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新生期母婴分离对幼鼠内脏高敏感性及室旁核和前皮质扣带回Fos蛋白表达影响

作　者: 吴国媛
导　师: 吴斌
学　校: 福建医科大学
专　业: 儿科学
关键词: 新生期母婴分离内脏痛觉敏化模型评价室旁核前皮质扣带回 Fos表达
分类号: R748
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:采用行为学和电生理学评价方法,观察不同新生期母婴分离(NMS)时间对幼鼠内脏痛觉敏感性影响,探讨采用NMS建立幼年动物内脏高敏感模型所需的NMS适宜时间,对进一步认识NMS远期危害,指导临床防治具有重要指导意义。方法: 50只SD新生大鼠随机分成NMS39、NMS60、NMS78、NMS120组和对照组(C组),每组10只;NMS39组出生后第2~14d每天与母鼠分离3h(8:00-11:00am),连续13d,NMS60组出生后第2~21d每天与母鼠分离3h(8:00-11:00am),连续20d,NMS78组生后第2~14d(每天上午、下午分别与母鼠分离3h(8:00-11:00am;14:00-17:00pm),连续13d,NMS120组生后2~21d每天上午、下午分别与母鼠分离3h(8:00-11:00am;14:00-17:00pm),连续20d,对照组不予任何处理,与母鼠同笼。常规饲养到6周龄,通过不同压力结直肠扩张(CRD)刺激后的腹壁撤退反射评分(AWR)、痛阈测定和腹外斜肌放电波幅值测量进行幼鼠肠道痛觉敏感性评价,测定幼鼠排便粪点数和玻璃小球排出时间评估幼鼠结肠动力,处死幼鼠,留取降结肠进行病理学检查。采用SPSS11.0软件进行统计分析,α=0.05为显著性检验标准。结果:随CRD压力增加,5组幼鼠AWR评分和腹外斜肌放电波幅值均逐渐增加;当CRD为20mmHg、40mmHg、60mmHg时,NMS39组、NMS60组、NMS78组、NMS120组幼鼠AWR评分明显高于C组,CRD为80mmHg时,5组幼鼠AWR评分差异无显著意义;当CRD为15mmHg、30mmHg、45 mmHg、60mmHg时,NMS39组、NMS60组、NMS78组、NMS120组幼鼠腹外斜肌放电波幅值明显高于C组;CRD为75mmHg时,5组幼鼠腹外斜肌放电波幅值差异无显著意义;NMS39组、NMS60组、NMS78组、NMS120组及C组幼鼠痛阈值分别为15.83±5.05mmHg、16.50±8.40mmHg、13.50±2.88 mmHg、16.00±5.28 mmHg、33.83±4.31mmHg;NMS39组、NMS60组、NMS78组、NMS120组幼鼠间AWR评分、腹外斜肌放电波幅值及痛阈差异均无显著性意义;5组幼鼠玻璃小球排出时间及粪点数差异无统计学意义;各组降结肠均未见明显病理组织损伤。结论:长时间不同新生期母婴分离均能造成大鼠痛阈下降,出现内脏高敏感性;并且这种高敏感性能持续到幼年期,但幼鼠没有肠道动力改变,也没有排便习惯改变及大便性状改变,同时没有明显的组织病理学改变。采用新生大鼠在出生后第2~14d给予每天母婴分离3h可建立一种理想的幼鼠内脏痛高敏感模型。目的:采用新生期母婴分离(NMS)建立幼鼠内脏高敏感性模型,观察内脏高敏感性模型幼鼠下丘脑室旁核(PVN)及前皮质扣带回(ACC)内Fos蛋白表达变化,探讨其在参与幼鼠内脏痛高敏感形成的机制,为临床上防治NMS所引起的危害及疾病提供理论依据。方法:32只SD新生大鼠按析因设计分成4组,每组8只。A1B1组为NMS组并在6周龄时接受CRD,A1B2组为NMS组,6周龄未给予CRD,A2B1组未给予NMS并在6周龄接受CRD,A2B2组未给予NMS,6周龄未给予CRD。A1B1、A2B1组幼鼠CRD接受刺激后2h和A1B2、A2B2组幼鼠留取PVN和ACC,应用免疫组织化学染色及计算机图像分析系统进行PVN和ACC内Fos蛋白免疫阳性(FLI)细胞数半定量分析。采用SPSS11.0软件包进行统计分析,α=0.05为显著性检验标准。结果:A1B1组、A1B2组、A2B1组及A2B2组幼鼠PVN内FLI细胞数分别为50.61±11.68、31.25±7.28、43.67±16.03和18.13±3.41,ACC内FLI细胞数分别为53.48±15.45、38.42±11.67、35.02±9.80和20.13±2.08。NMS和幼鼠6周龄时CRD均可使幼鼠PVN和ACC内FLI细胞数显著升高,差别均有统计学意义;NMS引起幼鼠PVN和ACC内FLI细胞数增加的主效应分别为10.03个、18.38个,幼鼠6周龄时CRD引起幼鼠PVN和ACC内FLI细胞数增加的主效应分别为22.45个、14.98个;NMS和CRD对PVN和ACC内FLI细胞数影响无交互作用。结论:新生期持续NMS可导致幼鼠中枢神经系统发育异常和敏化,接受伤害性CRD刺激后能显著引起PVN和ACC内神经元Fos蛋白高表达,出现内脏痛觉高敏感性;PVN和ACC是幼鼠大脑中枢内脏伤害性刺激信号传导处理过程和感知觉的重要区域,其激活和致敏在NMS诱导的幼鼠内脏痛高敏性中起到至关重要作用。

全文目录

中英文缩略词表  4-5
第一部分不同新生期母婴分离时间对幼年大鼠内脏高敏感性影响  5-26
  中文摘要  5-6
  英文摘要  6-8
  前言  8-10
  材料与方法  10-13
  结果  13-16
  讨论  16-22
  参考文献  22-26
第二部分新生期母婴分离致内脏高敏感模型幼鼠室旁核和前皮质扣带回 Fos 蛋白表达  26-45
  中文摘要  26-27
  英文摘要  27-28
  前言  28-30
  材料与方法  30-33
  结果  33-36
  讨论  36-41
  参考文献  41-45
结论  45-46
综述  46-59
致谢  59-60
附录  60

新生期母婴分离对幼鼠内脏高敏感性及室旁核和前皮质扣带回Fos蛋白表达影响

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