学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

非小细胞肺癌患者DAPK基因甲基化研究与去甲基化对肺癌细胞生物学行为的影响

作　者: 宋超
导　师: 薛绍礼
学　校: 安徽医科大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 非小细胞肺癌 死亡相关蛋白激酶 甲基化 人腺肺癌A549细胞 5-氮杂-2′-脱氧胞苷
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 6次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的探讨在非小细胞肺癌（NSCLC）患者的血浆中死亡相关蛋白激酶（DAPK）基因启动子区异常甲基化检测的临床意义，以及去甲基化药物5-Aza-CdR对DAPK基因甲基化产生的影响。方法在第一部分实验中，我们用巢式甲基化特异性聚合酶链反应（nMSP）检测了112例NSCLC患者肺癌组织、癌旁组织、外周血血浆和112例正常对照组血浆样品中DAPK基因的甲基化情况，并比较各组的检测结果。在第二部分实验中，我们用不同浓度及作用时间的5-Aza-CdR处理了体外培养的A549细胞，MTT法检测5-Aza-CdR对细胞增殖的抑制率，Cell scratch test法观察5-Aza-CdR对A549细胞迁移能力的影响，MSP及逆转录PCR（RT-PCR）检测用药前后A549细胞中DPAK基因甲基化状态及其mRNA表达情况的变化。结果癌组织DAPK基因甲基化率为59.8%，高于癌旁组织的8.0%（P＜0.001），其中鳞癌、腺癌和腺鳞癌癌组织和癌旁组织间的甲基化检出率比较均有显著性差异（P＜0.001）；患者血浆中DAPK基因甲基化检测率为21.4%，对照组血浆未检测到DAPK基因甲基化（P＜0.001）；血浆中DAPK基因甲基化检出率与NSCLC临床分类、临床分期和病理类型无明显相关性。在1×10-5、1×10-6、1×10-7、1×10-8mol/L的5-Aza-CdR处理人腺肺癌A549细胞24、48、72、96、120小时后，细胞增殖均受到不同程度的抑制，有时间和剂量的依赖性；其中1×10-5、1×10-6mol/L浓度组的5-Aza-CdR处理72小时后的A549细胞相比正常对照组A549细胞迁移能力有明显下降；在5-Aza-CdR处理前未检测到A549细胞中DAPK基因的mRNA表达，经过不同浓度5-Aza-CdR处理72小时后，DAPK基因在A549细胞中甲基化状态呈现出了逆转，同时mRNA重新获得表达。结论用nMSP法检测血浆样本中DAPK基因甲基化状态可为临床上非小细胞肺癌的筛查和诊断提供有价值的信息。去甲基化药物5-Aza-CdR对人腺肺癌A549细胞的增殖具有抑制作用，同时可以明显降低A549细胞的细胞迁移能力，并显著改善DAPK基因的甲基化状态与mRNA表达情况。

全文目录


摘要  8-10
Abstract  10-12
引言  12-13
第一部分 非小细胞肺癌患者血浆 DAPK 基因甲基化检测及其临床意义  13-29
  摘要  13-14
  Abstract  14-15
  引言  15
  材料和方法  15-21
  结果  21-23
  讨论  23-26
  结论  26-27
  参考文献  27-29
第二部分 去甲基化药物 5-Aza-CdR 对人腺肺癌 A549 细胞生物学行为及 DAPK 基因转录的影响  29-50
  摘要  29-30
  Abstract  30-32
  引言  32
  材料和方法  32-39
  结果  39-45
  讨论  45-47
  结论  47-48
  参考文献  48-50
对课题的进一步设想  50-51
简历  51-52
致谢  52-53
综述 DAPK 基因甲基化在非小细胞肺癌中的研究进展  53-73
  摘要  53-54
  DNA 甲基化  54-57
  DAPK 基因的结构、功能及相关研究  57-60
  DAPK 基因甲基化与 NSCLC 的关系  60-66
  结语及展望  66-67
  参考文献  67-73

相似论文

  1. 钯催化的烯烃双官能团化和吲哚三氟甲基化反应研究,O643.32
  2. 茶叶中有效生化成分高效液相色谱检测法的建立及其在凤凰乌龙茶检测中的应用,TS272.7
  3. 豆梨组织培养过程中玻璃化形成机制及其恢复技术研究,S661.2
  4. 5-Aza-dC对肺癌SPC-A-1细胞p16、MGMT基因甲基化及其表达的影响,R734.2
  5. 肺癌患者癌组织和血浆p16基因甲基化的检测及去甲基化肺癌细胞生物学行为和p16基因转录的研究,R734.2
  6. RNA干扰抑制ERCC1对非小细胞肺癌化疗敏感性的影响（体外实验）,R734.2
  7. 非小细胞肺癌CVATS肺叶切除133例分析,R734.2
  8. 培美曲塞治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察,R734.2
  9. 非小细胞肺癌术后辅助化疗联合恩度靶向治疗的分子生物学研究,R734.2
  10. ERCC1/RRM1的表达与Ⅰ-ⅢA期非小细胞肺癌术后生存期及与铂类耐药的相关性,R734.2
  11. 氟尿嘧啶缓释剂联合放射治疗非小细胞肺癌的疗效分析,R734.2
  12. TS BRCA1在Ⅱ、Ⅲ期非小细胞肺癌中的表达及临床意义,R734.2
  13. 重组白眉蝮蛇去整合素Adinbitor对人非小细胞肺癌A549细胞的抑制作用,R285.5
  14. ERCC1和XPD基因SNPs与晚期NSCLC含铂类药物化疗敏感性的关系,R734.2
  15. 大鼠全脑照射后早期表观遗传学变化特征的研究,R818
  16. 5-azaC对菠菜生长发育及DNA甲基化的影响,S636.1
  17. 中国林蛙冬眠期体内甲基汞输入途径研究及DNA甲基化水平初探,X174
  18. Bmi-1和C-myc在非小细胞肺癌中的表达及其相关性探讨,R734.2
  19. 甲状腺癌血DNA甲基化谱的研究,R736.1
  20. 营养物拮抗环境污染物毒性作用的分子机制的探讨,X171.5
  21. 5-“（1E）-2-“4-甲氧基-3，5-双二甲基特丁基硅氧基”苯基”乙烯基-1，3-二甲氧基苯的千克级合成研究,TQ463

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 呼吸系肿瘤 > 肺肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com