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牛黄参胶囊对人肝癌细胞HepG2细胞周期及凋亡的影响研究

作　者: 熊智波
导　师: 赵映前
学　校: 湖北中医药大学
专　业: 中医临床基础
关键词: 牛黄西洋参 HepGZ 细胞培养
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

1、目的牛黄参胶囊是依“益气解毒”之基本治疗原则,由体外培育牛黄和西洋参按一定比例配方而成。运用血清药理学方法,研究牛黄参胶囊含药血清对人肝癌细胞HepG2的细胞周期及凋亡状况的影响,并探讨其作用机制。2、方法将牛黄参胶囊原生药按比例制成水煎剂,按一定剂量给大鼠灌胃(将大鼠分成含药血清组和空白血清组)。应用血清药理学方法,将两组血清分别稀释成不同浓度(10%、20%、50%),并用其培养人肝癌细胞HepG2,然后使用生长曲线测定法、荧光染色荧光显微镜观察、双染色法流式细胞仪检测,比较不同浓度牛黄参胶囊含药血清对人肝癌细胞细胞周期及凋亡状况的影响。3、结果3.1.牛黄参胶囊含药血清对人肝癌细胞HepG2生长的影响从生长曲线测定法检测细胞生长的实验结果来看,发现培养72h后,人肝癌细胞HepG2细胞存活率：卡铂组下降至0,20%含药血清组下降至0.05%,50%含药血清组下降至33.33%；培养72h后,空白血清组及空白对照组细胞存活率均下降不明显。3.2.牛黄参胶囊含药血清对人肝癌细胞HepG2细胞周期的影响从实验一和实验三综合来看,不同浓度的含药血清均能够作用于人肝癌细胞HepG2,对细胞周期的不同环节有持续性作用,与卡铂的作用机制有所不同,其研究还需进一步深入探讨。3.3.牛黄参胶囊含药血清对人肝癌细胞HepG2凋亡的影响从荧光显微镜的观察结果来看,发现含药血清组及卡铂组均能够使荧光强度增强,细胞萎缩、核固缩、形成凋亡小体,促进人肝癌细胞HepG2的凋亡。从流式细胞仪检测结果来看,发现不同浓度的含药血清能促进人肝癌细胞的凋亡,与空白对照组比较有显著性差异,与空白血清组比较有显著性差异。4、结论4.1.牛黄参胶囊含药血清能抑制人肝癌细胞HepG2的生长。4.2.牛黄参胶囊含药血清能阻断人肝癌细胞HepG2的细胞周期。4.3.牛黄参胶囊含药血清能促进人肝癌细胞HepG2的凋亡。4.4.牛黄参胶囊含药血清抑制人肝癌细胞HepG2的生长、促进人肝癌细胞HepG2凋亡的作用与血清浓度和培养时间相关。其中以20%含药血清组的效果最为明显。

全文目录

中文摘要  5-7
英文摘要  7-10
英文缩略词表  10-11
前言  11-13
一、理论研究  13-21
  1. 中医对原发性肝癌病因病机及治疗的认识  13-15
    1.1 中医对原发性肝癌病因病机的认识  13-14
    1.2 中医对原发性肝癌治疗的认识  14-15
  2. 原发性肝癌现代研究  15-19
    2.1 原发性肝癌发病机制  15-17
    2.2 细胞凋亡与原发性肝癌的关系  17-19
  3. 牛黄参胶囊方解  19-21
二、实验研究  21-31
  1、含药血清制备与细胞培养  21-22
    1.1. 含药血清的制备  21-22
    1.2. 细胞与细胞培养  22
  2、检测细胞生长及凋亡实验  22-31
    实验一:生长曲线测定法检测细胞生长  22-25
      1. 实验材料  23
      2. 实验方法  23
      3. 实验结果  23-25
    实验二:荧光染色细胞形态学观察  25-27
      1. 实验材料  26
      2. 实验方法  26
      3. 实验结果  26-27
    实验三:流式细胞术检测细胞周期及凋亡  27-31
      1. 实验材料  28
      2. 实验方法  28
      3. 实验结果  28-31
三、讨论  31-33
四、参考文献  33-35
五、综述  35-43
  参考文献  41-43
致谢  43

牛黄参胶囊对人肝癌细胞HepG2细胞周期及凋亡的影响研究

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