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桑叶水提物对1型糖尿病小鼠治疗作用的研究

作　者: 聂凯
导　师: 饶力群
学　校: 湖南农业大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 桑叶水提物 1型糖尿病小鼠 STZ 血糖值
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

糖尿病因其发病率高,并发症多以及难以根治成为现今医学界的一大难题。本文以链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠为研究对象,观察桑叶水提物对1型糖尿病小鼠的治疗情况,为今后桑叶降血糖药物的开发提供了理论依据。本论文获得以下主要研究结果：1.本研究中桑叶水提物与醇提物进行了高效液相(HPLC)对比,证明了桑叶水提物中几乎不含有现今已发现的桑叶降血.糖成分1-脱氧野尻霉素(DNJ)。2.对小鼠饮食、饮水及血糖的变化进行了40天的观察记录,发现1型糖尿病小鼠在灌胃桑叶水提物后血糖下降明显,桑叶水提物高、中、低3个剂量组小鼠与灌胃前相比平均血糖值分别下降了9.0mmol·L-1、7.8mmol·L-1和5.4mmol·L-1,与模型组比较有极显著效果(p<0.01),体重下降的趋势也明显得到遏制,但饮水和饮食量的变化不明显。3.对桑叶水提物灌胃治疗后的1型糖尿病小鼠进行了糖耐量、血脂指标、肝脏指标、肾脏指标、血清胰岛素水平等指标的检测,结果表明：①在糖耐量实验中桑叶水提物能显著降低血糖曲线下面积(AUC),与模型组小鼠相比桑叶水提物高、中、低剂量组小鼠分别减少了5.4mmol·h/L,4.3mmol·h/L和3.2mmol·h/L;②桑叶水提物还能显著降低糖尿病小鼠血液中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量,桑叶水提物组小鼠与模型组相比,平均值分别下降了0.8mmol·L-1、0.7mmol·L-1；③桑叶水提物组小鼠的碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、β2-微球蛋白(p2-MG)和尿微量白蛋白(ALB)相比模型组,平均值分别下降了46.5U·L-1、48.7U·L-1、72.1U·L-1、7.5U·L-1和5.6U·L-1,这证明桑叶水提物对糖尿病所造成的肾脏以及肝脏的损伤也有一定的修复作用；④桑叶水提物组小鼠胰岛素水平有明显的回升,其中桑叶水提物高剂量组最为明显,相比模型组和盐酸二甲双胍组小鼠分别上升了6.35mlU·L-1和4.7mIU·L-1,由此推测桑叶水提物对糖尿病小鼠胰岛细胞有修复作用。4.通过小鼠的胰岛、肝脏、肾脏的HE染色和细胞凋亡(TUNEL)切片的观察和分析,从病理切片中可以看出桑叶水提物组小鼠的胰岛细胞,肝脏和肾脏细胞因为糖尿病所引发的病变均有了不同程度的改善效果,而盐酸二甲双胍治疗组相比模型组小鼠并无明显改善。细胞凋亡率的分析表明桑叶水提物组小鼠的胰岛细胞、肾脏和肝脏细胞平均凋亡率分别为29.7%、28.2%和23.2%。而模型组小鼠分别为68.1%、51.2%、54.2%,盐酸二甲双胍组的小鼠分别为62.3%、49.4%、56.3%。实验结果表明桑叶水提物对小鼠胰岛的治疗作用和对肾脏以及肝脏的保健功效。5.通过对桑叶水提物进行全波长扫描和高效液相检测,推测桑叶水提物中的降血糖成分可能是某种含有共轭双键或是α,β-不饱和羰基结构的物质。

全文目录

摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
第一章文献综述  10-17
  1 糖尿病  10-11
    1.1 糖尿病病因及症状  10
    1.2 糖尿病现状  10-11
    1.3 糖尿病分类  11
  2 桑叶药理作用  11-13
    2.1 桑叶降血糖功效  12
    2.2 桑叶降血脂作用  12
    2.3 桑叶抗衰老功效  12-13
    2.4 桑叶抗癌作用  13
    2.5 桑叶抗病毒作用  13
    2.6 桑叶调节肠道功能  13
  3 研究现状  13-15
  4 立题依据和意义  15-17
第二章桑叶水提物对1型糖尿病小鼠血糖等生理指标的影响  17-25
  1 前言  17
  2 材料与方法  17-19
    2.1 实验动物  17
    2.2 药品和试剂  17
    2.3 主要仪器  17-18
    2.4 方法  18-19
      2.4.1 桑叶水提取物制备  18
      2.4.2 桑叶水提物和醇提取物中DNJ含量的HPLC检测  18
      2.4.3 1型糖尿病小鼠模型建立  18
      2.4.4 分组与给药  18-19
      2.4.5 小鼠饮食和饮水量观测  19
      2.4.6 小鼠体重的测量  19
      2.4.7 小鼠血糖的测定  19
      2.4.8 桑叶水提物对STZ致1型糖尿病小鼠口服糖耐量的检测  19
      2.4.9 统计学分析  19
  3 结果与分析  19-23
    3.1 桑叶水提物  19-20
    3.2 桑叶水提物和醇提取物中DNJ含量的分析  20
    3.3 1型糖尿病小鼠造模效果  20-21
    3.4 小鼠饮食和饮水量的变化  21-22
    3.5 小鼠体重的变化  22
    3.6 小鼠血糖的变化  22-23
    3.7 桑叶水提物对STZ致1型糖尿病小鼠口服糖耐量的影响  23
  4 讨论  23-25
第三章桑叶水提物对1型糖尿病小鼠生化指标的影响  25-35
  1 前言  25
  2 材料与方法  25-27
    2.1 实验动物  25
    2.2 药品和试剂  25-26
    2.3 主要仪器  26
    2.4 方法  26-27
      2.4.1 小鼠血清采集及生化指标检测方法  26
      2.4.2 小鼠血脂指标的检测  26
      2.4.3 小鼠肝脏指标的检测  26
      2.4.4 小鼠肾脏指标的检测  26
      2.4.5 小鼠其它生化指标的检测  26
      2.4.6 统计学分析  26-27
  3 结果与分析  27-29
    3.1 桑叶水提物对小鼠血脂的影响  27
    3.2 桑叶水提物对小鼠肝脏的影响  27-28
    3.3 桑叶水提物对小鼠肾脏的影响  28
    3.4 桑叶水提物对小鼠其它生化指标的影响  28-29
  4 讨论  29-35
第四章小鼠病理学分析及桑叶降血糖成分推断  35-48
  1 前言  35
  2 材料与方法  35-36
    2.1 实验动物  35
    2.2 药品和试剂  35
    2.3 主要仪器  35
    2.4 方法  35-36
      2.4.1 小鼠组织病理学检查  35
      2.4.2 桑叶水提物HPLC分析  35-36
  3 结果与分析  36-46
    3.1 小鼠胰岛HE染色切片观察  36-37
    3.2 小鼠肾脏HE染色切片观察  37-38
    3.3 小鼠肝脏HE染色切片观察  38-40
    3.4 小鼠胰岛细胞凋亡(TUNEL)切片观察  40-41
    3.5 小鼠肾脏细胞凋亡(TUNEL)切片观察  41-43
    3.6 小鼠肝脏细胞凋亡(TUNEL)切片观察  43-44
    3.7 桑叶水提物高效液相(HPLC)检测  44-46
  4 讨论  46-48
第五章结论与创新点  48-50
  1 结论  48
  2 创新点  48-50
参考文献  50-55
致谢  55-56
作者简介  56

桑叶水提物对1型糖尿病小鼠治疗作用的研究

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