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石蒜属植物染色体分带和荧光原位杂交研究

作　者: 王利平
导　师: 徐立安
学　校: 南京林业大学
专　业: 林木遗传育种
关键词: 石蒜属 C-带荧光原位杂交 5S rDNA 45S rDNA
分类号: S682.29
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 295次
引　用: 3次
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内容摘要

通过改良的C-带技术,初步建立了石蒜、换锦花、中国石蒜和忽地笑的C-带带型;采用荧光原位杂交技术,将核糖体序列的5S rDNA和45S rDNA直接定位在了换锦花、安徽石蒜和长筒石蒜的染色体上。石蒜、换锦花、中国石蒜和忽地笑的C-带以中间带和端带为主,带型公式依次是,石蒜:2n=3x=33=3CI_+T+3I_++4CI_+T~++8I_+T~++3CT~++3T+3T_++6;换锦花:2n=2x=22=2C+ 2I+T~++2T+2T~++4I_+T+2I_+T_++2CI_+T+2I_++4;中国石蒜:2n=2x=16=2CI_+T~++2I_+T_++ 2CT~++4I_++2I~+T~++4;忽地笑:2n=16=A:2CI_+T+4CI_++4CI~+T+2和B:1CIT~++1I+1C T_++1CI~+T~+。4种植物中,换锦花和石蒜的带纹数量最多,忽地笑次之,中国石蒜最少。组成型异染色质含量的特点是:换锦花(17.2%)>石蒜(16.9%)>忽地笑(16.5%)>中国石蒜(9.42%)。初步推测,在石蒜属植物中,组成型异染色质含量物随物种进化而削减。5S rDNA和45S rDNA定位结果显示,两个序列在换锦花、安徽石蒜和长筒石蒜中大多分布在近着丝粒区域。换锦花中有6个5S rDNA位点,位于染色体端部,4个位点的信号强、2个位点的信号弱;2个45S rDNA位点分别在4、5号染色体的一条同源染色体上。安徽石蒜有6个5S rDNA,分别定位在5、7、8号I染色体的近着丝粒区域;8个45S rDNA杂交位点在4、5、6、7号染色体上,信号亮度在4号染色体上最大,6号中等,5号和7号最弱。长筒石蒜有8个5S rDNA位点,分布在4、5、7、8号染色体的近着丝粒区域;9个45S rDNA位点,由于制片不够理想,只能确定8个在I染色体上。在安徽石蒜的5号、7号染色体和长筒石蒜至少3对I染色体上,5S rDNA和45S rDNA杂交信号同时出现在相同染色体的相同区域。5SrDNA杂交信号在安徽石蒜的5号和长筒石蒜的4号、7号两条同源染色体上,强弱有差异。由5S rDNA和45S rDNA杂交位点数目推断,换锦花较原始,安徽石蒜和长筒石蒜在亲缘关系较近,且长筒石蒜进化上略高于安徽石蒜。结合C-带和FISH结果,初步推测,在进化过程中,换锦花处于较原始的地位,石蒜次之,含16条染色体物种较进化。其中忽地笑染色体变异比较大。在亲缘关系上换锦花和石蒜较近,忽地笑和中国石蒜较近,安徽石蒜和长筒石蒜较近。

全文目录

致谢  3-4
摘要  4-5
Abstract  5-11
第一章文献综述  11-27
  1. 石蒜属植物概况  11-15
    1.1 石蒜属植物的生物学特征  11-12
    1.2 石蒜属植物的利用价值  12-13
    1.3 石蒜属植物分子细胞研究  13-15
  2. 染色体GIEMSA C-分带和荧光显带  15-20
    2.1 染色体分带概述  15
    2.2 植物染色体Giemsa C-分带  15-19
      2.2.1 植物染色体 Giemsa C-分带研究的发展  16
      2.2.2 植物染色体 Giemsa C-分带的显带机制  16-18
      2.2.3 植物染色体 Giemsa C-带的应用  18-19
    2.3 荧光分带  19-20
  3. 荧光原位杂交  20-25
    3.1 荧光原位杂交技术的发展  20-21
    3.2 荧光原位杂交技术的应用  21-22
      3.2.1 进行基因定位  21
      3.2.2 研究染色体易位  21
      3.2.3 检测外源基因  21-22
      3.2.4 鉴定亲缘关系  22
    3.3 核糖体rDNA 荧光原位杂交概述  22-25
      3.3.1 5S rDNA 在植物中的研究现状  23-24
      3.3.2 45S rDNA 在植物中的研究现状  24-25
  4. 本研究的内容、目的意义  25-27
    4.1 研究内容  25-26
    4.2 研究目的意义  26-27
第二章石蒜属植物染色体分带  27-43
  1. 实验材料  27
  2. 实验方法  27-28
    2.1 染色体制片  27
      2.1.1 取材  27
      2.1.2 材料处理  27
    2.2 染色体显带技术  27-28
      2.2.1 染色体C-分带  27-28
      2.2.2 DAPI 荧光显带  28
  2. 结果与分析  28-41
    2.1 石蒜属植物染色体制片  28-31
      2.1.1 取材对染色体制片的影响  28-29
      2.1.2 预处理对染色体制片的影响  29
      2.1.3 解离和揭片对染色体制片的影响  29-31
    2.2 石蒜属植物染色体C-分带  31-33
      2.2.1 酸、碱变性对染色体C-分带的影响  31-32
      2.2.2 Giemsa 溶液的浓度和处理时间对 C-分带的影响  32-33
    2.3 石蒜属植物染色体C-带带型  33-39
      2.3.1 石蒜的C-带带型分析  33
      2.3.2 换锦花的C-带带型分析  33-36
      2.3.3 中国石蒜的 C-带带型分析  36
      2.3.4 忽地笑的C-带带型分析  36-39
      2.3.5 石蒜属植物 C-带的比较  39
    2.4 石蒜属植物DAPI 显带  39-41
  3. 讨论  41-43
    3.1 染色体 C-带的多态性  41
    3.2 石蒜属植物的核型  41-42
    3.3 石蒜属植物带型与进化  42-43
第三章石蒜属植物荧光原位杂交  43-53
  1. 实验材料  43
  2. 实验方法  43-44
    2.1 染色体制片同第二章1.2.1  43
    2.2 染色体荧光原位杂交  43-44
  3. 结果与分析  44-50
    3.1 荧光原位杂交技术  44-47
    3.2 核糖体rDNA 的分布位点  47-50
  4. 讨论  50-53
    4.1 核糖体rDNA 杂交信号多态性  50
    4.2 核糖体rDNA 分布特点  50-52
    4.3 重复序列rDNA 位点分布与核型分析  52-53
第四章结论与展望  53-55
  1. 结论  53
  2. 展望  53-55
参考文献  55-60
详细摘要  60-63

石蒜属植物染色体分带和荧光原位杂交研究

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