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不同诱导物对液体培养的猪苓菌丝中甾体和多糖成分生产的影响

作　者: 吴进
导　师: 王俊儒
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 药用植物学
关键词: 猪苓液体发酵诱导物甾体
分类号: S567.39
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 71次
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内容摘要

猪苓是我国传统的一种药食两用中药材，近年来由于医药市场的扩大和出口的增加，人们无节制地采挖猪苓，使其生存环境遭到破坏，野生猪苓资源锐减，难以满足市场需求。人工栽培猪苓受到诸多自然条件的限制，目前多采用野生菌核作种半人工栽培技术进行繁殖，而采用野生菌核作种栽培，需要大量的野生菌核，导致人工栽培种源获取困难，致使人工栽培成本上升，已成为制约猪苓人工栽培技术大面积推广的主要瓶颈。大量研究表明猪苓主要有效成分为多糖和甾体类物质，野生猪苓菌核和发酵生产的猪苓菌丝体在化学成分和药效活性方面基本没差别，利用发酵法生产猪苓菌丝体替代或部分替代猪苓菌核和以发酵猪苓菌丝体为原料获取活性物质，成为当前猪苓研究的重点。为进一步发掘发酵猪苓菌丝体的药用价值，探索诱导物对发酵猪苓菌丝体中多糖和甾体类化合物成分和含量的影响，本研究通过向猪苓液体发酵培养基中添加不同的诱导物（β-谷甾醇，胆固醇，豆甾醇）诱导猪苓菌丝体生长，对发酵后得到的猪苓菌丝体中多糖和甾体类化合物的含量进行研究，对比分析添加诱导物诱导发酵生产的猪苓菌丝体中多糖和甾体类化合物的含量变化，主要得到以下结论：1.对单一诱导物而言，从甾体和多糖平均含量和净增长量来看，三种单一诱导物中，对液体发酵培养的猪苓菌丝体生长诱导效果最好的是B组（胆固醇组），当其浓度为0.16mg·mL^-1时，其诱导发酵的猪苓菌丝体甾体含量最大，为13.170mg·g^-1，甾体增长量最大，为4.14mg·g^-1，增长了31.4%；其多糖含量也最大，为41.509mg·g^-1，较对照组增长31.418mg·g^-1，增长了75.7%。其次是C组（豆甾醇组），当其浓度为0.16mg·mL^-1时，猪苓菌丝体甾体含量最大为12.979mg·g^-1，增长量为4.057mg·g^-1，增长31.3%；猪苓菌丝体多糖含量最大为40.063mg·g^-1，较对照组增长30.774mg·g^-1，增长了76.8%。A组（β-谷甾醇组）的诱导效果的最差，当其浓度为0.16mg·mL^-1时，猪苓菌丝体甾体含量最大为12.633mg·g^-1，甾体增长量最大为2.686mg·g^-1，增长21.3%；猪苓菌丝体多糖含量最大为37.432mg·g^-1，较对照组增长20.373mg·g^-1，增长了54.4%。2.对混合诱导物而言，四组混合诱导物中，对液体发酵培养的猪苓菌丝体生长诱导效果最好的是G组（β-谷甾醇、胆固醇和豆甾醇混合组），其甾体含量和甾体增长量整体要高于其它三组，在G组混合诱导物内，其最佳添加浓度为0.08mg·mL^-1。在此混合诱导物和浓度下得到的干燥猪苓菌丝体中甾体总含量最大，为42.754mg。甾体增长量为13.707mg，较对照组增长了32%；此时得到的猪苓多糖总含量最大，为133.174mg。其次是F组（胆固醇和豆甾醇混合组），再次是E组（β-谷甾醇和胆固醇混合组），诱导效果最差的是D组（β-谷甾醇和豆甾醇混合组）。总的来说，单一诱导物和混合诱导物对液体发酵培养的猪苓菌丝体的生长均有一定的促进作用。其中，胆固醇的诱导效果要好于β-谷甾醇和豆甾醇，β-谷甾醇、胆固醇和豆甾醇混合诱导物的诱导效果要好于β-谷甾醇和胆固醇、β-谷甾醇和豆甾醇、胆固醇和豆甾醇组。而混合诱导物的诱导效果比单一诱导物的诱导效果要好。本研究初步筛选出了液体发酵培养猪苓菌丝体生产甾体和多糖的较优单一诱导物及较优添加浓度，并筛选得到较优的混合诱导物组成及其添加浓度，进一步丰富了猪苓资源的来源，为得到低价猪苓提供了一个有效途径，进一步研究了诱导发酵培养对猪苓主要成分的影响，为发酵生产中药有效成分提供了新的思路。

全文目录

摘要  6-8
ABSTRACT  8-12
第一章文献综述  12-27
  1.1 猪苓生物学特性  12-14
    1.1.1 猪苓形态学特征  12-13
    1.1.2 猪苓的生态学特性  13
    1.1.3 猪苓的生物学特性  13-14
  1.2 猪苓化学成分的研究进展  14-15
    1.2.1 猪苓多糖的研究  14
    1.2.2 甾体类化合物研究  14-15
    1.2.3 非甾体类(除多糖类外)化学成分  15
  1.3 猪苓栽培技术研究进展  15-16
  1.4 液体发酵在食药用真菌中的运用  16-17
    1.4.1 真菌液体发酵的概述  16-17
    1.4.2 液体发酵的工艺和特点  17
    1.4.3 液体发酵的优点  17
  1.5 猪苓液体发酵研究进展  17-20
    1.5.1 猪苓液体发酵培养基筛选  18
    1.5.2 液体发酵生产多糖的研究  18-19
    1.5.3 液体发酵法生产猪苓甾体的研究  19
    1.5.4 添加剂应用于猪苓液体发酵生产的研究进展  19-20
  1.6 甾体类化合物研究进展  20-21
    1.6.1 植物甾醇的研究进展  20-21
    1.6.2 真菌甾体化合物的研究进展  21
  1.7 猪苓的药理活性研究进展  21-26
    1.7.1 利尿作用  22
    1.7.2 抗肿瘤活性  22-23
    1.7.3 免疫调节功能  23-24
    1.7.4 保肝作用  24
    1.7.5 抗衰老作用  24
    1.7.6 细胞毒作用  24-25
    1.7.7 对血小板聚集作用的影响  25
    1.7.8 抗微生物活性  25
    1.7.9 抗辐射、抗诱变作用  25
    1.7.10 抗菌和抗炎作用  25
    1.7.11 其他作用  25-26
  1.8 立题的目的和意义  26-27
第二章单一诱导物对发酵猪苓菌丝体甾体和多糖成分生产的研究  27-43
  2.1 实验材料  28
  2.2 仪器和试剂  28
  2.3 实验方法  28-33
    2.3.1 菌种活化  28-29
    2.3.2 菌种扩繁  29
    2.3.3 液体发酵培养  29-30
    2.3.4 发酵液及菌丝体预处理  30
    2.3.5 发酵猪苓菌丝体中甾体含量的测定  30-32
    2.3.6 发酵猪苓菌丝体中多糖含量的测定  32-33
  2.4 结果与分析  33-41
    2.4.1 不同单一诱导物对发酵猪苓菌丝体生长特征的影响  33-34
    2.4.2 不同单一诱导物对发酵猪苓菌丝体干重的影响  34-35
    2.4.3 不同单一诱导物对发酵猪苓菌丝体中甾体含量的影响  35-38
    2.4.4 不同单一诱导物对发酵猪苓菌丝体中多糖含量的影响  38-41
  2.5 结论与讨论  41-43
第三章混合诱导物对发酵猪苓菌丝体甾体和多糖成分生产的研究  43-57
  3.1 实验材料  43
  3.2 仪器和试剂  43-44
  3.3 实验方法  44-45
  3.4 结果与分析  45-54
    3.4.1 不同混合诱导物对发酵猪苓菌丝体生长特征的影响  45-46
    3.4.2 不同混合诱导物对发酵猪苓菌丝体干重的影响  46-47
    3.4.3 不同混合诱导物对发酵猪苓菌丝体中甾体含量的影响  47-50
    3.4.4 不同混合诱导物对发酵猪苓菌丝体中多糖含量的影响  50-54
  3.5 结论与讨论  54-57
第四章结论  57-59
参考文献  59-64
致谢  64-65
作者简介  65

不同诱导物对液体培养的猪苓菌丝中甾体和多糖成分生产的影响

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