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花曲柳组织培养和植株再生的研究
作 者: 单琳
导 师: 沈海龙; 杨玲
学 校: 东北林业大学
专 业: 森林培育
关键词: 花曲柳 组织培养 茎芽增殖 体胚发生 植株再生
分类号: S792.41
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
花曲柳(Fraxinus rhynchophylla Hance.)是木犀科白蜡树属的落叶乔木,木材材质坚硬细密,具有重要的经济价值、药用价值和绿化观赏价值。本研究旨在通过组织培养的手段,从器官发生途径和体细胞胚胎发生途径建立花曲柳的植株再生体系,为花曲柳的离体快速繁殖、种质资源保护和树种后续的开发利用奠定理论基础。研究结果如下:(1)花曲柳器官发生途径的研究中发现,四月份为花曲柳休眠芽取材最佳时期,改良的B5培养基是适合花曲柳茎段生长和增殖的最佳培养基。无菌苗萌发的茎段增殖效果优于休眠芽萌发的茎段;顶芽增殖效果优于腋芽增殖效果;初代增殖培养效果好于继代增殖效果。无论是休眠芽萌发的茎段还是无菌苗萌发的茎段均在改良的B5+BA4.0mg·L-1+IBA0.10mg·L-1的激素组合上增殖效果最好,增殖系数分别是2.32、3.29。花曲柳最适生根培养基为1/2MS+0.5mg·L-1NAA,生根率达到95.0%,移栽到草炭土:蛭石:珍珠岩=5:4:1的基质中生长良好,植株成活率为93.3%,苗高生长量为40.2%。花曲柳芽苗直接进行试管外生根培养,速蘸200g·L-1IBA芽苗成活率为60.0%。(2)以花曲柳未成熟的子叶期合子胚单片子叶为外植体,在MS1/2培养基中添加400mg-L-1水解酪蛋白、70g·L-1蔗糖和6g·L-1琼脂诱导产生了体胚。在0.25mg·L-16-BA+1.5mg·L-1NAA激素组合处理中体胚诱导率达到了最高(34.7%)。(3)以花曲柳成熟合子胚单片子叶为外植体,在与未成熟合子胚诱导体胚相同的培养基上诱导并产生了体胚。在0.25mg·L-16-BA+2mg·L-1NAA处理中体胚诱导率达到了最高(10.0%)。花曲柳体胚发育经历了一般被子植物体胚发生的四个典型时期:球形期、心形期、鱼雷形期和子叶形期。(4)对花曲柳子叶形体胚的萌发和植株再生进行了研究。在不添加任何激素的MS1/2培养基中,经过光照培养,体胚萌发率为87.6%。将萌发的体胚转移到添加NAA0.01mg·L-1的培养基上后,植株的再生率为45.5%。将完整的再生植株移栽到草炭土:蛭石:珍珠岩=5:4:1的栽培基质中,移栽培养30d统计体胚苗移栽成活率为75%。
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全文目录
摘要 3-4 Abstract 4-8 1 绪论 8-14 1.1 植物组织培养研究现状 8-10 1.1.1 植物体细胞胚胎发生研究现状 9-10 1.1.2 植物器官发生研究现状 10 1.2 白蜡树属植物组织培养研究现状 10-12 1.2.1 白蜡树属植物体细胞胚胎发生研究现状 10-11 1.2.2 白蜡树属植物器官发生研究现状 11-12 1.3 花曲柳组织培养研究 12-13 1.4 研究目的和意义 13-14 2 花曲柳器官发生和植株再生的研究 14-24 2.1 材料与方法 14-16 2.1.1 试验材料 14 2.1.2 试验方法 14-16 2.2 结果与分析 16-21 2.2.1 基本培养基种类对花曲柳茎芽萌发和生长的影响 16-17 2.2.2 不同取材月份对花曲柳休眠芽萌发和生长状态的影响 17 2.2.3 花曲柳茎芽增殖培养的结果 17-20 2.2.4 试管内生根培养的结果 20 2.2.5 炼苗移栽 20-21 2.2.6 试管外生根培养的结果 21 2.3 讨论 21-23 2.4 本章小结 23-24 3 花曲柳未成熟合子胚诱导体细胞胚胎发生研究 24-29 3.1 材料与方法 24-25 3.1.1 试验材料 24 3.1.2 试验方法 24-25 3.2 结果与分析 25-27 3.2.1 体胚发生和形态发育过程 25 3.2.2 生长调节剂对未成熟合子胚诱导体胚的影响 25-27 3.3 讨论 27 3.4 本章小结 27-29 4 花曲柳成熟合子胚诱导体细胞胚胎研究 29-33 4.1 材料与方法 29 4.1.1 试验材料 29 4.1.2 试验方法 29 4.2 结果与分析 29-31 4.2.1 体胚发生及形态发育过程 29-30 4.2.2 生长调节剂对成熟合子胚诱导体胚的影响 30-31 4.3 讨论 31-32 4.4 本章小结 32-33 5 花曲柳体胚萌发和植株再生的研究 33-36 5.1 材料与方法 33-34 5.1.1 试验材料 33 5.1.2 试验方法 33-34 5.2 结果与分析 34 5.2.1 体胚的成熟和萌发培养 34 5.2.2 体胚苗的移栽和驯化培养 34 5.3 讨论 34-35 5.4 本章小结 35-36 结论 36-38 参考文献 38-47 附录Ⅰ 47-48 附录Ⅱ 48-49 图版 49-54 攻读学位期间发表的学术论文 54-55 致谢 55-56
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中图分类: > 农业科学 > 林业 > 森林树种 > 阔叶乔木 > 梣
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