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Daxx对HepG_2细胞内胆固醇含量的影响及机制探讨

作　者: 文娟
导　师: 庹勤慧
学　校: 南华大学
专　业: 药理学
关键词: Fas死亡结构域相关蛋白雄激素受体 SCAP SREBP 胆固醇
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的：观察Daxx（Fas death domain-associated protein）功能片段和Daxx全长的真核表达载体对细胞内胆固醇含量的影响并探讨其机制。为防治高脂血症以及由其引发的急性冠脉事件寻求新途径。方法：将带有Fas死亡结构域相关蛋白功能片段(pCDNA3.1（+）/Daxx/DM(626-740))和Daxx全长的真核表达载体(pCDNA3.1（+）/Daxx)分别稳定转染HepG2细胞。RT-PCR和Western Blot方法分别鉴定稳定细胞株是否建立成功。酶荧光法和HPLC（High Performance Liquid Chromatography）法观察细胞内胆固醇含量变化；激光共聚焦法检测Daxx与雄激素受体（androgen receptor,AR）的结合情况；RT-PCR和Western Blot方法检测细胞中SREBP裂解活化蛋白（SREBP cleavage-activating protein, SCAP）和胆固醇调节元件结合蛋白（sterolregulatory element binding proteins, SREBP）的mRNA和蛋白表达情况。结果：pCDNA3.1（+）/Daxx/DM(626-740)和pCDNA3.1（+）/Daxx稳定转染HepG2细胞后，激光共聚焦结果显示Daxx与AR在胞浆胞核中的表达和共定位均增强；酶荧光法和HPLC法观察到细胞内胆固醇含量降低；RT-PCR和WesternBlot法检测SCAP和SREBP的mRNA和蛋白均下降。结论：Daxx通过与AR结合，降低SCAP表达，从而减少SREBPs的活化，进而降低肝细胞内胆固醇的含量。

全文目录

主要英文缩略语索引  4-5
摘要  5-6
ABSTRACT  6-7
前言  7-9
实验材料  9-12
实验方法  12-19
实验结果  19-35
讨论  35-39
结论  39-40
参考文献  40-44
综述  44-54
  参考文献  52-54
附录  54-55
致谢  55-56
致谢  56

Daxx对HepG_2细胞内胆固醇含量的影响及机制探讨

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