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Mint2与神经生长因子受体TrkA结合的生物学功能研究

作　者: 王永刚
导　师: 何成
学　校: 第二军医大学
专　业: 神经生物学
关键词: 神经生长因子 Mint2 受体酪氨酸激酶 PC12细胞分化
分类号: Q42
类　型: 博士论文
年　份: 2007年
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内容摘要


本研究通过免疫共沉淀证实了TrkA与Mint2在大鼠DRG和基底前脑确实存在结合。利用特异性的Mint2抗体和TrkA抗体标记脊髓DRG组织切片,发现Mint2和TrkA在DRG神经元内共存。构建EGFP-Mint2、EGFP-TrkA和Myc-Mint2融合蛋白表达质粒,瞬时转染PC12细胞后,EGFP-Mint2、Myc-Mint2和EGFP-TrkA的细胞内分布与定位与文献相符,且在NGF作用下EGFP-TrkA会发生内化。通过PC12细胞分化实验发现Mint2过表达后抑制NGF诱导的PC12细胞分化。同时Mint2过表达后明显抑制DRG神经元突起生长,内源性Mint2被干扰后可促进DRG神经元突起生长。免疫细胞化学然色发现GFP-TrkA,myc-Mint2和WGA在细胞内有很强的共定位,提示GFP-TrkA与myc-Mint2在Golgi体有共定位。生物素标记后,免疫印迹检测发现myc-Mint2抑制GFP-TrkA上膜。应用生物素和streptavidin标记后染色显示发现NGF刺激后内化的GFP-TrkA弥散分布于细胞内,没有出现Golgi体聚集现象。提示Mint2分子引起的GFP-TrkA聚集发生在NGF刺激之前。

全文目录


摘要  4-7
Ⅰ 英文缩写字表  7-9
Ⅱ 摘要  9-16
  摘要  9-12
  Abstract  12-16
Ⅲ 前言  16-19
Ⅳ材料和方法  19-30
Ⅴ 结果  30-49
Ⅵ 讨论  49-55
Ⅶ 结论  55-56
Ⅷ 致谢  56-57
Ⅸ 参考文献  57-62
Ⅹ 博士期间发表文章  62-63
Ⅺ 综述  63-86
Ⅻ 综述参考文献  86-94

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中图分类: > 生物科学 > 生理学 > 神经生理学
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