学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

腺伴随病毒-2型载体的构建外源基因的表达及重组病毒包装系统研究

作　者: 张桐
导　师: 王文亮；侯云德；王伯云；杨新科
学　校: 第四军医大学
专　业: 病理学
关键词: 腺伴随病毒表达载体构建基因表达重组腺伴随病毒安全性 EBV载体包装系统
分类号: R346
类　型: 博士论文
年　份: 1996年
下　载: 84次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

在本实验中，我们以野生型人类2型腺伴随病毒(Adeno-associated Virus Type 2，AAV-2)全基因组载体pSSV9，pSSV9-int~-为基础，构建了AAV-2重组病毒载体pSSV9／P40-LacZ(+)，pSSV9／P40-LacZ(-)，pSSV9／MuLV-neosv和pSSV9／MuLV-neosv-IL2，以及表达载体pGEM-3zf／P40-LacZ。用重组载体质粒转染宿主细胞，以及重组病毒转导宿主细胞后，作了外源基因瞬式表达研究，探讨了该载体外源基因表达规律。对载体质粒转染和重组病毒感染的细胞进行了初步形态学观察研究，考察了该重组病毒载体在使用中的安全性。此外，我们以EBV载体pBV101为基础，构建了pBV101／AAVitr~-，表达载体，并初步建立了EBV载体重组AAV包装细胞系统。 1、重组AAV载体的构建我们以pSSV9(pSSV9-int~-)AAV-2基因组为载体的基础，从两个Xba Ⅰ切去AAV的rep和Cap基因，替换以外源基因及其转录控制元件。插入AAVP40启动子和β-半乳糖苷酶基因LacZ(含SV40小T抗原及poly信号)，形成pSSV9／P40-LacZ(+)和pSSV9／P40-LacZ(-)载体。并在克隆过

全文目录

中文摘要  4-8
英文摘要  8-10
英文缩写词表  10-11
一、文献回顾  11-20
  1 概述  11
  2 腺伴随病毒Ⅱ型形态、生物学特征及分子生物学特点  11-14
  3 AAV-2为基础的载体  14-20
二、实验研究  20-66
  1 前言  20-21
  2 材料与方法  21-30
  3 结果  30-60
    3.1 pSSV9／P40-LacZ(+)、pSSV9／P40-LacZ(-)以及pGEM-3zf／P40-LacZ(1)载体的构建和β-半乳糖苷酶基因的表达  30-49
    3.2 pSSV9／MuLV-neosv和pSSV9／MuLV-neosv-IL2载体的构建及及neo、IL-2基因的表达  49-55
    3.3 EBV载体AAV重组病毒包装系统的初步研究结果  55-60
  4 讨论  60-65
  5 小结  65-66
致谢  66-67
参考文献  67-74

腺伴随病毒-2型载体的构建外源基因的表达及重组病毒包装系统研究

内容摘要

全文目录

相似论文