学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

1.轻度认知功能障碍与阿尔茨海默病临床综合性评价的对照研究 2.Alzheimer病大鼠脑内突触功能障碍分子生物学机制及干预的实验研究

作　者: 李强
导　师: 胡长林
学　校: 重庆医科大学
专　业: 神经病学
关键词: 阿尔茨海默病轻度认知功能障碍单光子发射计算机断层生长相关蛋白-43 β-淀粉样蛋白老年性痴呆地黄益知浸膏胆碱能系统突触可塑性
分类号: R285.6
类　型: 博士论文
年　份: 2008年
下　载: 800次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的:观察MCI、AD及CN各组在SPECT rCBF、P300与MMSE评分等临床综合性评定的不同表现及特点,同时检测以上各组脑脊液中GAP-43、Aβ1-42生化指标含量的变化,为进一步阐明MCI的临床特点及其防治提供理论依据,进而提高AD早期诊断的特异性和敏感性。方法:入选2006-01～2007-12重庆医科大学附属第二医院神经内科门诊或住院的MCI组36例,AD组25例,CN组30例。很可能AD的纳入标准采用美国国立神经病、语言障碍和卒中研究院-阿尔茨海默病和相关疾病学会的诊断标准;MCI组的纳入标准:采用Petersen等制定的标准;CN组的纳入标准:为同期本科的住院人员并除外可能影响认知功能的疾病。所有入选病例均获得本人和(或)法定监护人同意。神经心理学检查采用MMSE。经常规腰椎穿刺术取CSF约3ml,立即存于-70℃冰箱待测。应用肌电-诱发电位仪的听觉oddball程序检测P300。进行SPECT局部脑血流灌注显像,半定量分析各脑区血流灌注情况。用酶联免疫吸附试验测定各组CSF中GAP-43、Aβ1-42含量并比较。结果:(1)本实验入选者其性别、平均年龄、文化程度的构成,经统计学检验无显著性差异;与CN组及MCI组相比,AD组MMSE评分显著降低;与CN组相比,MCI组MMSE评分明显降低。(2)与CN组相比,MCI组与AD组P300潜伏期均有不同程度的延长;同MCI组和CN组相比,AD组P300波幅显著降低;P300波幅在MCI组与CN组之间差异无显著性。(3)AD组在双侧额叶、顶叶、颞叶、海马、左侧丘脑及扣带回RAR均较CN组有不同程度降低;MCI组仅在双侧颞叶、左侧海马及扣带回RAR减低具有统计学意义,且扣带回下降更明显。(4)AD组CSF中GAP-43含量明显高于CN组及MCI组,MCI组同CN组相比虽有所增高,但无显著意义。AD及MCI组CSF中Aβ1-42浓度同CN组相比均不同程度降低,且AD组降低更显著。结论:(1)SPECT检测在双侧颞叶、扣带回及左侧海马区rCBF显著降低可作为预测CN到MCI转化的灵敏指标;并可在一定程度上客观地反映AD、MCI及CN组之间的动态变化以及认知损害的严重程度。(2)对认知功能损害的监测,P300潜伏期的延长早于波幅的降低,是反映AD患者亚临床认知功能损害的敏感指标。检测P300潜伏期对早期发现AD可能有一定价值并可作为观察疗效的一个客观指标。(3)CSF中Aβ1-42、GAP-43的含量变化在一定程度上反映了从正常认知进展到MCI及AD的不同病理进程,可作为提高早期AD预测的生物学标志之一,而且可对治疗效果进行监测。(4)MMSE、rCBF、P300以及CSF中Aβ1-42、GAP-43的含量检查对于MCI、痴呆的早期诊断和客观反映痴呆严重程度具有重要价值,而不同指标的联用可提高AD的早期诊断。目的:观察地黄益知浸膏(DiHuang YiZhi JinGao,DHYZJG)对老年性痴呆(Alzheimer’s Disease,AD)大鼠学习记忆能力及中枢胆碱能系统及其信号转导通路功能紊乱、突触可塑性的影响,探索其防治AD的可能机制,并为其治疗AD提供实验室依据。方法:(1)DHYZJG由熟地黄、山茱萸、石菖蒲、远志、巴戟天等8味中药组成,在重庆中药研究院制成中药流浸膏(1g流浸膏相当于2g生药含量)。动物实验前对DHYZJG进行了急性毒理实验。(2)将90只雄性SD大鼠随机分为6组,右侧海马注射Aβ25-35造成AD模型,用电脑控制的穿梭箱及水迷宫检测大鼠的学习记忆能力。(3)通过苏木精-伊红、尼氏染色,观察各组大鼠海马CA1区的病理学变化。(4)应用Hestrin碱性羟胺比色法检测Ach的含量;应用微量羟胺比色法测定AChE活性;应用RT-PCR法检测M-AchR M1、N-AchR a4、a7mRNA的表达水平;应用Western-blot法测定CREB、GSK-3β的蛋白磷酸化水平。并以Donepezil为对照,探讨DHYZJG的治疗效果及其作用机理。(5)应用免疫荧光技术,采用激光共聚焦扫描仪检测AD大鼠海马CA1区GAP-43、PSD-95的表达;应用电镜和图象分析系统测量AD大鼠海马CA1区突触界面结构参数(突触数密度、突触后膜致密物厚度、突触活性区长度、突触界面曲率);并观察DHYZJG对AD大鼠海马突触可塑性的影响。结果:(1)在治疗4周后:Model组大鼠穿梭箱及水迷宫测试提示学习、记忆能力下降,DHYZJG可剂量依赖性的改善Model组大鼠的学习、记忆能力。(2)在治疗4周后:HE和尼氏染色显示,与Sham组相比,Model组大鼠右侧海马CA1区细胞脱失明显,出现核深染、固缩,胞浆内尼氏小体模糊不清或消失;DHYZJG High、Medium组神经细胞排列较整齐、结构较完整,神经元变性、坏死程度均较Model组轻。Nissl染色后,Model组大鼠右侧海马CA1区细胞数同Sham组相比显著减少,而DHYZJG High、Medium组则显著增多,并呈剂量依赖性。(3)在治疗4周后:与Sham组相比,Model组大鼠右侧海马Ach含量、AChE活性显著降低;与Model组相比,DHYZJG High、Medium组Ach含量不同程度的升高,AchE酶活性显著上调。(4)在治疗4周后:与Sham组相比,Model组大鼠右侧海马pCREB Ser133和pGSK-3βSer9蛋白表达显著降低,CREB和GSK-3β蛋白表达无明显下降;与Model组相比,DHYZJG High组大鼠右侧海马pCREB Ser133和pGSK-3βSer9蛋白含量均不同程度增高,但GSK-3β蛋白表达明显下降。(5)在治疗4周后:与Sham组相比,Model组大鼠右侧海马N-AchR a7 mRNA含量明显增高,M-AchR M1、N-AchR a4 mRNA表达无显著差异;与Model组相比,DHYZJG High组大鼠右侧海马M-AchR M1、N-AchR a7 mRNA表达水平均明显增高。(6)在治疗4周后:同Sham组相比,Model组大鼠右侧海马CA1区神经元突触Nv、PSD的厚度、突触活性区长度均显著下降,PSD-95表达显著降低,GAP-43表达明显增高;DHYZJG High组大鼠右侧海马CA1区神经元突触的Nv、PSD的厚度、突触活性区长度显著恢复,PSD-95、GAP-43的荧光强度比Model组均有不同程度增高,突触界面曲率各组间无显著差异。结论:(1)DHYZJG可剂量依赖性的改善AD大鼠学习记忆等认知功能障碍;(2)DHYZJG能剂量依赖性的减轻AD大鼠海马区的神经元坏死和凋亡程度,从而发挥神经保护作用;(3)AD大鼠可能是由于中枢胆碱能系统功能整体水平受损而使其失代偿;DHYZJG可剂量依赖性的改善AD大鼠中枢胆碱能系统的功能紊乱,使其达到新的动态平衡,也体现了中药的多靶点、整体调整特点;(4)AD组大鼠海马突触传递功能受阻,神经元间的信息传递、加工和储存受障,而DHYZJG可促进突触重构,调节突触可塑性,改善AD海马受损神经元轴突的生长和促进中枢神经系统反应性功能重建,最终改善认知功能障碍。

全文目录

摘要  8-14
ABSTRACT  14-23
第一部分轻度认知功能障碍与阿尔茨海默病临床综合性评价的对照研究  23-43
  前言  23-25
  1 对象和方法  25-29
  2 结果  29-32
  3 讨论  32-37
  4 小结  37-38
  参考文献  38-43
第二部分Alzheimer 病大鼠脑内突触功能障碍分子生物学机制及干预的实验研究  43-97
  前言  43-45
  1 材料和方法  45-64
  2 结果  64-73
  3 讨论  73-82
  4 小结  82-84
  参考文献  84-97
论文图片资料  97-108
文献综述一老年性痴呆中枢胆碱能系统研究进展  108-118
文献综述二突触可塑性及其相关蛋白与老年性痴呆的研究进展  118-132
致谢  132-133
攻读博士学位期间发表的论文目录  133

1.轻度认知功能障碍与阿尔茨海默病临床综合性评价的对照研究 2.Alzheimer病大鼠脑内突触功能障碍分子生物学机制及干预的实验研究

内容摘要

全文目录

相似论文