学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

木犀草素体外抗乳腺癌作用与IGF-1通路和ERα的关系

作　者: 尚斐
导　师: 谢明杰
学　校: 辽宁师范大学
专　业: 微生物学
关键词: 木犀草素乳腺癌胰岛素样生长因子-1 雌激素受体α
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 71次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

木犀草素(Luteolin)是从多种天然药物、蔬菜果实中分离得到的一种有代表性的无毒的天然黄酮类化合物,药理作用广泛。近年来的研究表明,木犀草素对肝癌、结直肠癌、卵巢癌、前列腺癌和乳腺癌等多种肿瘤有显著抑制作用。随着人们对木犀草素的抗肿瘤作用的研究日趋深入,发现其抗肿瘤机制主要与阻断肿瘤细胞信号转导有关。细胞信号转导系统控制着细胞的所有生命活动,参与细胞所有的生理和病理过程,细胞信号转导系统异常在肿瘤的发生和发展各个阶段都具有重要的意义。近年来研究表明,胰岛素样生长因子-1(Insulin-like Growth Factor-1,IGF-1)介导的信号转导通路能参与肿瘤细胞凋亡调控,是癌基因及抑癌基因发挥生物活性的关键环节,在乳腺癌的发生发展中起着十分关键的作用。IGF-1和IGF-1R在多种肿瘤组织和细胞中过度表达,既能作为肿瘤发生和预后的诊断和治疗标记,也是一个具有广泛应用前景的肿瘤治疗靶点。然而,细胞内的信号通路是一个复杂的网络,并非是一个个单一的线性通路。近些年研究显示,IGF-1信号通路与雌激素通路之间存在着相互关系,IGF-1通路的生物学作用会受到细胞内雌激素受体α(Estrogen Receptorα,ERα)的调节。目前尚未有文献系统报道木犀草素的抗乳腺癌作用与IGF-1通路和ERα之间的关系。因此,本研究以乳腺癌MCF-7细胞作为体外模型,对木犀草素体外抗乳腺癌活性进行了测定,并对木犀草素体外抗乳腺癌作用与IGF-1通路和ERα之间的关系进行了研究。研究结果如下:1.采用(四甲基偶氮唑盐)MTT比色法,对木犀草素体外抗乳腺癌活性进行了研究,实验结果显示木犀草素能以时间和剂量依赖效应显著抑制MCF-7细胞的体外增殖。2.应用流式细胞仪,对木犀草素诱导MCF-7细胞凋亡情况进行了测定,结果显示木犀草素可诱导MCF-7细胞发生凋亡,并可将MCF-7细胞周期阻滞于S期。3.利用MTT比色法和流式细胞仪,对木犀草素抑制IGF-1促细胞增殖和抗细胞凋亡作用进行了研究。结果显示,外源性IGF-1能够明显促进MCF-7细胞的体外增殖并抑制其凋亡,而木犀草素能显著抑制IGF-1诱导的MCF-7细胞增殖和抗细胞凋亡作用。4.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blotting方法,对木犀草素体外抗乳腺癌作用与IGF-1通路的关系进行了研究。结果显示:木犀草素可显著抑制内源性IGF-1的分泌,并伴随着对IGFBP-3分泌的促进;木犀草素可使IGF-1R和Akt蛋白磷酸化水平显著下降,但对Erk1/2蛋白的磷酸化无明显影响。说明木犀草素主要是通过抑制IGF-1介导的PI3K-Akt信号转导通路来抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长,促进其凋亡。5.采用MTT比色法和Western blotting方法,对木犀草素抑制IGF-1诱导的MCF-7细胞增殖作用与ERα蛋白表达之间的关系进行了研究。结果显示,木犀草素能显著抑制IGF-1诱导的MCF-7细胞增殖作用,其抑制作用与ERα蛋白表达有关。6.采用Western blotting方法,通过检测加入雌激素受体抑制剂ICI182780和转染质粒ERα-siRNA前后木犀草素对IGF-1诱导的Akt蛋白磷酸化水平的抑制效果,来研究木犀草素通过干预IGF-1通路发挥的抗乳腺癌作用与ERα的关系。结果显示,加入ICI182780和转染质粒ERα-siRNA前,与IGF-1组相比,木犀草素组的p-Akt蛋白表达水平显著下降。而加入ICI182780和转染质粒ERα-siRNA后,木犀草素组的p-Akt蛋白表达水平与对照组相比则基本无变化。说明木犀草素通过干预IGF-1介导的PI3K-Akt通路发挥的抗乳腺癌作用与ERα蛋白表达有关,ERα可能是木犀草素发挥抗乳腺癌作用的靶点之一。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-11
1 绪论  11-23
  1.1 木犀草素的结构  12-13
  1.2 木犀草素的生理功能  13-17
    1.2.1 木犀草素的抗肿瘤作用  13-15
    1.2.2 木犀草素的抗炎作用  15
    1.2.3 木犀草素的抗菌作用  15-16
    1.2.4 木犀草素的抗病毒作用  16
    1.2.5 木犀草素的防治纤维化的作用  16
    1.2.6 木犀草素的治疗慢性支气管炎的作用  16
    1.2.7 木犀草素的促凝血、抗生育以及类雌激素样作用  16-17
  1.3 IGF 系统与乳腺癌  17-20
    1.3.1 IGF 系统简介  17
    1.3.2 IGF 系统的结构和功能  17-19
    1.3.3 IGF 系统与乳腺癌的相关研究  19-20
    1.3.4 IGF 系统与乳腺癌的治疗  20
  1.4 IGF-1 信号转导通路与ER 通路之间的关系  20-22
  1.5 小结  22-23
2 木犀草素体外抗乳腺癌作用与IGF-1 通路的关系  23-37
  2.1 材料与方法  23-24
    2.1.1 材料和试剂  23-24
    2.1.2 主要仪器  24
  2.2 方法  24-28
    2.2.1 主要试剂配制  24-26
    2.2.2 细胞培养  26
    2.2.3 MTT 比色法检测木犀草素体外抗乳腺癌活性  26
    2.2.4 流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡情况  26
    2.2.5 MTT 比色法检测木犀草素对IGF-1 促细胞增殖作用的影响  26
    2.2.6 流式细胞仪检测木犀草素对IGF-1 抗细胞凋亡作用的影响  26-27
    2.2.7 IGF-1、IGFBP-3 的含量测定  27
    2.2.8 Western blotting 方法检测蛋白表达  27-28
    2.2.9 统计学分析  28
  2.3 结果与分析  28-34
    2.3.1 木犀草素体外抗乳腺癌活性检测结果  28
    2.3.2 木犀草素对MCF-7 细胞周期分布和细胞凋亡的影响  28-29
    2.3.3 IGF-1 对MCF-7 细胞生长的促进作用  29
    2.3.4 木犀草素对IGF-1 促MCF-7 细胞增殖作用的影响  29-30
    2.3.5 木犀草素对IGF-1 抗MCF-7 细胞凋亡作用的影响  30-31
    2.3.6 木犀草素对IGF-1 和IGFBP-3 含量的影响  31-32
    2.3.7 木犀草素对IGF-1 诱导的IGF-1R 蛋白磷酸化水平的影响  32-33
    2.3.8 木犀草素对IGF-1 诱导的Akt 蛋白和Erk1/2 蛋白磷酸化水平的影响  33-34
  2.4 讨论  34-35
  2.5 小结  35-37
3 木犀草素通过干预IGF-1 通路发挥的抗乳腺癌作用与ERα的关系  37-47
  3.1 材料与方法  37-38
    3.1.1 材料和试剂  37-38
    3.1.2 主要仪器  38
  3.2 方法  38-40
    3.2.1 细胞培养  38
    3.2.2 MTT 法检测细胞活力  38-39
    3.2.3 Western blotting 方法检测蛋白表达  39
    3.2.4 脂质体介导的siRNA 质粒转染  39
    3.2.5 ERα-siRNA 转染前后木犀草素对IGF-1 诱导的Akt 蛋白磷酸化水平的影响  39-40
    3.2.6 统计学分析  40
  3.3 结果与分析  40-44
    3.3.1 木犀草素抑制IGF-1 诱导的乳腺癌细胞增殖作用与ERα的关系  40
    3.3.2 木犀草素对ERα蛋白表达的影响  40-41
    3.3.3 木犀草素抑制IGF-1 诱导的Akt 蛋白磷酸化水平与ERα的关系  41-42
    3.3.4 ERα-siRNA 转染对ERα蛋白和p-Akt 蛋白表达水平的影响  42-43
    3.3.5 ERα-siRNA 转染前后木犀草素对IGF-1 诱导的Akt 蛋白磷酸化水平的影响  43-44
  3.4 讨论  44-46
  3.5 小结  46-47
4 结论与展望  47-49
  4.1 本研究结论  47-48
  4.2 本研究有待于深入的内容  48-49
本论文主要创新点  49-50
参考文献  50-57
附录A 缩略语表  57-58
攻读硕士学位期间发表学术论文情况  58-59
致谢  59

木犀草素体外抗乳腺癌作用与IGF-1通路和ERα的关系

内容摘要

全文目录

相似论文