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调控Th17细胞和Treg细胞通路对子痫前期的影响

作　者: 盛佳佳
导　师: 刘雨生
学　校: 安徽医科大学
专　业: 妇产科学
关键词: Th17 Treg PE
分类号: R714.245
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的：研究Th17/Treg细胞在子痫前期（preeclampsia,PE）患者外周血及新生儿脐静脉血中的变化；以及胎盘附着处蜕膜组织Foxp3蛋白和IL-17A蛋白表达的变化，以探讨其在子痫前期免疫耐受失衡中的作用。方法：第一部分：选取子痫前期患者20例，同期正常晚期妊娠20例。分别采集子痫前期患者、正常晚期妊娠妇女外周血，提取外周血单个核细胞(peripheral bloodmononuclear cell， PBMC)，刺激培养后用流式分析法分析CD4~+IL-17A~+、CD4~+CD25~+FoxP3~+细胞变化,来探讨Th17/Treg细胞在子痫前期（PE）可能的作用。第二部分：相同的子痫前期患者20例为观察组,同期正常晚期妊娠20例为对照组。分别于分娩时采集子痫前期患者及正常晚期妊娠新生儿脐静脉血,采用细胞内染色的流式细胞术检测CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg及CD4~+IL-17A~+的表达。第三部分：子痫前期患者20例，正常晚期妊娠患者20例，剖宫产术中胎盘娩出后立即刮取宫壁胎盘附着处底蜕膜组织约1.5克，经PBS冲洗，置于4％多聚甲醛液中固定24-48小时，常规石蜡包埋，连续切片进行免疫组织化学染色，检测蜕膜局部组织中IL-17A的表达和CD4~+CD25~+Treg的特异性转录因子Foxp3蛋白的表达。结果：1、PE患者外周血中Th17/Treg细胞的平衡子痫前期患者外周血中CD4~+CD25~+FoxP3~+/CD4~+比例(2.36士0.48%)与正常产妇相比，明显低于正常产妇(3.7士0.34%)（p<0.05）；而子痫前期患者外周血中CD4~+IL17A~+/CD4~+比例（3.83士0.28%）明显高于正常产妇（1.6士0.31%）（p<0.05）。2、PE患者新生儿脐血中Th17/Treg细胞的平衡子痫前期患者新生儿脐血中CD4~+CD25~+FoxP3~+/CD4~+比例(1.63士0.33%)与正常产妇相比，明显低于正常产妇(2.87士0.29%)（p<0.05）；而子痫前期患者新生儿脐血中CD4~+IL17A~+/CD4~+比例（4.36士0.32%）明显高于正常产妇（2.23士0.42%）（p<0.05）。3、免疫组织化学的方法来观察母胎界面中Foxp3~+以及IL-17A的表达发现PE患者局部蜕膜组织中IL-17A阳性表达，而在正常产妇组局部蜕膜组织相对较低甚至不表达，而Foxp3在PE患者组局部蜕膜组织相对较低甚至不表达，正常产妇中阳性表达；分析说明IL-17A可能参与了PE的发病。结论：生殖免疫学观点认为，正常胚胎不被母体排斥有赖于母胎界面的免疫耐受，一旦这种格局被打破可能导致URSA以及PE等多种疾病的发生。除了Th1/Th2之间的平衡，Th17/Treg细胞的平衡可能也在PE的发病中发挥了作用。正常产妇外周血以及新生儿脐血中Treg细胞数目增多,而Th17细胞处于较低水平，维持着一定平衡状态，向Treg方向偏倚，则有利于妊娠的维持，一旦平衡打破，Treg降低，而Th17升高，将可能会导致PE的发生。Treg在妊娠期参与抑制母体对胎儿同种异体移植物的免疫反应，Treg细胞数目增多有利于妊娠的维持，较高水平的Th17细胞对于妊娠维持是不利的，可能产生Th17/Treg平衡偏移，这一结果造成母胎免疫耐受失衡，导致子痫前期的发生。此外，PE患者母胎界面蜕膜组织中Foxp3+蛋白表达低于正常晚期妊娠妇女，IL-17A蛋白的表达高于正常晚期妊娠妇女，也表明蜕膜中CD4~+CD25~+调节性T细胞数量减少，免疫抑制功能减弱，母胎免疫耐受失衡，免疫排斥作用增强，导致子痫前期的发生。

全文目录

英文缩略词表  5-7
中文摘要  7-9
Abstract  9-12
前言  12-13
实验材料  13-15
实验方法与步骤  15-19
统计学处理  19
结果  19-26
讨论  26-35
结论  35
参考文献  35-40
致谢  40-41
附录  41-42
综述  42-50
  参考文献  47-50

调控Th17细胞和Treg细胞通路对子痫前期的影响

内容摘要

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