学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

抗氧化应激对人体内成熟失败卵母细胞体外成熟、受精和胚胎发育影响的研究

作　者: 刘迎春
导　师: 曹云霞
学　校: 安徽医科大学
专　业: 妇产科学
关键词: 低氧 体外受精-胚胎移植 胚胎发育 控制性超促排卵 体外成熟 卵胞浆内单精子显微注射 抗坏血酸
分类号: R714
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 57次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的探讨低氧环境（5%O2）对体内成熟卵体外受精、胚胎发育及临床结局的影响。方法前瞻性研究2010年35月于安徽医科大学第一附属医院生殖中心接受IVF-ET长方案治疗的265名不孕症患者并被随机分为两组，研究组（n=156）：患者取卵后受精及整个胚胎培养过程在三气培养箱（5%O2）中进行；对照组（n=109）：患者取卵后受精及整个胚胎培养过程在常规培养箱（20%O2）内进行，两组的胚胎移植定在卵母细胞加精后第二天或第三天。比较两组受精率、正常受精率、卵裂率、正常卵裂率、优质胚胎率、可用胚胎率、生化妊娠率、临床妊娠率和异位妊娠率。两组患者年龄、不孕年限、体重指数、基础性激素、获卵数目、成熟卵数目、移植胚胎日和移植胚胎数目均无显著统计学差异。结果研究组和对照组：受精率84.4%VS80.8%**、正常受精率72.0%VS68.7%*、卵裂率97.6%VS96.1%**、正常卵裂率97.7%VS98.0%、优质胚胎率43.3%VS35.1%**、可用胚胎率72.5%VS59.5%**、生化妊娠率50%VS39.4%、临床妊娠率44.9%VS35.8%、异位妊娠率8.6%VS12.8%。研究组受精率、正常受精率、卵裂率、优质胚胎率和可用胚胎率均显著高于对照组（**P<0.01,*P<0.05），两组正常卵裂率、生化妊娠率、临床妊娠率、异位妊娠率的差异无显著统计学意义。结论低氧环境（5%O2）能够在一定程度上提高胚胎的发育潜能，获得更多优质胚胎和可用胚胎，进而改善IVF结局。目的探讨低氧环境（5%O2）对控制性超促排卵周期成熟失败卵母细胞体外成熟、受精和胚胎发育的影响。方法共收集163个ICSI周期中成熟失败卵母细胞444枚，并随机分为两组：研究组237枚未成熟卵母细胞（GV期131枚，MI期106枚），行IVM；对照组207枚未成熟卵母细胞（GV期124枚，MI期83枚）。两组总GV期卵母细胞255枚，总MI期卵母细胞189枚。经体外培养成熟后，根据卵母细胞排出的第一极体形态和卵周隙大小适时行ICSI。ICSI后16-18h观察第二极体排出及原核形成情况，挑出正常受精卵继续培养至扩张囊胚，期间观察和记录IVM后卵母细胞的成熟、2PN、2PN卵裂、D2-4细胞、D3-8细胞、D3≥6细胞、D3-优质胚胎、囊胚、优质囊胚数目并计算相应的率。结果（1）两组中共255枚GV期卵母细胞IVM后共成熟183枚，成熟率71.8%（183/255），ICSI后受精率89.6%（164/183），双原核（2PN）率79.2%（145/183），2PN卵裂率94.5%（137/145）， D2-4细胞率39.4%（54/137），D3-8细胞率26.3%（36/137），D3≥6细胞率47.4%（65/137），D3-优质胚胎率29.2%（40/137），囊胚率：21.9%（30/137），优质囊胚率16.7%（5/30）。研究组D3-8细胞率、D3-优质胚胎率、囊胚率显著高于对照组（P<0.05），其中D3-优质胚胎率和囊胚率差异极显著（P<0.01），两组间成熟率、受精率、双原核（2PN）率、2PN卵裂率、D2-4细胞率、D3≥6细胞率、优质囊胚率差异无显著统计学意义（P>0.05）（2）两组中共189枚MI期卵母细胞IVM后共成熟175枚，成熟率92.6%（175/189），ICSI后受精率90.3%（158/175），双原核（2PN）率81.1%（142/175），2PN卵裂率91.5%（130/142）,D2-4细胞率50.0%（65/130），D3-8细胞率29.2%（38/130），D3≥6细胞率54.6%（71/130），D3-优质胚胎率25.4%（33/130），囊胚率17.7%（23/130），优质囊胚率34.8%（8/23）。研究组中，受精率、双原核（2PN）率显著高于对照组（P<0.05），两组间成熟率、2PN卵裂率、D2-4细胞率、D3-8细胞率、D3≥6细胞率、D3-优质胚胎率、囊胚率、优质囊胚率差异无显著统计学意义（P>0.05）。（3）不考虑未成熟卵的成熟阶段（MI+GV），研究组D3-8细胞率、D3-优质胚胎率、囊胚率显著高于对照组（P<0.05），其中D3-优质胚胎率差异极显著（P<0.01），两组间成熟率、受精率、2PN率、2PN卵裂率、D2-4细胞率、D3≥6细胞率、优质囊胚率差异无显著统计学意义（P>0.05）。结论低氧环境（5%O2）能够提高控制性超促排卵周期人体内成熟失败卵母细胞体外成熟后的受精和早期胚胎发育。目的探讨抗坏血酸（ascorbic acid，AA）对控制性超促排卵周期成熟失败卵母细胞体外成熟、受精和胚胎发育的影响。方法共收集326个IVF或ICSI周期成熟失败卵母细胞955枚，根据未成熟卵母细胞在不同氧环境（5%O2和20%O2）以及在IVM培养基中添加AA的浓度将培养条件随机分为5%O2氧环境下A5、B5、C5、D5四组和20%O2氧环境下A20、B20、C20、D20四组，A5和A20：AA0mg/l，B5和B20：AA2.5mg/l，C5和C20：AA5.0mg/l，D5和D20：AA10.0mg/l。不考虑氧环境，根据卵母细胞分期将GV期卵母细胞分为A1、B1、C1、D1四组，MI期卵母细胞分为A2、B2、C2、D2四组，A1和A2：AA0mg/l，B1和B2：AA2.5mg/l，C1和C2：AA5.0mg/l，D1和D2：AA10.0mg/l。其中AA0mg/l组作为对照组，另外三组作为研究组，分别与对照组相比较。根据卵母细胞排出的第一极体形态和卵周隙大小适时行ICSI。ICSI后16-18h观察第二极体排出及原核形成情况，挑出正常受精卵继续培养至扩张囊胚，期间观察和记录IVM后卵母细胞的成熟、2PN、2PN卵裂、D2-4细胞、D3-8细胞、D3≥6细胞、D3-优质胚胎、囊胚、优质囊胚数目并计算相应的率结果（1）A5组收集未成熟卵母细胞120枚，IVM后成熟101枚，成熟率84.2%（101/120），ICSI后受精率88.1%（89/101），双原核（2PN）率80.2%（81/101），2PN卵裂率93.8%（76/81），D2-4细胞率40.8%（31/76），D3-8细胞率31.6%（24/76），D3≥6细胞率53.9%（41/76），D3-优质胚胎率36.8%（28/76），囊胚率27.6%（21/76），优质囊胚率19.0%（4/21）；B5组收集未成熟卵母细胞132枚，IVM后成熟108枚，成熟率81.8%（108/132），ICSI后受精率90.7%（98/108），双原核（2PN）率76.9%（83/108），2PN卵裂率94.0%（78/83），D2-4细胞率41.0%（32/78）， D3-8细胞率25.6%（20/78），D3≥6细胞率59.0%（46/78），D3-优质胚胎率23.1%（18/78），囊胚率17.9%（14/78），优质囊胚率50.0%（7/14）；C5组收集未成熟卵母细胞119枚，IVM后成熟96枚，成熟率80.7%（96/119），ICSI后受精率95.8%（92/96），双原核（2PN）率89.6%（86/96），2PN卵裂率94.2%（81/86），D2-4细胞率51.8%（42/81），D3-8细胞率37.0%（30/81），D3≥6细胞率58.0%（47/81），D3-优质胚胎率32.1%（26/81），囊胚率22.2%（18/81），优质囊胚率38.9%（7/18）；D5组收集未成熟卵母细胞144枚，IVM后成熟114枚，成熟率79.2%（114/144），ICSI后受精率91.6%（104/114），双原核（2PN）率79.8%（91/114），2PN卵裂率87.9%（80/91）,，D2-4细胞率46.3%（37/80），D3-8细胞率43.8%（35/80），D3≥6细胞率60.0%（48/80），D3-优质胚胎率36.3%（29/80），囊胚率12.5%（10/80），优质囊胚率40.0%（4/10）。B5组、C5组、D5组未成熟卵母细胞成熟率、受精率、双原核（2PN）率、2PN卵裂率、D2-4细胞率、D3-8细胞率、D3≥6细胞率、D3-优质胚胎率、囊胚率、优质囊胚率分别与A5组相比较，均无显著统计学差异（P>0.05）。（2）A20组收集未成熟卵母细胞120枚，IVM后成熟92枚，成熟率76.7%（92/120），ICSI后受精率84.8%（78/92），双原核（2PN）率76.1%（70/92），2PN卵裂率90.0%（63/70），D2-4细胞率50.8%（32/63），D3-8细胞率25.4%（16/63），D3≥6细胞率54.0%（34/63），D3-优质胚胎率20.6%（13/63），囊胚率14.3%（9/63），优质囊胚率11.1%（1/9）；B20组收集未成熟卵母细胞106枚，IVM后成熟87枚，成熟率82.1%（87/106），ICSI后受精率87.4%（76/87），双原核（2PN）率78.2%（68/87），2PN卵裂率88.2%（60/68），D2-4细胞率46.7%（28/60），D3-8细胞率30.0%（18/60），D3≥6细胞率60.0%（36/60），D3-优质胚胎率33.3%（20/60），囊胚率20.0%（12/60），优质囊胚率33.3%（4/12）。C20组收集未成熟卵母细胞101枚，IVM后成熟82枚，成熟率81.2%（82/101），ICSI后受精率89.0%（73/82），双原核（2PN）率76.8%（63/82），2PN卵裂率92.1%（58/63），D2-4细胞率39.7%（23/58），D3-8细胞率25.9%（15/58），D3≥6细胞率41.4%（24/58），D3-优质胚胎率24.1%（14/58），囊胚率17.2%（10/58），优质囊胚率40.0%（4/10）（P>0.05）。D20组收集未成熟卵母细胞113枚，IVM后成熟92枚，成熟率81.4%（92/113），ICSI后受精率85.9%（79/92）,双原核（2PN）率70.7%（65/92），2PN卵裂率87.7%（57/65），D2-4细胞率43.9%（25/57），D3-8细胞率33.3%（19/57），D3≥6细胞率63.2%（36/57），D3-优质胚胎率24.6%（14/57），囊胚率15.8%（9/57），优质囊胚率44.4%（4/9）。B20组、C20组、D20组未成熟卵母细胞成熟率、受精率、双原核（2PN）率、2PN卵裂率、D2-4细胞率、D3-8细胞率、D3≥6细胞率、D3-优质胚胎率、囊胚率、优质囊胚率分别与A20组相比较，均无显著统计学差异（P>0.05）。（3）A1组收集GV期卵母细胞149枚，IVM后成熟108枚，成熟率72.5%（149/108），ICSI后受精率87.0%（94/108），双原核（2PN）率79.6%（86/108），2PN卵裂率91.9%（79/86），D2-4细胞率39.2%（31/79），D3-8细胞率26.6%（21/79），D3≥6细胞率50.6%（40/79），D3-优质胚胎率31.6%（25/79），囊胚率25.3%（20/79），优质囊胚率10.0%（2/20）；B1组收集GV期熟卵母细胞137枚，IVM后成熟102枚，成熟率74.5%（102/137），ICSI后受精率88.2%（90/102），双原核（2PN）率79.4%（81/102），2PN卵裂率92.6%（75/81）， D2-4细胞率48.0%（36/75），D3-8细胞率29.3%（22/75），D3≥6细胞率60.0%（45/75），D3-优质胚胎率32.0%（24/775），囊胚率26.7%（20/75），优质囊胚率50.0%（10/20）；C1组收集GV期卵母细胞118枚，IVM后成熟84枚，成熟率71.2%（84/118），ICSI后受精率91.3%（74/81），双原核（2PN）率81.5%（66/81），2PN卵裂率93.9%（62/66），D2-4细胞率43.5%（27/62），D3-8细胞率32.3%（20/62），D3≥6细胞率46.8%（29/62），D3-优质胚胎率30.6%（19/62），囊胚率19.4%（12/62），优质囊胚率33.3%（4/12）；D1组收集GV期卵母细胞155枚，IVM后成熟112枚，成熟率72.3%（112/155），ICSI后受精率90.2%（101/112），双原核（2PN）率78.6%（88/112），2PN卵裂率84.1%（74/88），D2-4细胞率52.7%（39/74），D3-8细胞率43.2%（32/74），D3≥6细胞率64.9%（48/74），D3-优质胚胎率32.4%（24/74），囊胚率14.9%（11/74），优质囊胚率36.4%（4/11）。B1组优质囊胚率与A1组相比较差异有显著统计学意义（P <0.01），而成熟率、受精率、双原核（2PN）率、2PN卵裂率、D2-4细胞率、D3-8细胞率、D3≥6细胞率、D3-优质胚胎率、囊胚率差异无显著统计学差异（P>0.05）。C1组、D1组未成熟卵母细胞成熟率、受精率、双原核（2PN）率、2PN卵裂率、D2-4细胞率、D3-8细胞率、D3≥6细胞率、D3-优质胚胎率、囊胚率、优质囊胚率分别与A1组相比较，均无显著统计学差异（P>0.05）。（4）A2组收集MI期卵母细胞91枚，IVM后成熟85枚，成熟率93.4%（85/91），ICSI后受精率85.9%（73/85），双原核（2PN）率76.5%（65/85），2PN卵裂率92.3%（60/65），D2-4细胞率53.3%（32/60），D3-8细胞率31.7%（19/60），D3≥6细胞率58.3%（35/60），D3-优质胚胎率26.7%（16/60），囊胚率16.7%（10/60），优质囊胚率30.0%（3/10）；B2组收集MI期熟卵母细胞101枚，IVM后成熟93枚，成熟率92.1%（93/101），ICSI后受精率90.3%（84/93），双原核（2PN）率75.3%（70/93），2PN卵裂率90.0%（63/70），D2-4细胞率38.1%（24/63），D3-8细胞率25.4%（16/63），D3≥6细胞率58.7%（37/63），D3-优质胚胎率22.2%（14/63），囊胚率9.5%（6/63），优质囊胚率16.7%（1/6）；C2组收集MI期卵母细胞102枚，IVM后成熟94枚，成熟率92.2%（94/102），ICSI后受精率93.8%（91/97），双原核（2PN）率85.6%（83/97），2PN卵裂率92.8%（77/83），D2-4细胞率49.4%（38/77），D3-8细胞率32.5%（25/77），D3≥6细胞率54.5%（42/77），D3-优质胚胎率27.3%（21/77），囊胚率20.8%（16/77），优质囊胚率43.8%（7/16）；D2组收集MI期卵母细胞102枚，IVM后成熟94枚，成熟率92.2%（94/102），ICSI后受精率87.2%（82/94），双原核（2PN）率72.3%（68/94），2PN卵裂率92.6%（63/68），D2-4细胞率36.5%（23/63），D3-8细胞率34.9%（22/63），D3≥6细胞率57.1%（36/63），D3-优质胚胎率30.2%（19/63），囊胚率12.7%（8/63），优质囊胚率50.0%（4/8）。B2组、C2组、D2组未成熟卵母细胞成熟率、受精率、双原核（2PN）率、2PN卵裂率、D2-4细胞率、D3-8细胞率、D3≥6细胞率、D3-优质胚胎率、囊胚率、优质囊胚率分别与A2组相比较，均无显著统计学差异（P>0.05）。结论（1）IVM培养基中添加AA不能明显改善控制性超促排卵周期成熟失败卵母细胞的体外成熟、受精和胚胎发育。（2）适宜浓度且更稳定的AA从而在IVM培养基中发挥抗氧化应激作用有待于进一步研究。

全文目录


中英文缩略词对照表  5-6
中文摘要  6-13
Abstract  13-19
第一部分 低氧环境（5%O2）对人体内成熟卵母细胞受精和胚胎发育影响的研究  19-27
  前言  19-20
  材料与方法  20-21
  结果  21-22
  讨论  22-24
  结论  24-25
  参考文献  25-27
第二部分 低氧环境（5%O2）对人体内成熟失败卵母细胞体外成熟、受精和胚胎发育影响的研究  27-43
  前言  27-29
  材料与方法  29-32
  结果  32-34
  讨论  34-37
  结论  37
  参考文献  37-43
第三部分 抗坏血酸对人体内成熟失败卵母细胞体外成熟、受精和胚胎发育影响的研究  43-57
  前言  43-44
  材料与方法  44-45
  结果  45-51
  讨论  51-53
  结论  53
  参考文献  53-57
附录  57-58
致谢  58-59
综述  59-68
  参考文献  63-68

相似论文

  1. 江蓠为基质的双齿围沙蚕亲体培育及个体早期发育研究,S968.9
  2. 喹喔啉-1，4-二氧化物衍生物的设计、合成及抗肿瘤活性研究,R914
  3. 脂肪酶催化猪油合成L-抗坏血酸脂肪酸酯,TS221
  4. 洋葱假单胞菌S31脂肪酶的分离提取及其在食品中应用,TS201.25
  5. 腌肉中挥发性N-亚硝胺的形成与控制研究,TS251.51
  6. 外源H2O2和AsA对大蒜试管苗玻璃化及内源活性氧代谢特征的影响,S633.4
  7. 鸭早期胚胎发育相关基因消减文库的构建与分析,S834
  8. 人IVF周期中短时受精方法及其临床结果的研究,R714.8
  9. 酸雨对油菜的胁迫机理及外源抗坏血酸的缓解效应研究,S565.4
  10. 丛枝菌根真菌（AMF）对黄瓜植株盐胁迫伤害的缓解及其生理效应研究,S642.2
  11. 不结球白菜抗坏血酸合成相关基因的克隆与表达及BcPMI2的功能分析,S634.3
  12. 卵丘细胞对猪卵母细胞成熟及其发育能力的影响,S828
  13. 慢性阻塞性肺疾病夜间血氧变化分析,R563.9
  14. 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征低氧血症评价指标研究,R766
  15. 预阳极化超薄碳糊膜电极的构建及应用研究,O657.1
  16. 外源抗坏血酸对镉胁迫下油菜生长及产量影响,S565.4
  17. 池沼公鱼雌雄差异及其早期生物学性状研究,S917.4
  18. 不同处理阶段焦化废水对玉米胚胎发育及其毒性研究,X173;S513
  19. L-半胱氨酸组装膜的电化学研究,O646
  20. 银杏内酯B抗胚胎着床及抗早期胚胎发育的实验研究,R285.5
  21. 口服妈富隆预处理在体外受精—胚胎移植治疗中的利弊研究,R714.8

中图分类: > 医药、卫生 > 妇产科学 > 产科学
© 2012 www.xueweilunwen.com