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艾燃烧生成物对CUMS抑郁模型大鼠血清NO、海马iNOSmRNA及其海马形态学的影响研究

作　者: 许镫尹
导　师: 李瑞
学　校: 北京中医药大学
专　业: 针灸推拿学
关键词: 艾烟吸入 CA1 海马 iNOSmRNA 抑郁症血清NO
分类号: R245.8
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

研究目的近年来越来越多有关于艾燃烧生成物的研究,其中许多研究表明艾烟具有多种成份可以消毒空气、杀灭细菌、抑制病毒的生长以及清除机体内的氧自由基等功能。有些研究表示机体内产生氧自由基与一氧化氮(NO)的浓度高低是造成抑郁症的主要原因,故本研究根据艾烟具有清除氧自由基的功能作用,旨在探讨艾烟吸入对抑郁症大鼠的血清NO、海马 iNOSmRNA以及海马形态结构的影响。研究材料与方法实验动物为成年雄性SD清洁级大鼠40只,体重180±20g,饲养环境温度为(25±2)℃,相对湿度35%左右,空气流通,12小时光照维持,昼夜循环。实验期间大鼠正常饮食进水,在实验开始前先适应性饲养一周。所有大鼠在经过适应性饲养后,随机选取大鼠8只,同笼饲养为,空白对照组(以下简称为空白组)。剩余32只大鼠接受孤养,并进行21天慢性不可预见性轻度刺激(CUMS)造模后,按体重随机分为四组,每组各8只。四组分别为：抑郁症模型组(以下简称为模型组)；艾烟吸入组(以下简称为艾烟组)；有烟灸百会组(以下简称为艾灸组)；无烟灸百会组(以下简称为无烟灸组)。艾烟吸入组是在密闭的空间内点燃艾条进行艾烟吸入20分钟；有烟灸百会组是将大鼠固定后处于密闭的空间内点燃艾条灸百会20分钟；无烟灸百会组是将大鼠固定后处于密闭的空间内点燃艾条使用风扇抽离艾烟灸百会20分钟。在制备抑郁症模型的前与后,以旷场实验与测量体重检验大鼠行为学的变化；在造模型成功后采用Elisa法检测大鼠血清NO含量；以上检测采用SPSS统计软件进行统计分析。采用免疫组化以及HE染色法在显微镜下观察海马切片,针对海马CA1区域分析形态结构变化。采用Real-Time PCR去检测大鼠海马iNOS mRNA含量。研究结果旷场试验结果统计结果显示,二组的总移动距离有差异,其组间差异为空白组与模型组有差异P<0.05,站立次数与最大单次移动距离无明显差异P>0.05。成模后的空白组与模型组体重均值有明显差异P<0.05；干预后体重有明显差异P<0.05。空白组与模型组、艾烟吸入、组有烟灸百会组、无烟灸百会组都有差异。大鼠的血清细胞因子NO含量结果显示,血清细胞因子NO的空白组与模型组、艾烟吸入组、有烟灸百会组、无烟灸百会组五组间均无明显差异。光学显微镜下观察大鼠海马CA1区域神经元染色的形态结构,艾烟吸入组相对于抑郁模型组,艾烟吸入组海马CA1区神经元细胞排列较整齐、细胞密集、细胞边缘结构比较清晰完整。有烟灸百会组相较于艾烟吸入组与无烟灸百会组的海马CA1区神经元细胞排列整齐、细胞紧密、细胞边缘结构清晰完整。艾烟吸入对于抑郁症大鼠血清iNOS以及海马iNOSmRNA的效果比较,结果显示与空白组及模型组相比,差异无统计学意义P>0.05。有烟灸百会组及无烟灸百会组有差异P<0.05。研究结论研究结果提示对于海马CA1区的神经元修复,有烟灸百会(有烟有穴)有其更突出的作用,而艾烟吸入又较无烟灸百会(单纯无烟灸穴)的效果明显,说明艾灸对抑郁大鼠的治疗作用可能是通过CA1形态学的改变来表现。而有烟灸百会组的结果相较于艾烟吸入以及无烟灸百会组对海马CA1区域神经元细胞凋亡与消失降低明显,提示有烟灸百会的治疗效果较优于艾烟吸入组以及无烟灸百会组。本研究的结果显示艾烟吸入(灸百会)对慢性应激抑郁大鼠海马CA1区域神经元细胞凋亡有减少,表示艾烟吸入具有修复海马神经元的损伤功能作用,在临床应用上有很重要的意义与价值。

全文目录

目录  3-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-11
第一部分文献综述  11-21
  综述一艾烟的研究进展  11-17
    1 艾烟的中医史料研究  11-12
      1.1 烟熏疗效记载  11
      1.2 艾叶烟熏治疗法记载  11-12
      1.3 艾灸治疗抑郁症的疗效记载  12
    2 艾烟成分的现代研究  12-13
      2.1 艾烟的化学成分  12-13
      2.2 艾烟的药理作用  13
    3 艾烟的现代临床应用研究  13-15
      3.1 空气消毒效果  13-14
      3.2 抗病毒作用  14
      3.3 抗菌作用  14-15
      3.4 艾烟的其他作用研究  15
      3.5 艾烟的安全性研究  15
    4 结语  15-17
  综述二海马与抑郁症关系的研究进展  17-21
    1 海马与慢性应激的关系  17-18
      1.1 海马的生理功能  17
      1.2 慢性应激的机制  17
      1.3 慢性应激对海马的损害影响  17-18
    2 海马与抑郁症的关系  18-20
      2.1 海马与抑郁症的生理病理联系  18
      2.2 抑郁症对海马形态结构的损伤  18
      2.3 海马CA1区细胞变化与抑郁症的关系  18-19
      2.4 海马NO、iNOS与抑郁症的关系  19-20
    3 结语  20-21
前言  21-22
第二部分实验研究  22-45
  实验内容  22-33
    实验一艾烟对抑郁模型大鼠行为学指标的影响  22-25
      1 实验目的  22
      2 实验材料  22-23
        2.1 实验动物与分组  22
        2.2 材料和仪器  22
        2.3 造模方法  22-23
      3. 实验方法  23-25
        3.1 干预方法  23
        3.2 检测方法  23-24
        3.3 统计方法  24-25
    实验二艾烟对抑郁症大鼠血清NO含量的影响  25-27
      1 实验目的  25
      2 实验材料  25
        2.1 实验动物与分组  25
        2.2 材料和仪器  25
        2.3 模型制备  25
      3. 实验方法  25-27
        3.1 干预方法  25
        3.2 取材及检测方法  25-26
        3.3 统计处理  26-27
    实验三艾烟对抑郁症大鼠海马CA1区神经元形态学的影响  27-30
      1 实验目的  27
      2 实验材料  27
        2.1 实验动物与分组  27
        2.2 材料和仪器  27
        2.3 模型制备  27
      3 实验方法  27-29
        3.1 干预方法  27
        3.2 取材及检测方法  27-29
      4 图像分析  29-30
    实验四艾烟对抑郁症大鼠海马iNOSmRNA表达的影响  30-33
      1 实验目的  30
      2 实验材料  30-31
        2.1 实验动物与分组  30
        2.2 材料和仪器  30-31
        2.3 模型制备  31
      3 实验方法  31-32
        3.1 干预方法  31
        3.2 取材及检测方法  31-32
      4 计算方法  32-33
  实验结果  33-41
    结果一：旷场试验结果  33-34
    结果二：体重测量结果  34-35
      1 成模后体重  34-35
      2 干预体重后  35
    结果三：血清NO结果  35-36
    结果四：艾烟对抑郁症大鼠海马细胞的影响  36-40
      1 海马iNOS免疫组化染色实验结果  36-38
      2 海马HE染色实验结果  38-40
    结果五：RT-PCR iNOSmRNA表达量结果  40-41
  讨论  41-44
    1 旷场试验结果讨论  41
    2 体重结果结果讨论  41
    3 血清NO结果讨论  41-42
    4 艾烟对抑郁症大鼠海马神经元的影响  42-43
      4.1 海马免疫组化染色实验结果讨论  42
      4.2 海马HE染色实验结果  42-43
    5 海马iNOSmRNA RT-PCR表达结果  43-44
  结论  44-45
参考文献  45-48
致谢  48-49
个人简历  49

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