学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

残次坛紫菜营养成分分析及其多糖分离纯化和生理活性研究

作　者: 徐景燕
导　师: 陈美珍
学　校: 汕头大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 残次坛紫菜营养成分多糖提取纯化体外抗氧化降血糖活性
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 63次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

末水坛紫菜由于色泽差、口感粗糙、售价很低,菜农不愿采收,常被废弃海中。为了综合利用末水坛紫菜（简称残次坛紫菜）,本文首次对采集于广东南澳县残次坛紫菜进行较系统研究。分析比较了同一海域的残次坛紫菜和坛紫菜主要产品三水坛紫菜主要营养成分的差异,响应面法优化了残次坛紫菜多糖（APHP）提取工艺,对提取的多糖进行分离纯化,化学和IR、2D-NMR光谱等分析多糖的组成与结构,最后研究多糖的体外抗氧化和降血糖等生理活性,以期为残次坛紫菜的高值化利用提供理论依据。营养成分分析结果表明:与三水坛紫菜比较,残次坛紫菜的粗脂肪、粗蛋白和粗纤维的含量提高,而灰份、总糖和多糖含量均降低。另外,残次坛紫菜富含多种氨基酸,其中含有七种人体必需氨基酸（EAA）,蛋白质质量较好。残次坛紫菜的K、Na、Mg和Ca等常量元素含量丰富,Fe、Zn、Cu等微量元素含量也较高。重金属Hg的含量符合卫生标准,而As和Pb的含量则略有超标。因此,残次坛紫菜具有较高的营养和食用价值,但对残次坛紫菜进行加工利用时应考虑适当除去As和Pb。响应面法优化的APHP提取工艺条件为:微波辅助处理时间4min,液料比50:1,水提时间2h,水提温度100℃。在此最优提取条件下,多糖的产率达到10.81%。比较了热水提取多糖（WP）和微波辅助热水提取多糖（MP）的组成结构变化。将两种多糖分别过DEAE-52和Sephadex G-150层柱析进行洗脱分离,得到的洗脱曲线均是单一组分,紫外光谱进一步鉴定为纯多糖。对WP和MP的化学组分分析表明,两者分子量大小、硫酸基含量、3,6-内醚半乳糖含量均相差不大。IR和2D-NMR分析发现两者光谱曲线形状基本一致,进一步的结构分析表明WP和MP均是硫酸半乳聚糖类物质,可见微波辅助提取多糖并未破坏多糖基本结构。体外抗氧化实验结果显示:残次坛紫菜粗多糖（未去蛋白）和精多糖（去蛋白）都具有一定的还原能力和抗氧化作用,但作用效果均低于对照物维生素C。精多糖具有体外清除·OH、·O₂^-和DPPH·的作用。粗多糖对DPPH·有较强的清除能力,对·O₂^-有一定的清除作用,但对·OH无清除能力。以四氧嘧啶诱导的糖尿病模型小鼠为研究对象,探讨APHP的降血糖作用和对机体的保护作用。结果显示,经灌胃给予不同剂量的APHP,小鼠的血糖浓度均明显降低（p<0.05）,并呈现量效关系;小鼠胰腺、肾脏、肝脏指数和免疫器官胸腺与脾脏指数均有所提高,表明APHP能一定程度保护糖尿病小鼠脏器和免疫器官及功能;小鼠血清TC和LDL水平均降低（p<0.05）,TG也有一定程度的下降,HDL含量升高,显示APHP对糖尿病小鼠有降血脂作用;小鼠血清、肝脏和肾脏的T-AOC及抗氧化酶（SOD、GSH-Px和GSH）活性明显增强（p<0.05）,MDA含量明显降低（p<0.05）,说明APHP具有增强糖尿病小鼠机体的抗氧化能力;HE染色显示小鼠的胰腺,肝脏,肾脏,脾脏以及胸腺都得到了一定程度的修复。结果表明APHP不仅能降低糖尿病小鼠血糖水平,而且可以调节小鼠的血脂紊乱,提高机体抗氧化和免疫能力,改善组织形态异常,对糖尿病小鼠组织器官损伤具有一定的保护作用,说明APHP降血糖作用可能与其对糖尿病小鼠组织器官功能的修复有关。

全文目录

摘要  3-5
Abstract  5-7
缩略词  7-12
第一章前言  12-20
  1.1 国内外对紫菜及其多糖的研究进展  12-19
    1.1.1 紫菜营养成分研究概况  12-13
    1.1.2 紫菜多糖制备方法及纯化研究  13-14
    1.1.3 紫菜多糖的结构分析  14-16
    1.1.4 紫菜多糖药理活性研究  16-19
  1.2 研究意义  19
  1.3 主要研究内容  19-20
第二章残次坛紫菜和三水坛紫菜营养成分分析  20-27
  2.1 材料与仪器  20
    2.1.1 材料  20
    2.1.2 主要试剂  20
    2.1.3 主要仪器  20
  2.2 方法  20-23
    2.2.1 样品处理  20-21
    2.2.2 水分的测定  21
    2.2.3 样品糖含量测定  21-22
    2.2.4 粗蛋白测定  22
    2.2.5 氨基酸组成分析  22
    2.2.6 粗脂肪测定  22
    2.2.7 粗纤维测定  22
    2.2.8 灰份测定  22
    2.2.9 矿物元素的测定  22-23
  2.3 结果与讨论  23-25
    2.3.1 一般营养成分分析结果  23
    2.3.2 氨基酸含量分析  23-24
    2.3.3 矿物元素含量分析  24-25
  2.4 结论  25-27
第三章响应面法优化残次坛紫菜多糖提取工艺的研究  27-39
  3.1 材料与仪器  27
    3.1.1 实验材料  27
    3.1.2 主要试剂  27
    3.1.3 主要仪器  27
  3.2 方法  27-29
    3.2.1 多糖提取率的计算  27-28
    3.2.2 微波法提取多糖  28
    3.2.3 直接热水法提取多糖  28
    3.2.4 响应面法优化微波辅助热水提取多糖  28-29
  3.3 结果与分析  29-38
    3.3.1 直接热水浸提多糖的实验结果  29
    3.3.2 液料比对多糖提取率的影响  29-30
    3.3.3 微波辅助处理时间对多糖提取率的影响  30-31
    3.3.4 水提温度对多糖提取率的影响  31
    3.3.5 水提时间对多糖提取率的影响  31-32
    3.3.6 微波提取次数对多糖提取率的影响  32
    3.3.7 响应面分析试验方案及结果  32-37
    3.3.8 岭脊分析  37
    3.3.9 模型的验证  37-38
  3.4 结论  38-39
第四章残次坛紫菜多糖的分离纯化及其结构鉴定  39-50
  4.1 材料与仪器  39
    4.1.1 实验材料  39
    4.1.2 主要试剂  39
    4.1.3 主要仪器  39
  4.2 方法  39-42
    4.2.1 微波辅助热水提取多糖（MP）  39-40
    4.2.2 热水法浸提多糖（WP）  40
    4.2.3 MP 和 WP 的分离纯化  40
    4.2.4 紫外光谱分析  40
    4.2.5 分子量的测定  40-41
    4.2.6 半乳糖含量测定  41
    4.2.7 3,6-内醚-半乳糖含量的测定  41
    4.2.8 硫酸根含量测定  41-42
    4.2.9 红外光谱分析  42
    4.2.10 二维核磁共振分析  42
  4.3 结果与分析  42-49
    4.3.1 DEAE-52 离子交换柱结果  42-43
    4.3.2 Sephadex G-150 层析柱结果  43
    4.3.3 紫外光谱分析  43-44
    4.3.4 多糖的化学组成分析  44-46
    4.3.5 红外光谱分析  46-47
    4.3.6 2D-NMR 结果分析  47-49
  4.4 小结  49-50
第五章残次坛紫菜多糖体外抗氧化活性研究  50-57
  5.1 材料与试剂  50
    5.1.1 材料  50
    5.1.2 主要试剂  50
  5.2 方法  50-53
    5.2.1 粗多糖样品的制备  50
    5.2.2 精多糖样品的制备  50-51
    5.2.3 多糖样品蛋白质含量测定  51
    5.2.4 多糖还原力的测定  51
    5.2.5 多糖对羟自由基（·OH）清除能力的测定  51-52
    5.2.6 多糖对超氧阴离子（·0_2~-）清除能力的测定  52
    5.2.7 多糖对 DPPH·的清除能力的测定  52-53
  5.3 结果与讨论  53-56
    5.3.1 粗多糖和精多糖的蛋白含量  53
    5.3.2 多糖的还原能力  53-54
    5.3.3 多糖对羟自由基（·OH）的清除作用  54-55
    5.3.4 多糖对超氧阴离子（·0_2~-）的清除作用  55
    5.3.5 多糖对 DPPH·自由基的清除作用  55-56
  5.4 讨论  56-57
第六章残次坛紫菜多糖对糖尿病小鼠保护作用  57-66
  6.1 材料与仪器  57-58
    6.1.1 实验材料  57
    6.1.2 实验动物  57
    6.1.3 主要试剂  57-58
    6.1.4 主要仪器  58
  6.2 方法  58-59
    6.2.1 多糖药物制备  58
    6.2.2 糖尿病模型建立  58
    6.2.3 动物分组与处理  58-59
    6.2.4 样本采集  59
    6.2.5 生化指标分析  59
  6.3 实验结果  59-64
    6.3.1 残次坛紫菜多糖对糖尿病小鼠血糖和体重的影响  59-60
    6.3.2 残次坛紫菜多糖对糖尿病小鼠血脂的影响  60-61
    6.3.3 残次坛紫菜多糖对糖尿病小鼠抗氧化能力的影响  61-63
    6.3.4 残次坛紫菜多糖对糖尿病小鼠免疫器官的影响  63
    6.3.5 残次坛紫菜多糖对糖尿病小鼠脏器的影响  63-64
  6.4 小结  64-66
第七章残次坛紫菜多糖对糖尿病小鼠病理组织学的影响  66-75
  7.1 材料  66
    7.1.1 实验材料  66
    7.1.2 实验动物  66
  7.2 方法  66-67
    7.2.1 多糖药物制备  66
    7.2.2 糖尿病模型建立  66
    7.2.3 动物分组与处理  66
    7.2.4 样本采集  66-67
    7.2.5 组织和形态学分析  67
  7.3 结果与分析  67-73
    7.3.1 残次坛紫菜多糖对糖尿病小鼠胰腺组织的病理学影响  67-69
    7.3.2 残次坛紫菜多糖对糖尿病小鼠肝脏组织的病理学影响  69-70
    7.3.3 残次坛紫菜多糖对糖尿病小鼠肾脏组织的病理学影响  70-71
    7.3.4 残次坛紫菜多糖对糖尿病小鼠脾脏组织的病理学影响  71-72
    7.3.5 残次坛紫菜多糖对糖尿病小鼠胸腺组织的病理学影响  72-73
  7.4 小结  73
  7.5 讨论  73-75
全文小结与展望  75-76
  全文小结  75
  展望  75-76
参考文献  76-84
致谢  84-85
发表论文情况  85

残次坛紫菜营养成分分析及其多糖分离纯化和生理活性研究

内容摘要

全文目录

相似论文