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牛的个体识别鉴定及BMP7和USP26基因的多态性与牛精液品质的关联分析

作　者: 李倩倩
导　师: 王根林
学　校: 南京农业大学
专　业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 微卫星 个体识别 骨形态发生蛋白基因 泛素特异蛋白酶基因 多态性 精液性状
分类号: S823
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


本研究对用于人工授精的种公牛冻精进行了个体识别鉴定,建立了简单实用的牛个体识别检测技术,并从分子水平研究了BMP7和USP26基因的多态性与精液性状的相关性,筛查与公牛精液品质性状相关的分子标记,为培育高繁殖性能的公牛提供参考依据。一、利用17个微卫星标记及其荧光标记引物扩增短片段串联重复序列(short tandem repeat, STR),并通过全自动基因分析仪检测基因型,识别和鉴定了种公牛的冷冻精液。只允许一个位点有错配作为判别标准,对牛冷冻精液进行个体识别鉴定。结果表明,试验采用的17个微卫星座位的遗传多样性均较高,累积个体识别能力达99.99%,累积偶合率是9.74×10-10,17个微卫星位点适用于牛的个体识别鉴定。二、采用DNA测序技术和PCR-RFLP方法,分析171头中国荷斯坦牛BMP7基因第五内含子和USP26基因外显子的单核苷酸多态性,并分析了其基因多态与精液品质性状的相关性。结果表明,BMP7基因A76045G突变位点的3种基因型间GG型个体鲜精活力显著高于AA型个体(P<0.05)；USP26基因C1156T突变位点所有基因型间CT和CC型个体鲜精密度显著高于TT型个体(P<0.05)；两个突变位点不同的基因型与采精量和冻精活力无显著相关(P>0.05)。BMP7和USP26基因可作为未来提高荷斯坦公牛精液性状的重要分子标记。

全文目录


摘要  8-9
ABSTRACT  9-10
第一章 文献综述  10-30
  1 骨形态发生蛋白7(BMP7)的研究进展  10-12
    1.1 BMP7基因的结构特点  10-11
    1.2 BMP7基因在骨骼系统的作用  11
    1.3 BMP7基因在动物繁殖过程中的作用  11-12
  2 泛素特异蛋白酶的研究进展  12-14
    2.1 USP26基因的结构特点  13
    2.2 USP26基因的作用机理及多态性研究  13-14
  3 公牛繁殖性能相关基因的研究进展  14-16
    3.1 雄激素受体基因的研究进展  14
    3.2 促卵泡素受体基因的研究进展  14-15
    3.3 催乳素受体基因的研究进展  15
    3.4 热休克蛋白70基因(HSP70)的研究进展  15-16
  4 SNP检测研究方法  16-18
    4.1 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性口CR-RFLP)  16-17
    4.2 聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)  17
    4.3 测序(sequencing)  17-18
  5 微卫星标记及在亲缘关系鉴定中的应用  18-22
    5.1 微卫星的定义以及特点  18-19
    5.2 亲缘鉴定  19
    5.3 微卫星分析的原理  19
    5.4 微卫星标记在亲缘关系分析中的应用  19-22
  参考文献  22-30
第二章 实验研究  30-60
  一、利用微卫星标记对种公牛进行个体识别鉴定  30-42
    1.1 材料  30-32
    1.2 实验方法与步骤  32-34
    1.3 统计分析  34-35
    1.4 实验结果  35-38
    1.5 讨论  38-40
    参考文献  40-42
  二、牛BMP7及USP26基因多态性与精液品质的相关分析  42-60
    1 材料与方法  42-48
      1.1 材料  42-44
      1.2 实验方法  44-48
    2 结果和分析  48-55
      2.1 PCR扩增产物检测结果  48-49
      2.2 测序结果  49-50
      2.3 PCR-RFLP酶切结果  50-51
      2.4 基因座位在群体中的遗传特性  51-52
      2.5 基因多态性与精液品质性状的相关性分析  52-54
      2.6 牛BMP7和USP26基因的两个SNP突变位点基因型组合与精液品质性状的显著性检验  54-55
    3 讨论  55-58
      3.1 关于种公牛精液品质的影响因素  56
      3.2 基因座位群体遗传特性分析  56
      3.3 基因多态性与荷斯坦牛精液性状的关系  56-58
    参考文献  58-60
全文结论  60-62
致谢  62

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家畜 > 牛
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