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针刺足三里对MID模型大鼠海马cAMP、cGMP水平的影响

作　者: 宣雅波
导　师: 张露芬
学　校: 北京中医药大学
专　业: 针灸推拿学
关键词: 针刺多发梗塞性痴呆海马 cAMP CREB
分类号: R245
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的：采用栓子注入法制备多发梗塞性痴呆(MID)大鼠模型,观察针刺对MID大鼠行为学的影响,以及针刺对MID大鼠海马 cAMP.cGMP水平的影响,从而探讨针刺改善学习记忆功能、治疗血管性痴呆方面可能的作用机制。方法：1.制备多发梗塞性痴呆(MID)大鼠模型：采用栓子注入法制备MID大鼠模型。取同种大鼠颈总动脉采血,制备直径100-200μm的血凝块备用。应用时每10mg血凝块加0.3ml生理盐水制成混悬液。儿科4.5号头皮针针头逆行穿刺进右颈外动脉,缓慢注入栓子盐水混悬液0.3ml,使栓子通过颈内动脉进入颅内至大脑各动脉,造成多灶性脑梗塞。假手术组手术方法同模型制作,只在注射时以生理盐水0.3ml代替栓子溶液。实验分为正常组、假手术组、模型组,其中模型组又分为模型对照组、模型针刺组、和模型非穴组。2.针刺处理：造模后第8天针刺。针刺组取双侧足三里穴行捻转补法各30s。非穴组取双侧肋下一个固定非穴点(肋下髂嵴上10mm),作为对照刺激点,用平补平泻捻转手法各30s。针刺组、非穴组于模型筛选后开始针刺,每日1次,治疗6d,休息1d,2周共治疗12次。模型组、假手术组和正常组进行与针刺组和非穴组相同时间、相同程度的捉抓刺激。3. Morris水迷宫隐蔽平台实验：实验在针刺结束后进行。实验前1d,先让动物在不含平台的水池中自由游泳2min,使其熟悉迷宫环境。实验共3d,实验时平台位置固定不变,平台中点离池壁40cm。以非平台象限中点的任一点作为入水点,记录大鼠从入水至找到平台的时间(逃避潜伏期),每天在3个入水点各训练1次。以3次潜伏期的算术均值作为这一天的成绩进行统计分析。4.采用放免法检测大鼠海马cAMP cGMP含量:Morris水迷宫隐蔽平台实验结束后检测各组大鼠海马cAMP、cGMP含量。结果：(1)游泳速度：各组内大鼠游泳速度无显著性差异(F=4.126,P>0.05)。各组间无显著性差异(F=0.854,P>0.05),各组与游泳速度之间不存在交互作用(F=1.424,P>0.05)。(2)逃避潜伏期：各组内大鼠逃避潜伏期存在显著性差异(F=6.846,P<0.05)。各组间存在显著性差异(F=12.990,P<0.05),各组与逃避潜伏期之间不存在交互作用(F=0.231,P>0.05)。与正常组比较,模型组逃避潜伏期显著延长(P<0.05)。与模型组比较,针刺组和非穴组逃避潜伏期显著缩短(P<0.05),但两组之间未见明显差异(P>0.05)。(3)海马cAMP、cGMP含量变化：与正常组比较,模型组cAMP含量明显下降(p<0.01)。与模型组比较,针刺组cAMP含量升高(p<0.01)。cGMP含量未见明显变化(P>0.05)。结论：1、本实验采用栓子注入法制备大鼠多发梗塞性痴呆(MID)模型,造模后第2d观察动物的活动情况,进行Bederson神经学分级评分：结果显示,造模后大鼠症状体征符合MID的临床特征及病理改变,模型制备成功。2、针刺可改善多发梗塞性痴呆大鼠的空间参考记忆。可能的机制是通过调控cAMP-PKA-CREB信号通路,进而达到改善大鼠学习记忆功能的作用。针刺穴位和针刺非穴之间未见明显差异。3、针刺穴位可调节中枢水平cAMP、cGMP的失平衡状态,其作用机制可能与以下途径有关,激活cAMP-PKA-CREB信号通路,改善脑血管扩张受抑及脑血管持续痉挛状态,减轻大鼠海马神经细胞的损害。综合上述得出结论,针刺可以调节多发梗塞性痴呆大鼠海马内的cAMP、 cGMP失平衡状态,并改善多发梗塞性痴呆大鼠空间参考记忆。其机制可能与调控cAMP-PKA-CREB信号通路有关。

全文目录

目录  3-4
摘要  4-6
ABSTRACT  6-9
缩略词表  9-10
文献综述  10-24
  综述一：内源性环磷酸腺苷的信使作用  10-20
  综述二：针刺疗法对cAMP的调节作用研究概况  20-24
实验研究  24-34
  前言  24-26
  1 材料与方法  26
  2 实验步骤  26-27
  3 指标观察  27
  4 数据统计  27
  5 实验结果  27-34
讨论  34-40
  1 祖国医学对血管性痴呆病因、病机、病位方面的认识  34-35
  2 现代医学对血管性痴呆的研究  35-36
  3 cAMP-PKA-CREB信号通路研究  36-37
  4 针刺对cAMP-PKA-CREB信号通路的影响  37-38
  5 采用栓子注入法制备的MID大鼠模型的特点  38
  6 穴位的选择  38-40
小结  40-42
参考文献  42-50
致谢  50-52
个人简历  52-53

针刺足三里对MID模型大鼠海马cAMP、cGMP水平的影响

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