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杨木变色菌的分离鉴定及生防细菌的研究
作 者: 席刚俊
导 师: 韩正敏
学 校: 南京林业大学
专 业: 微生物学
关键词: 杨木 变色菌 生物学特性 拮抗 生物防治
分类号: S781.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
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内容摘要
杨树作为我国主要的速生树种,在种植及板材加工领域越来越受重视。目前,杨木板材生物变色已给木材加工业造成了巨大的损失,研究杨木变色菌及其生物防治具有很现实的经济意义。本研究采用了组织分离法和诱导法分离到来源不同的变色菌14株,对这些菌株进行了变色能力测定及形态学鉴定,并做了生物学特性研究;选取了6种有代表性的变色菌作为供试菌株,通过平板对峙法、发酵滤液抑菌试验进行了生防菌的筛选,进行了室内木片变色防治试验,并初步研究了拮抗菌株的抑菌机理。内容如下:1.分离到14个来源不同的变色菌株,经形态学鉴定归属于2亚门3纲3目6属7种,分别为可可球二孢[Lasiodiplodia theobromae(Pat.)Griff.&Maubl.]、Lasiodiplodiarubropurpurea Burgess.&Barber.、Lasiodiplodia crassispora Burgess,Barber&Pegg.、多隔镰刀菌(Fusarium decemcellulare Brick.)、长喙壳[Ceratocystis adiposa(Butl.)Moreau.]、鞘孢菌(Chalara urceolata Nag Raj&W.B.Kendr.)、群生小穴壳菌(Dothiorella gregaria Sacc.)及链格孢(Alternaria sp.),其中链格孢的两个菌株未鉴定到种。2.木片变色试验显示,球色单隔孢属(Lasiodiplodia theobromae,L.rubropurpurea,L.crassispora)的变色菌引起杨木变色的速度最快,链格孢(Alternaria sp.)次之,其余的几种菌变色较慢。3.变色菌生物学特性研究表明,14个菌株对极酸条件都比较敏感,在pH2大部分菌株停止生长,适合生长的pH范围大致为在5~9,在强碱性条件pH11下都能生长。温度试验表明,大部分变色菌对温度非常敏感,生长的温度范围一般在10℃~35℃,其中,链格孢、群生小穴壳、多隔镰刀菌、鞘孢菌和长喙壳其最适生长温度范围为25℃~30℃,而球色单隔孢属(Lasiodiplodia theobromae,L.rubropurpurea,L.crassispora)的三种菌最适生长温度范围为30℃~35℃;光照试验结果表明,光照对Lasiodiplodia theobromae、L.rubropurpurea、L.crassispora、长喙壳和群生小穴壳的生长有促进作用,试验中还发现在全光条件下有利于球二孢产生子实体,也有利于多隔镰刀菌产生粘性孢子团。试验证明分离至不同地区和寄主的相同菌株,其在不同pH、温度及光照下表现出一定的差异,这表明同一菌株在不同的环境下生长,其生物学特性也会发生一些变化。4.从土壤和未变色杨木组织中分离到204株细菌,并采用平板对峙法筛选出9株拮抗菌,它们与6种供试变色菌对峙都能形成拮抗透明带:用生长速率法复筛,拮抗菌B4抑菌效果最好,抑菌率都在90%以上,将其作为进一步研究的对象。5.通过室内木片变色防治试验,用发酵液处理过的木片接种变色菌10d后,木片未发生变色,且接种的菌饼出现了萎缩;而对照组中的木片均发生了不同程度的变色,变色菌在木片上和木片周围生长,但在靠近处理组木片的一侧菌丝生长也受到了抑制。6.B4菌株抑菌机理研究表明,B4菌株的拮抗物质可抑制变色菌菌丝生长和孢子萌发,用发酵滤液处理后,变色菌菌丝变形,原生质外溢,孢子不萌发或萌发产生不正常的芽管或孢子畸形、肿大,形成圆球状泡。
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全文目录
致谢 3-4 摘要 4-6 Abstract 6-11 第一章 文献综述 11-22 1.木材变色的类型 11-12 2 木材生物变色研究 12-17 2.1 变色与脱色机理 12-13 2.2 木材变色菌的种类 13-14 2.3 变色菌的生物学特性 14-15 2.4 变色菌的寄主范围与传播媒介 15-17 3 木材生物变色防治 17-21 3.1 木材生物变色的物理和化学防治 17-18 3.1.1 物理防治 17-18 3.1.2 化学防治 18 3.2 生物防治 18-21 3.2.1 木材变色生物防治的分类 18-19 3.2.2 生防菌的作用机理 19-20 3.2.3 木材生物防治的研究现状 20-21 4 本研究的目的意义 21-22 第二章 杨木变色菌的分离鉴定与生物学特性 22-61 1 材料与方法 22-26 1.1 材料与仪器 22-23 1.1.1 材料的采集 22 1.1.2 试验用具和仪器 22-23 1.2 试验与方法 23-26 1.2.1 培养基的配制 23 1.2.2 变色发生与症状观察 23 1.2.3 变色菌的分离培养 23 1.2.4 变色菌的变色试验 23-25 1.2.5 变色菌鉴定 25-26 1.2.6.变色菌生物学特性 26 2.结果与分析 26-59 2.1 杨木变色发生与症状观察 26-27 2.2 变色菌的分离及变色能力测定 27-32 2.2.1 变色菌的分离结果 27-30 2.2.2 变色菌变色能力的测定 30-32 2.3 变色菌的鉴定 32-40 2.3.1 球色单隔孢属(表2-7) 33-36 2.3.2 链格孢(Alternaria sp.YM1,YM077) 36-37 2.3.3 群生小穴壳(Dothiorella gregaria Sacc.)(YM074) 37-38 2.3.4 多隔镰刀菌(Fusarium decemcellulare Brick)(YM072,YM075) 38-39 2.3.5 Ceratocystis adiposa(Butl.)Moreau.(HZ91) 39 2.3.6 鞘孢菌(Chalara urceolata Nag Raj & W.B.Kendr.)(HZ92) 39-40 2.4 变色菌的生物学特性研究 40-59 2.4.1 不同pH值对变色菌生长的影响 40-48 2.4.2 不同温度对变色菌生长的影响 48-56 2.4.3 不同光照对变色菌生长的影响 56-59 3.结论与讨论 59-61 3.1 变色菌的分离鉴定 59-60 3.2 变色菌变色试验 60 3.3 变色菌生物学特性 60-61 3.3.1 不同pH对变色菌生长的影响 60 3.3.2 不同温度对变色菌生长的影响 60 3.3.3 不同光照对变色菌生长的影响 60-61 第三章 木材变色生防菌的分离筛选 61-77 1.材料与方法 61-64 1.1 材料 61-62 1.1.1 拮抗菌分离材料的来源 61 1.1.2 供试变色菌 61 1.1.3 培养基 61 1.1.4 主要仪器设备及试剂 61-62 1.2 实验方法 62-64 1.2.1 土壤和未变色木片组织中的细菌分离与纯化 62 1.2.2 拮抗菌的筛选 62-63 1.2.3 拮抗菌防治木片变色室内试验 63 1.2.4 拮抗细菌菌株的培养特性及生长曲线 63 1.2.5 不同稀释倍数的细菌发酵滤液对变色菌的抑制作用 63 1.2.6 拮抗细菌发酵滤液对变色菌的抑制机理初步研究 63-64 2.结果与分析 64-75 2.1 拮抗菌的分离及初步筛选结果 64-67 2.2 复筛结果 67-70 2.3 B4发酵液防治木片变色室内实验 70-71 2.4 B4细菌培养特性及生长曲线 71-72 2.4.1 B4细菌菌落形态特征 71-72 2.4.2 B4细菌在LB培养基中的生长曲线 72 2.5 B4发酵滤液不同稀释倍数对变色菌的抑菌效果 72-73 2.6 B4发酵滤液对变色菌的抑制机理初步研究 73-75 2.6.1 B4发酵滤液对变色菌菌丝生长的影响 73-74 2.6.2 B4发酵滤液对变色菌孢子萌发的影响 74-75 3 结论与讨论 75-77 3.1 结论 75-76 3.2 讨论 76-77 3.2.1.关于拮抗菌的分离和筛选 76 3.2.2 关于木片变色防治试验 76 3.2.3 关于拮抗机理研究 76-77 第四章 全文小结与展望 77-79 1 全文小结 77-78 2 展望 78-79 参考文献 79-85 详细摘要 85-88
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中图分类: > 农业科学 > 林业 > 森林采运与利用 > 木材学 > 木材的缺陷
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