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四川猕猴桃软腐病菌的鉴定、遗传多样性及侵染果实后的生理变化研究

作　者: 王晶晶
导　师: 龚国淑
学　校: 四川农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: 猕猴桃 软腐病 遗传多样性 生理
分类号: S436.634
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 48次
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内容摘要


猕猴桃软腐病是猕猴桃采后主要病害之一,每年都会造成巨大经济损失。红阳猕猴桃CActinidia chinensis Planch.var.rufopulpa Liang et Ferguson)是四川猕猴桃主要种植品种,由于红阳猕猴桃大面积种植,单一的遗传背景致使病虫害问题日益突出,特别是采后病害对猕猴桃产业的发展影响很大,其中猕猴桃软腐病是贮藏期的主要病害之一。本研究旨在鉴定四川猕猴桃软腐病菌,同时使用ISSR分子标记技术研究四川猕猴桃软腐病菌的遗传多样性,探讨了遗传多样性与地理来源、致病力间的关系,并用病原菌侵染果实后研究其生理变化,为抗病和抗性材料的筛选奠定基础。采用常规组织分离法对来自四川猕猴桃主产区都江堰、双流、邛崃、蒲江、雅安、苍溪、彭州等地的腐烂猕猴桃果实进行病原菌分离。综合形态学与分子学鉴定,结果表明,猕猴桃软腐病菌为Botryosphaeria dothidea。采用ISSR分子标记技术对分离得到的35个猕猴桃软腐病菌菌株进行遗传多样性分析。结果表明,ISSR分子标记技术能将35个菌株划分为5个类群,遗传距离变化范围为0.077～0.782,平均值为0.389,说明四川猕猴桃软腐病菌多态性较高。比较发现,菌株地理来源与其遗传距离的关系大于致病力与遗传距离的关系,遗传距离、地理来源、致病力强弱之间无明显相关关系。用猕猴桃软腐病菌接种猕猴桃果实后,果实中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性较对照均有大幅提高。其中SOD活性2d后是对照的2.6倍,POD活性是对照的2.2倍,CAT活性在4d后是对照的1.4倍。同时,果实中脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)含量也增加,3d后分别是对照的1.2倍、2.0倍。结果表明,在病原菌侵染后,寄主细胞通过提高抗氧化酶活性清除自由基,同时积累大量Pro以提高自身渗透调节能力,从而增强抗病能力,减轻细胞受到病原菌伤害。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-9
1 文献综述  9-17
  1.1 猕猴桃软腐病及病原菌  9-10
  1.2 病原菌的侵染途径  10
  1.3 病原菌分子鉴定及遗传多样性分析  10-12
    1.3.1 ITS序列分析在真菌研究中的应用  10-11
    1.3.2 ISSR分子标记技术在真菌研究中的应用  11-12
  1.4 猕猴桃逆境生理研究  12-16
    1.4.1 抗病机制概述  12
    1.4.2 寄主主要防御酶  12-14
    1.4.3 其它抗病相关物质  14-16
  1.5 猕猴桃软腐病防治研究现状  16
  1.6 研究目的及意义  16-17
2 材料与方法  17-23
  2.1 病原菌的分离与鉴定  17-19
    2.1.1 供试材料  17
    2.1.2 试验主要仪器和试剂  17
    2.1.3 试验方法  17-19
  2.2 病原菌遗传多样性分析  19-20
    2.2.1 供试材料  19
    2.2.2 主要试验仪器和设备  19
    2.2.3 试验方法  19-20
  2.3 接种病原菌后对猕猴桃生理的影响  20-23
    2.3.1 试验材料  20
    2.3.2 主要试验仪器和设备  20-21
    2.3.3 试验方法  21-23
3 结果与分析  23-31
  3.1 病原菌的分离与鉴定  23-27
    3.1.1 病原菌的分离  23
    3.1.2 病原菌的鉴定  23-27
  3.2 病原菌遗传多样性分析  27-28
  3.3 接种病原菌后对猕猴桃生理的影响  28-31
    3.3.1 对超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响  28-29
    3.3.2 对过氧化物酶(POD)活性的影响  29-30
    3.3.3 对过氧化氢酶(CAT)活性的影响  30
    3.3.4 对脯氨酸(Pro)含量的影响  30-31
    3.3.5 对丙二醛(MDA)含量的影响  31
4 结论与讨论  31-36
  4.1 结论  31-32
  4.2 讨论  32-36
    4.2.1 病原菌的分离与鉴定  32-33
    4.2.2 病原菌遗传多样性分析  33
    4.2.3 接种病原菌后对猕猴桃生理的影响  33-36
参考文献  36-42
致谢  42

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 园艺作物病虫害及其防治 > 果树病虫害 > 浆果类病虫害 > 猕猴桃病虫害
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