序列与GenBank中已登录的新疆株细粒棘球蚴CO1基因相对比,掌握其种株变异情况。同时,根据已测得的细粒棘球蚴ND1基因序列,确定细粒棘球蚴的基因型。研究结果如下：1.调查的2938只羊中,仅西乌旗1只成年羊感染细粒棘球蚴病,包囊寄生在患羊的肝脏上；113头牛均未感染细粒棘球蚴病；6名患者肝脏手术摘取的包囊,均为细粒棘球蚴。2.对226份犬细粒棘球绦虫粪抗原检测结果表明,乌拉特中旗样品阳性率为20%。四子王旗样品阳性率为3.8%,东乌旗样品阳性率为13.8%,锡林浩特市样品阳性率为8%,西乌旗样品阳性率为13.3%。3.扩增出的西乌旗羊株细粒棘球蚴和锡林浩特市人株的细粒棘球蚴CO1基因序列长度均为936bp。与GenBank中的新疆株细粒棘球蚴的CO1基因序列相对比,西乌旗羊株细粒棘球蚴与新疆株细粒棘球蚴CO1基因相应区域存在6个变异位点,突变类型为转换,同源性为99.3%；锡林浩特市人株细粒棘球蚴与新疆株细粒棘球蚴CO1基因相应区域存在13个变异位点,突变类型为转换,同源性为98.6%。4.经DNAStar5.0软件分析西乌旗羊株细粒棘球蚴和锡林浩特市人株细粒棘球蚴均为G1型。上述研究结果表明,细粒棘球蚴病在所调查的地区感染率很低。西乌旗羊株细粒棘球蚴和锡林浩特市人株细粒棘球蚴的CO1基因序列与GenBank中的新疆株细粒棘球蚴的CO1基因序列的同源性很高。流行病学调查所获得的羊株细粒棘球蚴和人株细粒棘球蚴均为G1型。本研究结果为细粒棘球蚴病通用诊断试剂盒研制奠定了科学依据。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-6
目录  6-8
插图和附表清单  8-9
缩略语表  9-10
1 前言  10-19
  1.1 细粒棘球蚴病概述  10-15
    1.1.1 形态特征与发育  10
    1.1.2 分布  10-11
    1.1.3 流行病学  11-12
    1.1.4 生活史  12
    1.1.5 危害与致病作用及症状  12-13
    1.1.6 诊断与防治  13-15
  1.2 虫株鉴定与基因型  15-18
    1.2.1 虫株鉴定  15-17
    1.2.2 基因型  17-18
  1.3 线粒体DNA  18-19
    1.3.1 线粒体DNA的概述  18
    1.3.2 细粒棘球蚴线粒体DNA的结构  18-19
  1.4 本研究的目的及意义  19
2 研究一 内蒙古地区细粒棘球蚴病流行病学调查  19-23
  2.1 材料与方法  19-20
    2.1.1 材料  19-20
    2.1.2 方法  20
  2.2 结果  20-22
    2.2.1 包囊与原头蚴的形态  20-21
    2.2.2 流行病学调查结果  21-22
  2.3 讨论  22-23
  2.4 小结  23
3 研究二 犬细粒棘球绦虫粪抗原检测  23-29
  3.1 材料与方法  23-25
    3.1.1 材料  23-24
    3.1.2 方法  24-25
  3.2 结果  25-28
    3.2.1 质量控制  25
    3.2.2 结果判定  25-26
    3.2.3 检测结果  26-28
  3.3 讨论  28-29
  3.4 小结  29
4 研究三细粒棘球蚴C01基因序列分析  29-40
  4.1 材料和方法  29-34
    4.1.1 材料  29-31
    4.1.2 方法  31-34
  4.2 结果  34-39
    4.2.1 PCR扩增结果  34-35
    4.2.2 克隆结果  35
    4.2.3 测序结果  35-36
    4.2.4 序列比对结果  36-39
  4.3 讨论  39
  4.4 小结  39-40
5 研究四基于线粒体ND1基因的虫株鉴定  40-47
  5.1 材料和方法  40-41
    5.1.1 材料  40
    5.1.2 方法  40-41
  5.2 结果  41-46
    5.2.1 PCR扩增结果  41-42
    5.2.2 克隆结果  42-43
    5.2.3 测序结果  43-44
    5.2.4 序列比对结果  44-46
  5.3 讨论  46-47
  5.4 小结  47
6 结论  47-49
致谢  49-50
参考文献  50-55
作者简介  55

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 兽医寄生虫病学
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