学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

新疆一枝蒿有效成分提取分析及活性研究

作　者: 覃睿
导　师: 解成喜
学　校: 新疆大学
专　业: 化学
关键词: 新疆一枝蒿 黄酮 多糖 免疫活性 DC细胞 抗氧化活性 抑菌活性 挥发性成分 微量元素
分类号: R29
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 51次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


新疆一枝蒿（Artemisia rupestris L.）是维吾尔族常用的一味药材，本研究基于前人研究工作的积累，对有效成分及其活性展开研究，包括以下几个方面：1.采用超声辅助及微波辅助提取法对新疆一枝蒿总黄酮进行提取制备，超声辅助提取法的最优提取条件为：80%乙醇、料液比1：80、提取时间60min，在此条件下的提取率达到45.66mg/g；微波辅助提取法的最优提取条件为：微波时间7min、提取温度60℃、微波功率600W，此提取条件下的提取率可达49.18mg/g；采用SPE-HPLC法测定其中槲皮素的含量，为0.323mg/g。2.采用微波辅助提取法对新疆一枝蒿多糖进行提取制备，比较Sevag法与冻融法脱蛋白效果；最佳提取条件为料液比1：40、提取时间90s、微波功率500W，在此条件下多糖提取率为32.83mg/g；Sevag法蛋白脱除效果不及冻融法。3.比较新疆一枝蒿总黄酮提取物及多糖提取物抗氧化活性、抑制亚硝化反应的能力及抑菌活性；黄酮提取物在非脂质体系中的抗氧化活性及抗亚硝化性能强于多糖提取物，脂质体系抗氧化能力黄酮提取物的效果略弱于多糖提取物；二者对实验菌种均有一定的抑制作用，但程度不一。4.利用小鼠进行体内动物实验及体外鼠源DC细胞筛选平台对新疆一枝蒿黄酮提取物、多糖提取物的免疫活性进行检测；体内实验中新疆一枝蒿提取物对小鼠免疫具有不同作用，MTT法检测表明新疆一枝蒿黄酮提取物在一定浓度范围内，对小鼠脾脏细胞增殖有着高增低抑的趋势，流式检测表明两种途径对DC细胞增长及表面marker：CD86、CD80、CD40、MHCII的表达有上调作用，高剂量比低剂量上调更为明显；体外免疫研究通过建立快速筛选平台，即分离小鼠腿骨骨髓并诱导培养DC细胞的方式，对新疆一枝蒿黄酮及多糖提取物进行考察，发现二者对DC细胞的成熟均有明显作用，且有一定的量效关系，DC marker的表达与加入提取物的浓度正向相关，新疆一枝蒿提取物具有调节小鼠机体免疫功能的作用。5.采用水蒸气蒸馏法提取新疆一枝蒿花及全草中挥发性成分，利用GC-MS分析检测鉴定其组成，在花挥发油中鉴定出36种成分，全草挥发油中鉴定出73种成份。6.采用微波消解法对野生及人工种植新疆一枝蒿进行前处理，AAS分析检测并比较部分微量金属元素的含量，结果表明，新疆一枝蒿中含有人体必需的多种金属元素，二者在含量上表现差异不大。

全文目录


摘要  3-4
ABSTRACT  4-10
第一章 引言  10-22
  1 新疆一枝蒿简介  10-13
  2 新疆一枝蒿研究状况  13-15
    2.1 新疆一枝蒿化学成分研究  13-14
    2.2 药理药效研究  14-15
    2.3 其他研究  15
  3 天然产物中黄酮类化合物研究概况  15-18
    3.1 提取分离与鉴定方法  16
    3.2 黄酮类化合物生物活性研究  16-18
  4 天然产物中多糖类化合物研究概况  18-20
    4.1 提取分离与鉴定方法  18
    4.2 多糖类化合物生物活性研究  18-20
  5 本研究立体依据及意义  20-22
第二章 提取物的制备及药物活性研究  22-61
  第一节 新疆一枝蒿总黄酮提取工艺研究及含量测定  22-33
    1 仪器、材料与试剂  22-23
    2 制备过程  23-31
      2.1 实验方法  23
      2.2 新疆一枝蒿总黄酮提取及含量测定  23-25
        2.2.1 最大吸收波长的确定  23-24
        2.2.2 标准曲线的绘制  24
        2.2.3 含量测定  24-25
      2.3 超声辅助提取结果及分析  25-27
        2.3.1 单因素实验结果  25
        2.3.2 正交实验结果  25-26
        2.3.3 最佳工艺验证实验  26-27
      2.4 微波辅助提取结果及分析  27-29
        2.4.1 单因素实验结果  27
        2.4.2 正交实验结果  27-29
        2.4.3 最佳工艺验证实验  29
      2.5 SPE-HPLC 测定新疆一枝蒿黄酮提取物中槲皮素的含量  29-30
        2.5.1 色谱条件  29
        2.5.2 槲皮素对照品溶液的制备  29
        2.5.3 新疆一枝蒿总黄酮待测溶液的制备  29-30
      2.6 HPLC 结果及分析  30-31
        2.6.1 标准曲线的绘制  30
        2.6.2 样品测定  30-31
        2.6.3 精密度实验  31
        2.6.4 稳定性实验  31
        2.6.5 加标回收率实验  31
    3 结论  31-33
  第二节 新疆一枝蒿多糖提取工艺研究及含量测定  33-41
    1 材料、试剂与仪器  33
    2 制备过程  33-36
      2.1 实验方法  33-34
      2.2 所需溶液的制备  34-35
      2.3 标准曲线的绘制  35
        2.3.1 葡萄糖标准曲线的绘制  35
        2.3.2 蛋白质标准曲线的绘制  35
      2.4 含量测定  35-36
        2.4.1 多糖含量测定  35-36
        2.4.2 蛋白质含量的测定  36
    3 结果与分析  36-40
      3.1 微波辅助提取多糖  36-38
        3.1.1 单因素实验结果  36-37
        3.1.2 正交实验结果  37-38
        3.1.3 最佳工艺验证实验  38
      3.2 脱蛋白实验  38-40
        3.2.1 Sevag 法脱蛋白  38-39
        3.2.2 冻融法脱蛋白  39-40
        3.2.3 两种方法脱蛋白作用的比较  40
    4 结论  40-41
  第三节 新疆一枝蒿提取物抗氧化活性研究  41-49
    1 仪器、材料与试剂  42
    2 实验方法  42-45
      2.1 所需溶液的制备  42-43
      2.2 新疆一枝蒿提取物清除羟基自由基(·OH)的测定  43
      2.3 新疆一枝蒿提取物清除超氧阴离子自由基(·O_2)的测定  43-44
      2.4 新疆一枝蒿提取物对脂质体系的抗氧化能力测定  44-45
        2.4.1 油脂过氧化值的测定  44-45
        2.4.2 卵黄脂蛋白不饱和脂肪酸过氧体系抗氧化活性测试  45
    3 结果与分析  45-48
      3.1 新疆一枝蒿提取物清除羟基自由基(·OH)  45-46
      3.2 新疆一枝蒿提取物清除超氧阴离子自由基(·O_2)  46
      3.3 新疆一枝蒿提取物对脂质体系的抗氧化能力测定  46-48
        3.3.1 油脂过氧化值的测定  46-47
        3.3.2 卵黄脂蛋白不饱和脂肪酸过氧体系抗氧化活性测试  47-48
    4 结论  48-49
  第四节 新疆一枝蒿提取物抗亚硝化性能研究  49-54
    仪器、材料与试剂  50
    2 实验方法  50-52
      2.1 所需溶液的制备  50-51
      2.2 新疆一枝蒿提取物清除亚硝酸钠的测定  51
      2.3 新疆一枝蒿提取物对亚硝胺合成阻断率的测定  51-52
    3 结果与分析  52-54
      3.1 新疆一枝蒿黄酮提取物对亚硝酸钠的清除率  52
      3.2 新疆一枝蒿黄酮提取物对亚硝胺合成阻断率  52-53
      3.3 新疆一枝蒿多糖提取物对亚硝酸钠的清除率  53
      3.4 新疆一枝蒿多糖提取物对亚硝胺合成阻断率  53-54
    4 结论  54
  第五节 新疆一枝蒿提取物抑菌作用研究  54-61
    1 仪器、材料与试剂  55
    2 实验方法  55-57
      2.1 试剂及菌种的准备  55-57
        2.1.1 培养基及无菌滤纸片  55-56
        2.1.2 倒板  56
        2.1.3 菌悬液的制备及涂板  56
        2.1.4 供试滤纸片的制备  56
        2.1.5 对照溶液及提取物溶液的配制  56-57
      2.2 滤纸片法测试抑菌活性  57
      2.3 最低抑菌浓度（MIC）的测定  57
    3 结果与分析  57-60
      3.1 新疆一枝蒿提取物抑菌活性  57-59
        3.1.1 黄酮提取物抑菌活性  57-58
        3.1.2 多糖提取物抑菌活性  58-59
      3.2 两种提取物抑菌活性比较  59
      3.3 最低抑菌浓度（MIC）的测定  59-60
    4 结论  60-61
第三章 新疆一枝蒿免疫活性研究  61-79
  第一节 新疆一枝提取物体内免疫活性研究  62-70
    1 仪器、材料与试剂  62
    2 实验方法  62-65
      2.1 MTT 法预实验  62-63
      2.2 小鼠体内免疫  63-64
      2.3 流式细胞仪检测 DC marker  64-65
        2.3.1 实验分组  64
        2.3.2 实验过程  64-65
    3 结果与分析  65-69
      3.1 MTT 预实验结果  65
      3.2 新疆一枝蒿黄酮提取物对 DC 细胞表面抗原表达的影响  65-69
        3.2.1 口服途径 DC marker 表达分析  65-67
        3.2.2 滴鼻途径 DC marker 表达分析  67-69
    3 结论  69-70
  第二节 新疆一枝提取物体外免疫活性研究  70-79
    1 仪器、材料与试剂  70
    2 实验方法  70-72
      2.1 小鼠骨髓 DC 细胞的分离诱导培养  70-71
      2.2 小鼠骨髓 DC 细胞检测鉴定  71-72
    3 结果与分析  72-78
      3.1 小鼠骨髓 DC 细胞诱导的观察  72-73
      3.2 小鼠骨髓 DC 细胞的鉴定  73-74
        3.2.1 DC 细胞在主细胞群中的数量  73-74
        3.2.2 DC 细胞表面抗原 CD11c 表达量的测定  74
      3.3 新疆一枝蒿黄酮提取物对 DC 细胞表面抗原表达的影响  74-76
        3.3.1 DC 细胞表面抗原 CD86 表达量的测定  74-75
        3.3.2 DC 细胞表面抗原 CD40 表达量的测定  75-76
      3.4 新疆一枝蒿多糖提取物对 DC 细胞表面抗原表达的影响  76-78
        3.4.1 DC 细胞表面抗原 CD86 表达量的测定  76-77
        3.4.2 DC 细胞表面抗原 CD40 表达量的测定  77-78
    4 结论  78-79
第四章 新疆一枝蒿挥发性成分 GC-MS 分析  79-83
  1 仪器、材料与试剂  79
  2 实验方法  79-80
    2.1 挥发油的提取  79
    2.2 气相色谱-质谱测定  79-80
      2.2.1 色谱条件  79-80
      2.2.2 质谱条件  80
  3 结果与讨论  80-83
  4 结论  83
第五章 新疆一枝蒿微量元素测定  83-87
  1 材料、试剂与仪器  83-84
  2 实验方法  84-85
    2.1 仪器工作条件  84
      2.1.1 微波消解仪工作条件  84
      2.1.2 火焰原子化器工作条件  84
    2.2 样品微波消解处理  84-85
    2.3 建立标准曲线  85
  3 结果与讨论  85-86
    3.1 含量测定  85-86
    3.2 精密度及回收率测定  86
  4 结论  86-87
总结与展望  87-88
参考文献  88-92
硕士期间发表论文情况  92-93
致谢  93

相似论文

  1. 红肉脐橙和‘国庆四号’温州蜜柑中CHS和CHI基因的克隆与表达及其对类黄酮积累的调控机制,S666.4
  2. 金花茶多糖的分离纯化及化学结构的研究,S567.19
  3. 白骨壤果实中黄酮类化合物的提取、分离纯化及抗氧化活性研究,S793.9
  4. 三种羧酸系列金属配合物的合成及活性研究,O621.13
  5. 山野菜石参营养成分与品质分析,S647
  6. 侧柏叶化学成分提取及活性功能研究,R284
  7. 抑制植物病原菌的植物提取物筛选,S482.2
  8. 酢浆草提取物体外抗肿瘤和抗氧化研究,R285
  9. 磷石膏中微量组分对水泥熟料烧制及性能的影响,TQ177.3
  10. 杨梅落果花色苷的提取、纯化及其抑菌活性研究,TQ914.1
  11. 鸭源鸡杆菌抗体消长规律研究及抗脂多糖单抗杂交瘤细胞株的建立,S858.32
  12. 稳定分泌抗羊种布鲁菌脂多糖单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立,R392
  13. 人源β-防御素-6的原核表达及纯化,Q78
  14. 芝麻饼粕中木酚素的提取及抗氧化活性研究,TS229
  15. 几种抗生素对酸奶发酵过程的影响,TS252.54
  16. 脂肪酶催化猪油合成Vc脂肪酸酯及其抗氧化活性的研究,TS202.3
  17. 麦胚多糖提取、纯化及抗氧化活性研究,TS210.1
  18. 水稻黄单胞菌clp基因的克隆及功能研究,S435.111.4
  19. 施肥和密度对留兰香精油产量和品质的影响,S573.9
  20. 大豆异黄酮浸种对栽培大豆和滩涂野大豆亲本及其杂交后代幼苗盐害的缓解效应及其机理,S565.1
  21. 金针菇水溶性物质与不溶性残渣的制备及理化性质研究,S646.15

中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中国少数民族医学
© 2012 www.xueweilunwen.com