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压电和荧光IAA生物传感器的研制
作 者: 邹振华
导 师: 肖浪涛
学 校: 湖南农业大学
专 业: 生物物理学
关键词: IAA 压电生物传感器 荧光生物传感器 纳米金 量子点
分类号: TP212.3
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 42次
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内容摘要
植物激素吲哚-3-乙酸(IAA)是植物自身合成的一种微量有机物质,调节植物的生长发育过程。IAA在植物体内的含量非常低,且极易被光解和氧化,生理效应往往是跨度仅为几个细胞的浓度梯度所引起的。现有检测IAA方法与技术均存在一定的不足,很难实现对植物激素快速、精准及原位的检测,不能够满足目前对植物激素检测的需求。本文研制了基于纳米金修饰的压电生物传感器和基于量子点的荧光生物传感器,获得以下结果:(1)基于纳米金修饰的压电IAA生物传感器的研制采用压电免疫竞争的原理实现IAA的检测。试验检测结果表明,在IAA浓度为3.3-333.0ng/mL范围内呈线性关系,检测下限为3.3ng/mL.检测(?)BSA-IAA最适浓度为9.0μg/mL,鼠抗IAA抗体最佳用量为9μL;特异性试验结果表明该传感器具有很好的抗干扰性。传感器的再生性能好,可重复连续使用6次。(2)基于量子点的荧光IAA生物传感器的研制采用荧光共振能量转移原理实现IAA的检测,通过荧光分光光度计测定,获得IAA浓度与能量转移率的标准曲线。试验对IAA浓度0.1ng/mL-5μg/mL范围进行检测。检测结果表明,使用本试验研制的荧光生物传感器检测的IAA最低浓度为0.1ng/mL。DNA-IAA链最佳浓度为0.1μmol/mL;Cb链最佳浓度为1μmol/mL;QD605最适浓度为245μmol/mL;鼠抗IAA抗体浓度为0.5μM/mL;Ni链与Cb链杂交的最适温度为37℃。通过本试验研制的荧光生物传感器对拟南芥叶片鲜样中提取IAA,检测结果表明,0.5ng/g为检测下限,且准确性和稳定性好。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-10 第一章 绪论 10-16 1 植物激素及其生理功能 10 2 植物激素测定方法 10-14 2.1 生物试法 10 2.2 色谱检测法 10-11 2.3 免疫检测法 11 2.4 生物传感器检测方法 11-14 2.4.1 生物传感器的构成与工作原理 11-12 2.4.2 生物传感器的类型 12-13 2.4.3 生物传感器电极表面分子固定方法 13-14 2.4.4 纳米材料在生物传感器中的应用 14 3 本论文的研究思路 14-16 第二章 基于纳米金修饰的压电IAA免疫传感器研制 16-24 1 前言 16-17 2 材料与方法 17-19 2.1 试剂与仪器 17 2.2 纳米金标记羊抗鼠IgG抗体的方法与步骤 17-18 2.3 压电免疫传感器石英晶振表面修饰 18 2.4 压电免疫传感器的检测技术 18-19 2.5 传感器的特异性试验 19 3 结果与讨论 19-23 3.1 抗原BSA-IAA最适浓度的确定 19-20 3.2 扫描电镜(SEM)试验 20-21 3.3 鼠抗IAA抗体最适用量 21 3.4 样品分析 21-22 3.5 压电免疫传感器的特异性 22 3.6 传感器的再生 22-23 4 小结 23-24 第三章 基于量子点的荧光IAA生物传感器的研制 24-36 1 前言 24-25 2 IAA荧光生物传感器的研制 25-27 2.1 试剂与仪器 25 2.2 荧光生物传感器的组建和检测流程 25 2.3 EDC交联的链霉亲和素标记QD_(605) 25-26 2.4 Ni-IAA的配制 26 2.5 待测物IAA的配制 26-27 3 结果与讨论 27-34 3.1 验证试验药品有效性 27-30 3.2 QD_(605)最适浓度的确定 30-31 3.3 Ni链最佳浓度的确定 31 3.4 Cb链最佳浓度的确定 31-32 3.5 鼠抗IAA抗体最佳用量 32 3.6 IAA样品分析 32-33 3.7 拟南芥提取IAA样品分析 33 3.8 Ni链与Cb链杂交的最适温度 33-34 3.9 荧光传感器的特异性试验 34 4 小结 34-36 参考文献 36-42 致谢 42-43 个人简历 43
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中图分类: > 工业技术 > 自动化技术、计算机技术 > 自动化技术及设备 > 自动化元件、部件 > 发送器(变换器)、传感器 > 生物传感器、医学传感器
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