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量子点选择性荧光探针在生化检测中的应用研究

作　者: 周晓盼
导　师: 陶冠红
学　校: 苏州大学
专　业: 分析化学
关键词: 量子点 L-半胱氨酸 CD40分子荧光探针
分类号: Q503
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

本文利用量子点优良的光谱特征和光化学稳定性,通过对其进行表面功能化修饰,获得具有选择性测定生化物质的荧光探针,并将其应用于人血清中L-半胱氨酸、CD-40分子等的检测。本论文主要包括三个方面的内容:1、阐述课题的研究意义,介绍了量子点的发展、性质、特点、合成与修饰以及量子点在生物、医学和环境分析中的应用。2、采用有机相法合成了尺寸均匀单一的CdSe/CdS量子点,并通过巯基乙酸将有机相合成的量子点转移至水相。在CdSe/CdS表面包覆壳聚糖并与Ag离子形成CdSe/CdS-Ag(I)荧光探针,此时CdSe/CdS的荧光发生淬灭,在检测L-半胱氨酸时,L-半胱氨酸中的巯基与壳聚糖竞争Ag离子,导致荧光强度发生恢复,荧光强度的恢复程度与L-半胱氨酸的浓度呈良好的线性关系(R2 = 0.994),进而建立了一种简单、快速、灵敏地测定L-半胱氨酸的方法。方法具有较宽的线性范围以及较低的检出限(0.017μmol/L)。实验测定了正常人血清中的L-半胱氨酸含量,结果令人满意。3、在CdSe/CdS量子点表面标记CD40L,与细胞表面CD40分子进行免疫反应,量子点形成凝聚体,研究了在免疫反应中量子点光学性质的改变,并尝试建立量子点标记的免疫凝集分析方法。细胞浓度在20×10~4~100×10~4范围内与荧光强度变化呈良好的线性关系,线性相关系数r=0.993。但检测正常人的血清样品时,可能由于量子点的非特异性吸附,灵敏度达不到检测血清中的CD40分子的要求。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
第一章绪论  9-24
  1.1 引言  9
  1.2 量子点的概述  9-13
    1.2.1 量子点的性质特点  9-11
    1.2.2 量子点的发光原理  11
    1.2.3 量子点的合成修饰  11-13
  1.3 量子点的应用  13-18
    1.3.1 量子点在生物学中的应用  13-15
    1.3.2 量子点在活体动物及病理学中的应用  15-17
    1.3.3 量子点在环境分析中的应用  17-18
  1.4 L-半胱氨酸的研究  18-19
  1.5 CD40 分子的研究  19
  1.6 本论文的研究目的和内容  19-21
  参考文献  21-24
第二章 CdSe/CdS-Ag(I)荧光探针检测L-半胱氨酸  24-38
  2.1 引言  24-25
  2.2 实验部分  25-26
    2.2.1 实验试剂  25
    2.2.2 实验仪器  25
    2.2.3 壳聚糖包覆的CdSe/CdS 量子点的合成与修饰  25
    2.2.4 样品分析  25-26
    2.2.5 光学检测  26
  2.3 结果与讨论  26-35
    2.3.1 壳聚糖包覆的CdSe/CdS 量子点的光学特征  26-28
    2.3.2 反应体系的pH 值选择  28-29
    2.3.3 反应时间的选择  29-30
    2.3.4 Ag 离子浓度对chitosan-QDs 荧光淬灭程度的影响  30-31
    2.3.5 检测L-半胱氨酸的机理  31-32
    2.3.6 共存物质的影响  32-33
    2.3.7 系统性能研究  33-35
    2.3.8 实际样品分析  35
  2.4 小结  35-36
  参考文献  36-38
第三章 QDs-CD40L 荧光探针检测细胞表面CD40 分子  38-50
  3.1 引言  38-39
  3.2 实验部分  39
    3.2.1 实验仪器  39
    3.2.2 实验试剂  39
    3.2.3 QDs-CD40L 荧光探针的制备及纯化  39
    3.2.4 光学检测  39
  3.3 结果与讨论  39-47
    3.3.1 QDs-CD40L 荧光探针的表征  39-41
    3.3.2 QDs 与CD40L 浓度比的优化  41
    3.3.3 NHS 浓度对QDs-CD40L 荧光强度变化的影响  41-42
    3.3.4 EDC 浓度对QDs-CD40L 荧光强度变化的影响  42-43
    3.3.5 巯基乙酸的量对QDs-CD40L 荧光强度变化的影响  43
    3.3.6 离子强度对QDs-CD40L 荧光强度变化的影响  43-44
    3.3.7 pH 值对QDs-CD40L 荧光强度变化的影响  44-45
    3.3.8 温度对QDs-CD40L 荧光强度变化的影响  45
    3.3.9 反应时间对QDs-CD40L 荧光强度变化的影响  45-46
    3.3.10 QDs-CD40L 荧光探针制备的反应机理研究  46-47
    3.3.11 标准曲线绘制  47
  3.4 小结  47-49
  参考文献  49-50
已发表的论文  50-51
致谢  51-52

量子点选择性荧光探针在生化检测中的应用研究

内容摘要

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