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早产儿脑白质损伤动物模型的建立及早期干预的疗效研究
作 者: 荣箫
导 师: 周伟
学 校: 广州医学院
专 业: 儿科学
关键词: 脑白质损伤 重组人红细胞生成素 神经节苷脂 神经生长因子 早期治疗
分类号: R722.6
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 26次
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内容摘要
目的:建立4日龄SD大鼠脑白质损伤(white matter damage,WMD)动物模型,早期分别给予重组人红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rHuEPO)、单唾液酸四己糖神经节苷脂(monosialotetrahexosylganglioside, GM1)或神经生长因子(nerve growth factor,NGF)治疗,比较干预后大鼠的病理形态学和神经行为功能改变情况,探讨rHuEPO、GM1和NGF对缺血缺氧性WMD新生大鼠的神经保护作用,为临床早期干预早产儿脑白质损伤提供依据。方法:4日龄SD大鼠290只,随机分为5组:假手术组、生理盐水(saline, NS)组、EPO组、GM1组和NGF组。假手术组仅切开颈部皮肤,分离双侧颈总动脉,再缝合颈部伤口,其余四组结扎双侧颈总动脉,再分别予以等体积的NS 0.01 ml/g、EPO 5 IU/g、GM1 0.02 mg/g、NGF 2 IU/g腹腔内注射,GM1和NGF间隔24h重复给药,共给药5次。各组动物分别于术后(假手术组于对应时间)24h、48h、72h、7d、26d称量体重,再断头处死。常规H-E染色观察脑白质损害情况,免疫组织化学染色观察各时间点髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、β淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,β-APP)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)抗原的表达。术后26d(生后30d)采用悬吊、斜坡和旷场试验进行神经行为学检测。结果:1.四组WMD大鼠体重明显增长不良,各时间点NS组、EPO组、GM1组和NGF组大鼠的体重均与假手术组有显著性差异(P<0.05);而术后7d、26d EPO组大鼠和术后26d NGF组体重高于NS组,差异有显著性意义(P<0.05);各时间点GM1组大鼠体重均与NS组无显著性差异(P>0.05)。2.缺血缺氧后大鼠出现脑室周围白质损伤,光镜下表现为脑室周围白质细胞肿胀、坏死和凋亡、组织疏松、侧脑室进行性扩大。与NS组比较,EPO组、GM1组和NGF组大鼠光镜下病理变化无明显差异,但术后72h片状坏死的范围较小,术后7d、26d侧脑室扩大的程度较轻。3.缺氧缺血后大鼠脑组织免疫组化染色MBP阳性细胞百分率降低,APP、GFAP阳性细胞百分率增高。给予rHuEPO、GM1、NGF治疗后,术后72h、7d MBP阳性细胞百分率较NS组增高,术后72h、7d、26d APP阳性细胞百分率较NS组降低,术后48h、72h、7d、26d GFAP阳性细胞百分率较NS组降低,差异有显著性意义(P<0.05)。4.30日龄时, NS组、EPO组、GM1组和NGF组大鼠反应迟钝、自主活动减少,灵活性、稳定性降低。NS组大鼠悬吊、斜坡和旷场试验的结果均差于假手术组,差异有显著性意义(P<0.05);EPO组、GM1组和NGF组大鼠悬吊、斜坡和旷场试验的结果均优于NS组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:采用4日龄SD大鼠双侧颈总动脉结扎术可成功建立早产儿脑白质损伤动物模型;早期给予EPO、GM1或NGF干预治疗能够促进大鼠的体格生长和脑白质损伤的修复,改善其神经行为功能。
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全文目录
主要英文缩略词表 4-5 中文摘要 5-7 英文摘要 7-10 前言 10-14 材料与方法 14-20 结果 20-27 讨论 27-37 结论 37-38 附图 38-44 参考文献 44-50 综述 50-59 参考文献 56-59 攻读学位期间公开发表论文 59-60 致谢 60-62
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中图分类: > 医药、卫生 > 儿科学 > 新生儿、早产儿疾病 > 早产儿疾病
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