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河北和内蒙古马铃薯干腐病菌种类鉴定及优势病原菌的分子检测

作　者: 魏巍
导　师: 朱杰华
学　校: 河北农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: 马铃薯干腐病镰刀菌种类鉴定分子检测室内毒力
分类号: S435.32
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

马铃薯干腐病是马铃薯最重要的贮藏期病害之一，由多种镰刀菌引起。规模种植、机械化收获和批量贮藏使得干腐病的为害更加突出，现已成为马铃薯贮藏期烂窖的重要原因。明确干腐病菌种类是防治该病害的前提和基础，而实现病原菌的快速检测和筛选有效的化学药剂并正确使用则对病害诊断和科学防控具有重要的实践意义。本研究通过形态和分子相结合的方法对河北和内蒙古的干腐病菌进行了种类鉴定，并开展了优势病原菌分子检测和杀菌剂室内毒力测定及防治的研究工作。其主要研究结果如下：1.从河北承德、张家口和内蒙古呼和浩特采集了干腐病病薯300块，共分离到镰刀菌235株。鉴定出接骨木镰刀菌、锐顶镰刀菌、尖孢镰刀菌和芬芳镰刀菌4种病原菌，数量分别为149、80、3和3株。其中锐顶镰刀菌和芬芳镰刀菌在河北为首次报道，芬芳镰刀菌在内蒙古为首次报道。河北省的优势种群为接骨木镰刀菌和锐顶镰刀菌，其发生频率分别为50.00%和48.68%；内蒙古的优势种群为接骨木镰刀菌，其频率为87.95%。接骨木镰刀菌是两省共有的优势种群。2.基于镰刀菌翻译延伸因子序列设计了一对接骨木镰刀菌的特异引物Fs-F/Fs-R。利用该特异引物进行PCR扩增，可从接骨木镰刀菌中获得309bp的特异性扩增片段，而其他种类镰刀菌及马铃薯重要病害病原菌中均无此片段，说明该引物具有很好的专一性。该PCR反应对接骨木镰刀菌灵敏度检测结果表明，最低能检测到的基因组DNA浓度为70pg/μL。该引物也适用于发病马铃薯块茎中接骨木镰刀菌的快速检测。3.测定了咯菌腈、苯醚甲环唑、咪鲜胺、戊唑醇、氰烯菌酯和恶霉灵6种杀菌剂对4种马铃薯干腐病菌的室内毒力。结果表明，不同种类镰刀菌对药剂的敏感性存在差异。对4种镰刀菌抑制作用最强的药剂均为咪鲜胺，EC50值范围为0.010~0.057μg/mL；氰烯菌酯对接骨木镰刀菌菌丝生长无抑制作用；而恶霉灵的抑菌作用普遍较差，EC50值在9.340~64.408μg/mL之间；其它4种药剂效果较好。对接菌薯块进行药剂处理可抑制病斑横向扩展及病原菌纵向侵入，但不同杀菌剂防效不同。苯醚甲环唑、咪鲜胺和戊唑醇效果较佳。

河北和内蒙古马铃薯干腐病菌种类鉴定及优势病原菌的分子检测

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