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基于远缘杂交技术的海南野生兰花种质创新研究

作　者: 郭丽霞
导　师: 莫饶
学　校: 华南热带农业大学
专　业: 作物遗传育种
关键词: 野生兰花远缘杂交亲和性贮藏花粉无菌播种种质创新
分类号: S682.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

本研究以海南野生兰为材料,较为系统地了解其观赏特性、远缘杂交亲和性以及研究花粉贮藏及其生活力检测、人工授粉、远缘杂交种子无菌播种等远缘杂交育种技术,在此基础上进行种质创新,为创新利用海南丰富的热带兰花资源提供育种技术和材料。所获得的结果如下:1对海南野生兰科植物观赏性状进行了较为全面的观察和评价。按观赏特性可分为大花型(24种)、多花型(23种)、长花序型(16种)、特长花序型(8种)、圆锥花序型(12种)、具香气型(20种)六类型。同时筛选了62种可直接开发利用的原生种,并从观赏角度将其划分为四类:观花类(15种)、观叶类(3种)、花叶兼具类(27种)、株型类(17种)。2首次建立了较为完整的海南野生兰花远缘杂交技术体系,包括人工授粉技术、花粉块贮藏及其生活力检测技术、真假远缘杂种形态鉴别及其技术。花粉块经干燥a~ch后贮藏于Y℃下1年,采用花粉形态法、离体萌发法、授粉结实检测法检测,仍具有生活力。形态鉴别法根据子房膨大天数,柱头,杂交果大小、形态及颜色,种子颜色和形态,F1小苗性状等变化和差别,对真假杂种进行简单、直观地判断。3建立了海南野生兰花远缘杂交种子无菌播种技术。获得以“花宝一号”、“MS”为基础,适当添加2.0~4.0 mg/L 6-BA、0.1~0.5 mg/L NAA及5~10%椰汁、香蕉泥等培养基,适于海南野生兰花种子无菌播种,已对33个种和30个杂交组合的种子进行了培养,并获得自交种苗及部分远缘杂种F1小苗。4国内首次探讨了海南野生兰远缘杂交亲和性。对海南野生兰花进行大范围属、种间远缘杂交,涉及了海南现有兰科植物的34个属70个种,并获得部分远缘杂交种。种间杂交亲和性由高到低依次为毛兰属>隔距兰属>兰属>盆距兰属>石斛属>万代兰属。其中隔距兰属、毛兰属种间正、反交亲和性高。不同属间杂交亲和性由高到低依次是脆兰属>蜘蛛兰属>花蜘蛛兰属>虾脊兰属>尖囊兰属>带唇兰属>鹤顶兰属>五唇兰属、地宝兰属>毛兰属>美冠兰属>兰属>贝母兰属>万代兰属>石豆兰属>金石斛属>血叶兰属>隔距兰属>石斛属>钻喙兰属等。5获得创新种质12份。筛选了20个具有优良性状的亲本组合,11个组合已萌发,7个获得一定数量远缘杂种F1小苗,并移栽成活,长势良好。国内首次通过远缘杂交获得叶缘金黄的变异类型。

全文目录

摘要  3-4
Abstract  4-9
Ⅰ 前言  9-18
  1 兰花育种研究现状及进展  9-16
    1.1 兰花种质资源的研究现状  9-10
      1.1.1 世界兰花种质资源概况  9
      1.1.2 我国兰花种质资源概况  9-10
    1.2 兰花育种目标与育种途径  10-16
      1.2.1 兰花育种目标  10
      1.2.2 育种目标途径  10-16
        1.2.2.1 花粉贮藏及生活力测定  11-12
        1.2.2.2 远缘杂交育种  12-13
        1.2.2.3 组织培养技术在兰花育种中的应用  13-15
          1.2.2.3.1 无菌播种繁殖后代  13-14
          1.2.2.3.2 原生质体融合及组织培养结合诱变育种  14-15
        1.2.2.4 倍性育种  15
        1.2.2.5 分子标记手段及基因工程在兰花育种中的应用  15-16
  2 本研究目的和意义  16-17
  3 技术路线  17-18
Ⅱ 材料与方法  18-23
  1 试验材料  18
    1.1 植物材料  18
      1.1.1 观赏特性评价植株材料  18
      1.1.2 花粉保存和花粉萌发材料  18
    1.2 实验用具和药品  18
      1.2.1 实验药品  18
      1.2.2 仪器和用具  18
  2 实验方法  18-23
    2.1 野生兰观赏特性评价  18-19
    2.2 海南野生兰花远缘杂交亲和性探讨  19-21
      2.2.1 花粉块生活力测定及贮藏技术  19-20
        2.2.1.1 采集及贮藏方法  19
        2.2.1.2 花粉生活力测定方法  19-20
      2.2.2 远缘杂交人工授粉技术  20-21
    2.3 种质创新研究  21-23
      2.3.1 种子无菌播种技术研究  21-22
        2.3.1.1 外植体的选取、预处理及表面消毒  21
        2.3.1.2 诱导培养  21
        2.3.1.3 继代培养  21-22
        2.3.1.4 壮苗生根培养  22
        2.3.1.5 炼苗移栽  22
      2.3.2 远缘杂交创新种质  22-23
        2.3.2.1 远缘杂交亲本选择  22
        2.3.2.2 远缘杂交种子培养  22
        2.3.2.3 杂种 F_1 小苗的观察  22-23
Ⅲ 结果与分析  23-44
  1 野生兰观赏特性评价  23-25
    1.1 生物学特性描述  23-24
    1.2 观赏特性评价  24
    1.3 观赏角度评价  24-25
  2 海南野生兰花远缘杂交亲和性探讨  25-39
    2.1 远缘杂交技术的研究  25-35
      2.1.1 花粉生活力测定及贮藏技术  25-33
        2.1.1.1 花粉形态结构观察  25-26
        2.1.1.2 花粉生活力测定技术  26-29
        2.1.1.3 花粉块贮藏技术  29-33
      2.1.2 远缘杂交人工授粉技术  33-35
        2.1.2.1 特殊柱头授粉技术  33
        2.1.2.2 授粉后柱头等形态颜色变化  33-34
        2.1.2.3 授粉后果实生长及发育  34-35
    2.2 远缘杂交亲和性探讨  35-39
  3 种质创新研究  39-44
    3.1 种子无菌播种技术研究  39-41
      3.1.1 自交种子无菌播种  39
      3.1.2 杂交种子的无菌播种  39-41
        3.1.2.1 杂交种子的形态及对萌发的影响  39-40
        3.1.2.2 亲本生长习性与杂交种子量的关系  40
        3.1.2.3 培养基对杂交种子萌发的影响  40-41
    3.2 远缘杂交创新种质  41-44
Ⅳ 讨论与结论  44-49
  1 讨论  44-47
    1.1 关于海南野生兰观赏性状评价  44-45
    1.2 关于远缘杂交亲和性研究  45-46
      1.2.1 花粉贮藏和生活力测定  45-46
      1.2.2 关于远缘杂交亲和性研究  46
    1.3 关于种质创新  46-47
  2 结论  47-49
参考文献  49-54
缩略词及其英中名称对照表  54-56
版图Ⅰ  56-57
版图Ⅱ  57-59
版图Ⅲ  59-62
版图Ⅳ  62
版图Ⅴ  62-63
附录Ⅰ-1  63-67
附录Ⅰ-2  67-81
附录Ⅰ-3  81-88
附录Ⅱ  88-90
附录Ⅲ  90-92
附录Ⅳ-1  92-94
附录Ⅳ-2  94-102
附录Ⅴ-1  102-108
附录Ⅴ-2  108-110
致谢  110

基于远缘杂交技术的海南野生兰花种质创新研究

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