学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示
双酚A对儿童脂肪组织11β-HSD1的调控及其机制的探讨
作 者: 王晶
导 师: 李晓南
学 校: 南京医科大学
专 业: 儿科学
关键词: 11β-羟基类固醇脱氢酶1型 肥胖 脂肪组织 双酚A 儿童
分类号: R723.14
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 39次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
肥胖的发生与遗传和环境因素密切相关。生活环境的巨变是导致近年肥胖发生率急剧上升的重要原因。双酚A(BisphenolA,BPA)是一种环境内分泌干扰物,广泛存在于人类日常生活中,如婴儿奶嘴、奶瓶、玩具、食品包装盒、袋等的制造。儿童特殊的生活饮食习惯使得他们更容易暴露于这些环境污染物。美国疾病控制和预防中心调查发现约92.6%受调查者尿液中可检测到BPA,并且儿童体内的浓度高于成人。早期BPA暴露能够增加子代体重、加速脂肪细胞分化,增加脂质积聚,但导致肥胖发生的分子机制并不清楚。业已知,糖皮质激素(Glucocorticoid,GC)对脂肪细胞分化、脂质积聚、能量平衡有重要的调节作用,而11-羟基类固醇脱氢酶1型(11β-hydroxysteroiddehydrogenate type1,11β-HSD1)能够使无活性GC转化为有活性GC,是GC在组织局部发挥功能的决定性因素。11β-HSD1的过表达与中心性肥胖和胰岛素抵抗密切相关,类固醇激素、脂源性细胞因子、炎症因子等肥胖相关因子通过上调11β-HSD1表达促进脂质积聚,而11β-HSD1特异性抑制剂,则明显减少脂肪组织GC水平,改善肥胖和胰岛素抵抗。因此,11β-HSD1是连接肥胖与胰岛素抵抗的重要枢纽。BPA作为一种重要的环境致肥因子,其是否通过11β-HSD1调控,进而促进脂质积聚?如果是,BPA作用的浓度效应如何,通过什么途径调控11β-HSD1?开展上述问题的研究,不仅有助于认识环境相关浓度BPA的暴露对儿童脂肪组织局部GC代谢的影响及可能的分子机制,也为今后预防和控制BPA在生活环境中的浓度,减少BPA早期暴露对后续健康的影响提供科学的依据。目的:1.观察不同浓度BPA对儿童腹部网膜(Omental,OM)脂肪组织和人脂肪细胞11β-HSD1表达和酶活性的调控作用;2.探讨低浓度BPA调节11β-HSD1,促进脂肪细胞分化和脂质积聚的机制和可能的受体途径。方法:1. BPA作用下儿童内脏脂肪组织11β-HSD1表达和酶活性选取腹部手术儿童(男童:年龄3.2~9.8岁,BMI SDS-0.80~0.91,n=7;女童:年龄3.0~13.2岁,BMI SDS-0.86~1.02,n=10)OM脂肪组织进行体外培养,分别与10nM、1μM、80μM的BPA孵化24小时,收集脂肪组织,用real-time PCR的方法检测11β-HSD1,过氧化物酶体增生物激活受体-γ(peroxisome proliferator activatedreceptor-γ,PPAR-γ)和脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,LPL)mRNA表达水平,放射免疫分析法检测脂肪组织11β-HSD1酶活性。2. BPA调节11β-HSD1促进脂质积聚的机制应用3-异丁甲基黄嘌呤(3-isobutyl-1-methyxanthine,MIX)、地塞米松、胰岛素、罗格列酮联合方案,诱导人内脏前脂肪细胞株(Human Preadipocyte-visceral,HPA-v)分化,观察不同阶段BPA处理对11β-HSD1,PPAR-γ和LPL mRNA表达的影响:(1)前脂肪细胞增殖阶段,加入BPA(10nM、1μM、80μM)作用24小时;(2)诱导分化第4天,加入BPA(10nM、1μM、80μM)持续作用至细胞成熟;(3)诱导分化第6天,加入低浓度BPA(10nM)或11β-HSD1抑制剂生胃酮(carbenoxolone,CBX)或两者联合作用至第18天;(4)前脂肪细胞增殖阶段,加入BPA(10nM)或糖皮质激素受体(Glucocorticoid Receptor,GR)抑制剂米非司酮(Mifepristone,RU486)或两者联合作用24小时。培养结束,收集细胞。用real-time PCR的方法检测脂肪细胞相关基因mRNA表达水平,用油红染色的方法观察成熟脂肪细胞脂质形态。结果:1.10nM、1μM、80μM BPA均显著上调儿童脂肪组织11β-HSD1mRNA表达(P<0.05),但仅10nM及80μM BPA增加脂肪组织11β-HSD1酶活性(P<0.05)。伴随11β-HSD1表达水平上升,PPAR-γ和LPL mRNA表达亦显著上调(P<0.05)。2. HPA-v脂肪细胞分化末期,油红O染色显示,对照组和BPA处理组(10nM,1μM,80μM)脂滴阳性率分别为45%、67%、49%和89%。10nM和80μM BPA处理组脂肪细胞11β-HSD1, PPAR-γ和LPL mRNA表达水平明显增加(P<0.05),而1μM BPA处理组其上调作用明显低于10nM和80μM(P<0.05)。3.10nM BPA联合11β-HSD1抑制剂CBX,可抑制BPA对脂肪细胞PPAR-γ和LPL的上调效应,并减少脂肪细胞脂滴的形成(P<0.05)。10nM BPA联合GR抑制剂RU486,能够阻断BPA对前脂肪细胞11β-HSD1的上调作用(P<0.05)。结论:低剂量的BPA上调儿童脂肪组织11β-HSD1的表达,放大组织局部GC活性,促进脂肪细胞分化和脂质积聚。GR是BPA调节11β-HSD1的重要途径。
|
全文目录
摘要 5-8 ABSTRACT 8-11 前言 11-15 研究对象与方法 15-30 一、 儿童脂肪组织的培养 15-18 二、 人前脂肪细胞的培养及诱导分化 18-23 三、主要仪器 23 四、11β-HSD1、PPAR-γ 和 LPL mRNA 表达水平的检测 23-27 五、脂肪组织 11β-HSD1 酶活性测定方法 27-29 六、 统计分析 29-30 结果 30-38 一、BPA 对儿童脂肪组织 11β-HSD1,PPAR-γ 及 LPL 表达的影响 30-32 二、BPA对人脂肪细胞11β-HSD1,PPAR-γ及LPLmRNA表达的影响 32-38 讨论 38-41 1. 低浓度BPA暴露增加脂肪组织的11β-HSD1表达和酶活性 38 2. BPA促进脂肪细胞分化和脂质积聚作用 38-39 3、BPA通过11β-HSD1介导促进脂肪细胞的分化和脂质生成 39-40 4、GR是BPA调节11β-HSD1的重要途径 40-41 小结 41-42 参考文献 42-49 缩略语表 49-51 综述 51-60 综述1 51-55 参考文献 54-55 综述2 55-60 参考文献 59-60 附录 60-61 致谢 61-62
|
相似论文
- 基于新医学模式的儿童医疗环境设计研究,TU246.1
- 声誉对学前儿童违规行为的影响,B844.1
- 食品接触材料中双酚A的快速测定方法研究,TS206.4
- 双酚AP型苯并噁嗪树脂的合成及性能研究,TQ320.1
- 农村留守儿童寄宿制学校空间环境研究,TU244.2
- 西安地区少年儿童网球运动开展现状及影响因素研究,G845
- 我国义务教育阶段就近入学问题研究,G522.3
- 农村留守儿童学业问题影响因素研究,G521
- 低俗文化对农村留守儿童养成教育的影响与防御机制研究,G632.4
- 核心力量训练对少年儿童竞技武术套路运动员平衡能力影响的实验研究,G852
- 芴基环氧树脂的固化机制及性能研究,TQ323.5
- 丹参酮ⅡA及烟酸对肥胖幼鼠心血管功能的影响,R285.5
- 青春期至成年早期双酚A暴露对小鼠行为的影响及其分子机制,R965
- 哈尔滨市少年儿童游泳运动员技术犯规状况及其影响因素研究,G861.1
- 青纺联集团“海尔兄弟”品牌营销策略研究,F274
- 合肥市0-6岁儿童血铅现况调查及低水平铅暴露影响因素分析,R179
- 微量元素对学龄前儿童身体发育影响研究,R179
- 合肥市手足口病流行状况及高危人群危险因素分析,R725.1
- 积极情绪对3-5岁幼儿认知灵活性的影响,B844.1
- 江西农村留守儿童体质健康状况及生活习惯的现状调查,G527
- 电针治疗单纯性肥胖症的临床观察,R246.1
中图分类: > 医药、卫生 > 儿科学 > 婴儿的营养障碍 > 消化营养障碍 > 肥胖症
© 2012 www.xueweilunwen.com
|