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BMP-2基因转染ADSCs复合CTCP成骨及修复颌骨缺损的实验研究

作　者: 郑培惠
导　师: 魏奉才
学　校: 山东大学
专　业: 整形外科
关键词: 脂肪干细胞骨组织工程腺病毒载体骨形成蛋白-2(BMP-2) 壳聚糖-磷酸三钙(CTCP)
分类号: R622
类　型: 博士论文
年　份: 2006年
下　载: 178次
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阅　读: 论文下载

内容摘要

目的 1、探索SD大鼠脂肪组织来源干细胞(adipose derived stem cells，ADSCs)的体外培养方法，观察其体外增殖能力及生物学特性，对细胞表面干细胞相关标志进行鉴定，为脂肪干细胞的进一步研究奠定基础。 2、对原代及第3代ADSCs向脂肪细胞、成骨细胞、成脂肪细胞定向诱导，观察其多向分化潜能，并探讨其体外成骨能力，为ADSCs作为骨组织工程种子细胞提供理论依据。 3、扩增、纯化本实验室所构建的含重组人骨形态发生蛋白-2(human bone morphogenetic protein，hBMP-2)基因和含绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)基因的重组腺病毒表达载体(Ad-hBMP-2，Ad-GFP)，并测定其滴度；研究ADSCs经基因转染后生物学行为的变化和目的基因的表达，应用Ad-GFP转染细胞，测定腺病毒转染效率。 4、探索以Ad-BMP-2转染的ADSCs作种子细胞，并以壳聚糖—磷酸三钙(CTCP)为支架材料，构建组织工程化骨的可行性，观察在无免疫力的裸鼠体内成骨情况，和在有免疫力的SD大鼠体内修复下颌骨缺损的效果。方法 1、从3周龄SD大鼠腹股沟脂肪垫分离出脂肪组织，通过Ⅰ型胶原酶消化法获取原代ADSCs，适时传代。逐日倒置显微镜观察细胞形态及生长特征；研究其增殖过程，MTT法绘制出生长曲线；采用免疫组化、免疫荧光流式细胞术对细

全文目录

中文摘要  6-10
英文摘要  10-15
符号说明  15-17
第一部分脂肪干细胞的分离培养、体外扩增及鉴定  17-40
  前言  17
  材料和方法  17-22
  结果  22-24
  讨论  24-28
  结论  28-29
  附图  29-38
  参考文献  38-40
第二部分脂肪间充质干细胞的诱导分化  40-63
  前言  40
  材料与方法  40-47
  讨论  47-51
  结论  51-52
  附图  52-60
  参考文献  60-63
第三部分 Ad-BMP-2对脂肪干细胞生物学行为的影响和目的基因的表达  63-91
  前言  63-64
  材料与方法  64-70
  结果  70-73
  讨论  73-78
  结论  78-79
  附图  79-87
  参考文献  87-91
第四部分 Ad-BMP-2基因转染的ADSCs组织工程化骨的构建及体内植入试验  91-114
  前言  91-92
  材料与方法  92-96
  结果  96-98
  讨论  98-101
  结论  101-102
  附图  102-112
  参考文献  112-114
全文总结  114-115
致谢  115-116
攻读博士期间发表的论文目录  116-117
学位论文评阅及答辩情况表  117

BMP-2基因转染ADSCs复合CTCP成骨及修复颌骨缺损的实验研究

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