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大鼠玉米赤霉烯酮中毒卵巢组织Bcl-2、Bax、Caspsse-3和Caspase-9的表达

作　者: 俞亚玲
导　师: 李引乾
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 玉米赤霉烯酮 卵巢组织 Bax Bcl-2 Caspase-3 Caspase-9
分类号: S856.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的：研究玉米赤霉烯酮中毒大鼠卵巢组织Bax、Bcl-2、Caspase-3和Caspase-9表达的变化情况。本试验拟用免疫组织化学技术对正常大鼠，注射玉米赤霉烯酮大鼠卵巢组织凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3和Caspase-9的表达变化进行研究。方法：10周龄SD大鼠30只，随机分为试验组与对照组同步饲养。试验组（n=15）处理当天分别腹腔注射5mg/kg玉米赤霉烯酮溶液，对照组（n=15）处理当天腹腔注射等量生理盐水，复制大鼠米赤霉烯酮中毒模型，在此基础上，分别于注射后3h、6h、12h、24h、48h时剖杀取卵巢组织，检测不同时间卵巢组织Bax、Bcl-2、Caspase-3和Caspase-9的表达。结果：1大鼠玉米赤霉烯酮中毒病理模型的复制大鼠临床表现为阴唇红肿，精神萎顿，食欲减退等。剖检变化表现为：肝脏淤血肿胀，质地变脆；淋巴结肿大；胸腺有出血点；肾脏淤血；肺脏出血呈红色，输卵管子宫水肿，卵巢充血。组织病理变化为：大鼠肝小叶中央静脉扩张，充满红细胞，肝细胞变性；肾小管上皮细胞变性，肾小管管腔狭窄，呈星芒状；脾窦扩张，脾窦可见大量巨细胞及含铁血黄素；小肠黏膜固有层、黏膜下层毛细血管扩张，充满红细胞，组织间隙可见炎性细胞浸润。卵泡闭锁，颗粒细胞发生凋亡。经甲基绿-派洛宁染色、TUNEL凋亡检测可证实卵巢颗粒细胞发生凋亡。2卵巢组织Bax和Bcl-2的表达变化试验组与对照组卵巢组织中均有Bax和Bcl-2的表达，并且随着时间的推进呈现动态变化。Bax在3h，6h，12h时表达量上调，表达量与对照组比较差异显著（P﹤0.05），24h、48h时表达量下降，与对照组比较差异不显著（P﹥0.05）。3h至48h卵巢组织中Bcl-2表达量与对照组比较差异不显著（P﹥0.05）。3卵巢组织Caspase-3和Caspase-9的表达变化在3h至48h，试验组与对照组相比较卵巢组织Caspase-3的表达量上调，差异显著（P﹤0.05）。试验组大鼠卵巢组织Caspase-9的表达量在3h，6h和12h时与对照组比较差异显著（P﹤0.05），在24h，48h与对照组比较差异不显著（P﹥0.05）。结论：实验结果表明大鼠玉米赤霉烯酮中毒可引起卵巢组织的病变及颗粒细胞凋亡， Bax Caspase-3和Caspase-9在玉米赤霉烯酮中毒大鼠卵巢颗粒细胞凋亡中起着重要作用，Bcl-2的作用不明显。

全文目录


摘要  6-7
ABSTRACT  7-11
第一章 文献综述  11-23
  1.1 玉米赤霉烯酮研究概况  11-13
    1.1.1 ZEA 的发现和产生  11
    1.1.2 ZEA 的分布  11-12
    1.1.3 ZEA 理化性质  12
    1.1.4 ZEA 的代谢  12-13
  1.2 ZEA 的毒性  13-19
    1.2.1 ZEA 的类雌激素作用  14-15
    1.2.2 生殖发育毒性  15-16
    1.2.3 细胞毒性  16-17
    1.2.4 染色体毒性  17
    1.2.5 DNA 毒性  17-18
    1.2.6 基因毒性  18
    1.2.7 氧化损伤  18-19
  1.3 细胞凋亡相关因子研究进展  19-21
    1.3.1 bcl-2 家族  19
    1.3.2 Caspase 家族  19-20
    1.3.3 P53 基因  20
    1.3.4 Fas 及其产物  20-21
  1.4 颗粒细胞凋亡的影响  21-23
    1.4.1 颗粒细胞在卵泡发生中的作用  21
    1.4.2 颗粒细胞分泌因子对卵泡发育的调节  21-22
    1.4.3 颗粒细胞凋亡和卵泡闭锁  22-23
第二章 ZEA 中毒 SD 大鼠模型病理模型的复制  23-31
  2.1 材料  23
  2.2 方法  23-24
    2.2.1 动物模型复制  23
    2.2.2 石蜡切片制作  23
    2.2.3 TUNEL 凋亡检测  23-24
  2.3 结果  24-28
    2.3.1 临床症状  24
    2.3.2 病理学观察  24-26
    2.3.3 凋亡检测结果  26-28
  2.4 讨论  28-30
  2.5 小结  30-31
第三章 ZEA 中毒大鼠卵巢组织 Bax 和 Bcl-2 的表达  31-38
  3.1 试验材料  31
    3.1.1 实验动物  31
    3.1.2 试剂  31
  3.2 试验方法  31-32
    3.2.1 动物分组与处理  31
    3.2.2 病理组织切片制作  31
    3.2.3 免疫组织化学  31-32
    3.2.4 摄影与图像采集  32
  3.3 统计学分析  32
  3.4 结果  32-36
    3.4.1 病理学观察  32
    3.4.2 免疫组织化学结果  32-36
  3.5 讨论  36-37
  3.6 小结  37-38
第四章 ZEA 中毒大鼠卵巢组织 caspase-3 和 caspase-9 的表达  38-45
  4.1 试验材料  38
    4.1.1 实验动物  38
    4.1.2 试剂  38
  4.2 试验方法  38-39
    4.2.1 动物分组与处理  38
    4.2.2 病理组织切片制作  38-39
    4.2.3 免疫组织化学  39
    4.2.4 摄影与图像采集  39
  4.3 统计学分析  39
  4.4 结果  39-43
    4.4.1 大鼠卵巢颗粒细胞 caspase-3 的表达  39-41
    4.4.2 大鼠卵巢颗粒细胞 Caspase-9 的表达  41-43
  4.5 讨论  43-44
  4.6 小结  44-45
结论  45-46
参考文献  46-57
致谢  57-58
作者简介  58

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 兽医内科学 > 其他
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