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白血病患者中乙型肝炎病毒感染及隐匿性乙型肝炎病毒感染的分子流行病学调查

作　者: 孙丙虎
导　师: 李旭; 张振华
学　校: 安徽医科大学
专　业: 内科学
关键词: 肝炎病毒乙型隐匿性抗-HBc 基因变异
分类号: R733.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的:了解白血病患者中HBV感染及隐匿性HBV感染的检出率，并探讨其与研究对象年龄、性别、生化学检测结果以及乙型肝炎病毒标志物之间的关系，同时从S基因变异角度探讨白血病患者隐匿性HBV感染可能的分子机制。方法:①病例选择和标本收集：收集2010年9月～2011年11月在我院血液科住院的白血病患者257例，所有病例均经骨髓细胞学检查确诊为白血病，排除酒精性及自身免疫性肝病患者；另选同期我院骨科住院的骨折病人377例作为对照组。②HBV DNA提取：采用经典蛋白酶K消化-酚/氯仿法。③巢式PCR法检测HBV DNA：参考国内外文献及HBV参照序列，在HBV基因组S、C、X区分别设计一对巢式引物。巢式PCR扩增，当任两个区及以上同时阳性者定义为隐匿性HBV感染者。④雅培Architect I2000R电化学发光仪定量检测隐匿性HBV感染者的HBV血清学标志物，对隐匿性HBV感染者与非感染者进行性别、年龄、生化学检测结果以及HBV血清标志物等的比较。⑤扩增HBV DNA阳性者小S区测序：根据HBV参照序列，在S区设计引物，对隐匿性HBV感染者以及HBsAg阳性的白血病患者进行扩增测序，并进行基因型、HBsAg“α”决定簇突变分析，发现可能和隐匿性HBV感染有关的变异位点。结果:①257例在白血病患者中，HBsAg阳性率为10.9%（28/257），显著高于对照组的5.6%（P<0.01）；急性髓性白血病（AML）和慢性淋巴细胞性白血病（CLL）患者血清HBsAg阳性率分别为10.9%和33.3%，显著高于骨折人群（P<0.05）；白血病患者中HBsAg阳性者较HBsAg阴性者的ALT异常率明显增高，分别为35.7%vs19.3%（P=0.04），差异具有统计学意义。②在229例HBsAg阴性的白血病中，隐匿性感染者有27例，隐匿性HBV感染的检出率为11.8%（27/229）。实验组的年龄、性别分布、生化学检测结果等与对照组相比，差别无统计学意义。在隐匿性HBV感染组，抗-HBc阳性率为44.4%（12/27），明显高于对照组的23.8%（48/202），两组差异具有统计学意义（P=0.022）。③白血病患者中隐匿性HBV感染者共检测到2种基因型（HBV/B, HBV/C），其中HBV/C基因型占优势，22例隐匿性HBV感染者HBV基因型分别为HBV/C（18例），HBV/B（4例），其基因型与白血病合并慢性HBV感染者的基因型对比，有明显的差异性（P=0.029）。④白血病中，27例隐匿性HBV感染者中共22人有S区测序结果，其中1例隐匿性HBV感染者出现了插入突变，另4例提前形成终止密码，形成缩短的氨基酸序列，共有12例在MHR区存在变异，其中8例发生I/126T变异，4例N146S变异，两例发生联合突变，分别是Q129R、D144E、S155Y和I126T、S143T联合突变。结论:①白血病患者的HBsAg阳性率及隐匿性HBV感染的检出率均较高。②在白血病患者中，隐匿性HBV感染更多见于抗-HBc阳性的患者。③白血病患者中隐匿性HBV感染者与HBsAg阳性的白血病患者基因型有显著不同。④HBV S区基因变异尤其是HBsAg“α”决定簇存在氨基酸改变可能是隐匿性HBV感染的分子基础，但其意义尚有待明确。

全文目录

中英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-10
第一部分：白血病患者中乙型肝炎病毒感染的流行病学调查  10-20
  1 前言  10-11
  2 材料与方法  11-13
  3 结果  13-15
  4 讨论  15-17
  5 结论  17-18
  6 参考文献  18-20
第二部分：白血病患者中隐匿性乙型肝炎病毒感染的调查及其与 S 基因变异的关系  20-46
  1 前言  20-22
  2 材料与方法  22-31
  3 结果  31-37
  4 讨论  37-40
  5 结论  40-41
  6 参考文献  41-46
附录  46-47
致谢  47-48
综述  48-55
  参考文献  53-55

白血病患者中乙型肝炎病毒感染及隐匿性乙型肝炎病毒感染的分子流行病学调查

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