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结直肠癌中CD44~+/ALDH1~+癌干细胞的临床病理学意义

作　者: 张彩兰
导　师: 刘斌
学　校: 兰州大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 肿瘤干细胞结直肠癌干细胞 CD44~+/ALDH1~+ SW480 组织芯片免疫组织化学染色免疫组织化学双重染色
分类号: R735.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的研究肿瘤干细胞标志物CD44和ALDH1在人结直肠癌组织中的表达、相互关系及临床病理学意义；探讨并进一步比较CD44+/ALDH1细胞在人结直肠癌、伴不典型增生的管状腺瘤、正常肠粘膜组织中的数量、位置及形态特征；进一步研究人结肠癌细胞系SW480中CD44+/ALDH1细胞的表达数量及形态特征,来论证CD44+/ALDH1细胞作为结直肠癌干细胞标志物的价值。方法取68例人结直肠癌组织、20例伴不典型增生的管状腺瘤、12例正常肠粘膜组织,利用组织芯片仪制作组织芯片,制成(6×7列)组织芯片共三块；采用HE染色、免疫组织化学染色、免疫组织化学双重染色技术,定位标记CD44、ALDH1单阳性及双阳性细胞；SW480结肠癌细胞系,细胞培养后制备细胞爬片,采用HE染色、免疫组织化学染色、免疫组织化学双重染色技术进一步观察双阳性细胞的数量、形态特征。结果1.CD44和ALDH1在正常肠粘膜组织中几乎不表达,在伴不典型增生的管状腺瘤中局灶阳性表达,而在结直肠癌组织中强阳性表达,在结直癌组织中的表达明显高于伴不典型增生的管状腺瘤和止常肠粘膜组织(P<0.05)；结直肠癌组织中,CD44的表达与癌组织的病理分级、浸润深度、淋巴结转移相关,统计学分析有显著差异(P<0.05)；ALDH1的表达与病理分级、浸润深度、淋巴结转移相关,统计学分析有显著差异(P<0.05)。2.结直肠癌组织中,CD44+/ALDH1细胞的表达明显高于伴不典型增生的管状腺瘤及正常肠粘膜组织,统计学分析有显著差异(P<0.05)；正常肠粘膜组织中无CD44+/ALDH1细胞,伴不典型增生的管状腺瘤中CD44+/ALDH1细胞数量极少,在结直肠癌组织中,双阳性细胞数量随着癌分化程度的降低及浸润深度的增加,表达率增加,统计学分析有显著差异(P<0.05)；CD44+/ALDH1(?)细胞主要分布在腺管的基底侧及腺管的共壁侧,呈散在或灶状分布,胞浆稀少或呈空泡状,胞核均质或深染。3.人结肠癌细胞系SW480中,CD44+细胞为12.34%,ALDH1+细胞为10.86%,CD44+/ALDH1细胞为7.68%,与实体瘤中的表达数量相似；双阳性细胞形态主要为两类：一类为小圆形细胞,胞浆较少,核比较深染或呈均匀；一类为梭形细胞,胞核不规则,胞浆稀少或呈空泡状。结论1.CD44、ALDH1的表达程度与结直肠癌组织的分化高低、浸润深度、淋巴结转移相关,可考虑作为结直肠癌干细胞有价值的标志物。2CD44+/ALDH1+细胞的表达数量与结直肠癌的浸润深度、Dukes分期、淋巴结转移密切相关,可为结直肠癌的病理分级、临床治疗提供依据,考虑表型为CD44+/ALDH1+细胞可能为结直肠癌干细胞。3.人结肠癌细胞系SW480中,CD44+/ALDH1+细胞的形态特征、数量等与实体瘤中的标记特征相似,进一步验证CD44+/ALDH1+细胞可考虑作为结直肠癌干细胞标志物。

全文目录

中文摘要  3-5
Abstract  5-7
缩略词  7-10
引言  10-12
第一部分 CD44、ALDH1在人结直肠癌中的表达及临床病理学意义  12-22
  1.1 材料与试剂  12-14
    1.1.1 病理标本的选择  12
    1.1.2 实验试剂及试剂盒  12-13
    1.1.3 实验仪器  13-14
  1.2 实验方法  14-15
    1.2.1 制作组织芯片  14
    1.2.2 组织芯片切片的制作  14
    1.2.3 HE染色及免疫组织化学染色  14-15
  1.3 结果判定  15
  1.4 统计学处理  15
  1.5 结果  15-17
  1.6 讨论  17-20
  1.7 组织学附图  20-22
第二部分 CD44+/ALDH1+细胞在结直肠癌中形态学特征及临床病理学意义  22-31
  2.1 材料与试剂  22-23
    2.1.1 材料病例选择同第一部分  22
    2.1.2 实验试剂  22-23
  2.2 实验方法  23-24
  2.3 结果判定  24
  2.4 统计学处理  24
  2.5 结果  24-26
  2.6 讨论  26-28
  2.7 附图  28-31
第三部分人结肠癌细胞系SW480中CD44+/ALDH1+细胞的临床病理学意义  31-40
  3.1 材料与试剂  31-32
    3.1.1 细胞系人结直肠癌细胞系SW480购自ATCC细胞库  31
    3.1.2 试剂  31-32
    3.1.3 仪器  32
  3.2 实验方法  32-35
    3.2.1 细胞培养  32-35
  3.3 结果判定  35
  3.4 统计学处理  35
  3.5 结果  35-36
  3.6 讨论  36-38
  3.7 细胞学附图  38-40
第四部分结论  40-41
参考文献  41-44
综述  44-52
  参考文献  49-52
在学期间的研究成果  52-53
致谢  53

结直肠癌中CD44~+/ALDH1~+癌干细胞的临床病理学意义

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