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EGb761对NMBR激动剂诱导分娩期小鼠子宫平滑肌细胞内NF-κB活性及IL-6表达的影响

作　者: 谢志平
导　师: 张卫社
学　校: 中南大学
专　业: 妇产科学
关键词: EGb761 NMBR激动剂 分娩期子宫平滑肌细胞 IL-6 NF-κB
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：探讨银杏叶提取物(Ginkgo biloba Extract, EGb761)对神经调节素B受体(Neuromedin B receptor,NMBR)激动剂诱导的分娩期小鼠子宫平滑肌细胞内核因子kappaB (Nuclear factor kappa B, NF-κB)活性及白介素6(Interleukin-6, IL-6)表达水平的影响。方法：原代培养小鼠子宫平滑肌细胞,用免疫组化鉴定细胞及检测细胞内NMBR表达。结合siRNA、磷酸化ELISA、Realtime PCR及ELISA等实验技术检测细胞内NF-κB活性和IL-6表达。结果：1.EGb761有效实验浓度筛选：(1)EGb761对平滑肌细胞内NF-κB活性的影响：高浓度组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);低浓度组、中浓度组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)EGb761对NMBR激动剂诱导的平滑肌细胞内NF-κB活性的影响：高浓度组显著低于低浓度组、NMB组及对照组(P<0.05)；中浓度与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)；低浓度组与NMB组差异无统计学意义(P>0.05),因此选择高浓度作为以下实验作用浓度。2.siRNA干预前后EGb761对分娩子宫平滑肌细胞中NF-κB活性及IL-6表达水平的影响：(1) NMBRsiRNA干预前后平滑肌细胞内NF-κB活性、IL-6表达水平的影响：干预前EGb761+NMB组与对照组、NMB组比较差异有统计学意义(p<0.05),与EGb761组比较差异无统计学意义(p>0.05)；十预后NMBRsiRNA +EGb761+NMB组与EGb761+NMB组及三对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),与NMBRsiRNA+NMB组比较差异无统计学意义(p>0.05)。(2)NF-KBsiRNA干预前后对平滑肌细胞中IL-6表达水平的影响：其变化规律与NMBRsiRNA干预前后对IL-6的影响一致。3.NMBRsiRNA干预前后NF-κB活性与IL-6表达的相关性分析：干预前及干预后两者变化均呈明显的正相关(干预前r=0.894,P<0.01；干预后r=0.892,P<0.01)。4.分级阻断NMBR和NF-κB对IL-6表达影响的比较：两种干预对IL-6表达水平的影响差异无统计学意义(基因水平p>0.20,蛋白水平P>0.05)。结论：EGb761可抑制NMBR激动剂诱导的分娩期小鼠子宫平滑肌细胞内NF-κB活性及IL-6表达的上调作用,其作用机制可能与其影响NMBR分子间的作用有关。

全文目录


中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-10
缩略语表  10-11
第一章 前言  11-13
第二章 材料与方法  13-28
  1. 实验试剂及仪器  13-18
  2. 实验方法及操作  18-28
第三章 结果  28-42
  3.1. 分娩期小鼠子宫平滑肌细胞及细胞内NMBR表达的鉴定  28-29
  3.2 子宫平滑肌组织中RNA质量及完整性检测  29-30
  3.3 不同浓度EGb761对平滑肌细胞NF-κB活性的影响  30-31
  3.4. EGb761对NMBR激动剂诱导的平滑肌细胞内NF-κB活性的影响  31-34
  3.5. EGb761对NMBR激动剂诱导的平滑肌细胞内IL-6表达的影响  34-40
  3.6 NMBRsiRNA沉默前后P65与IL-6mRNA表达水平的相关性分析  40-41
  3.7 两种不同的沉默技术对IL-6表达水平影响的比较  41-42
第四章 讨论  42-45
第五章 结论  45-46
参考文献  46-51
综述  51-68
  参考文献  62-68
致谢  68-69
攻读学位期间主要的研究成果  69

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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