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6A8α-甘露糖苷酶表达对Jurkat细胞粘附性的影响

作　者: 曲莉
导　师: 朱立平
学　校: 中国协和医科大学
专　业: 免疫学
关键词: 6A8α-甘露糖苷酶 Jurkat细胞粘附 CD54-CD11a 细胞骨架免疫突触
分类号: R392
类　型: 博士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

蛋白质糖基化在细胞的功能行为中起重要的作用。本实验室以往克隆到了1个新的人α-甘露糖苷酶cDNA(6A8)，并观察到了6A8α-甘露糖苷酶表达抑制影响包括Jurkat细胞在内的多种细胞的生物学行为。在预实验中观察到6A8α-甘露糖苷酶表达抑制的Jurkat细胞(AS)在培养中聚集成大的团块，这提示AS细胞间的粘附性增强。为研究其机制，首先用含有粘附分子和其它免疫分子基因在内的440个基因的DNA芯片对AS和M细胞(转导空载体的对照细胞)间的基因表达差异作了分析，见AS细胞有19个基因的表达上调，有20个基因的表达下调。表达上调的基因中包括CD11a(整合素α-L)、CD54(ICAM-1)、CD82、CD24、CD11c(整合素α-X)、整合素α-7、CD103(整合素α-E)、TNFSF9、IL-1R和IL-2Rγ等与细胞间粘附相关的基因。RT-PCR和免疫荧光染色支持芯片的结果。这些基因中以CD54和CD11a最为重要。本论文工作中对它们作了重点研究。与对照细胞(野生型细胞W与M细胞)相比，AS细胞与包被有CD54分子的培养板的粘附增强。封闭性CD11a单抗能阻断细胞与包被有CD54分子的培养板的粘附及细胞间的粘附。这证明了CD54和CD11a表达增强参与AS细胞间粘附增强。AS细胞LFA-1分子的亲和力也增高。另外，AS细胞间的粘附增强也与细胞骨架排列改变相关。异种细胞间的粘附在免疫应答等的生命活动中也起重要的作用。在对AS细胞与对照细胞和Raji细胞间粘附的比较中，观察到前者和Raji细胞间的粘附增强。在超抗原SEB存在下，Jurkat细胞与Raji细胞间可形成免疫突触，并有信号传导发生。6A8α-甘露糖苷酶的功能是修剪N-糖链中的甘露糖，Con A结合实验能检测细胞糖蛋白N-糖链中的甘露糖被α-甘露糖苷酶修剪的程度。与对照细胞相比，Con A与AS细胞的结合明显增强。关于6A8α-甘露糖苷酶表达抑制所致的蛋白质糖基化改变影响Jurkat细胞粘附性的确切机制须作深入研究。

全文目录

中文摘要  4-5
英文摘要  5-7
缩略语表  7-8
前言  8-10
材料和方法  10-25
  一、实验材料  10-15
  二、实验方法  15-25
结果  25-44
讨论  44-51
小结  51-52
参考文献  52-61
综述  61-91
个人简历  91-92
致谢  92-93

6A8α-甘露糖苷酶表达对Jurkat细胞粘附性的影响

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