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Dopamine抑制人喉癌Hep-2细胞增殖作用的实验研究

作 者: 庄申法
导 师: 许为青
学 校: 安徽医科大学
专 业: 耳鼻咽喉科学
关键词: 喉癌 血管内皮生长因子 多巴胺 受体
分类号: R739.65
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 22次
引 用: 0次
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内容摘要


目的研究儿茶酚胺类神经递质多巴胺(Dopamine)对人喉癌Hep-2细胞的增殖抑制作用并探讨其可能的作用机制。方法将Hep-2细胞接种于含10%小牛血清、100U/mL双抗(青霉素、链霉素)的DMEM培养基中,37℃、饱和湿度、5%CO2培养箱培养24h,三种不同药物浓度(0.05、0.5、5.0mmol/L)的Dopamine分别处理Hep-2细胞,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测Dopamine对Hep-2细胞增殖活性的影响;流式细胞术(FCM)分析Dopamine对Hep-2细胞周期分布的影响;Hoechst NO.33258荧光染色法荧光倒置显微镜观察Hep-2细胞凋亡形态;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肿瘤细胞培养上清液中血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)浓度。结果MTT法检测提示不同浓度的Dopamine作用于Hep-2细胞时,浓度在0.5~5mmol/L时,对Hep-2细胞的生长有明显的抑制作用(P<0.05),但当浓度低于0.5mmol/L时,则无明显抑制作用(P>0.05)。流式细胞术检测结果显示,随着Dopamine浓度的增加,处于G0~G1期细胞的比例逐渐升高(P<0.05),最高浓度时较空白对照组细胞比例升高了(18.28±6.66)%(P<0.05);S期细胞的比例逐渐降低,最高浓度时较空白对照组细胞比例降低了(17.00±1.23)%(P<0.05);而G2~M期细胞比例变化则无统计学意义(P>0.05)。ELISA法提示最高浓度(5mmol/L)时VEGF浓度较空白对照组下降了38.5%(P<0.05)。荧光倒置显微镜可观察到染色质边集、核碎裂等典型细胞凋亡形态。结论Dopamine可能通过抑制内生性VEGF的表达对Hep-2细胞的增殖有抑制作用,有望成为治疗喉癌的有效药物。

全文目录


英文缩略词简表  5-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-11
实验材料及准备  11-15
研究方法  15-18
结果  18-22
讨论  22-24
结论  24-25
参考文献  25-27
附录  27-28
致谢  28-29
综述  29-37
  参考文献  35-37

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 耳鼻咽喉肿瘤 > 喉肿瘤
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