学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

超抗原SEA对PML-RARα融合多肽诱导TCR Vβ亚家族T细胞克隆性的影响

作　者: 白雪
导　师: 林晨
学　校: 暨南大学
专　业: 免疫学
关键词: PML-RARα 金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA) T细胞受体(TCR) 急性早幼粒细胞白血病(APL)
分类号: R392
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 52次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的：了解PML-RARα、SEA及联合应用诱导人外周血T淋巴细胞后，TCR Vβ亚家族的特异性表达及杀伤性情况，以期寻找能有效增强PML-RARα免疫原性的方法，为APL免疫治疗和开发特异性高效价的抗APL基因疫苗提供可行性资料和前期性研究数据。方法：分别以SEA和PML-RARα多肽单独及联合诱导人外周血T细胞增殖，并设IL-2对照组和ConA对照组。利用RT-PCR-基因扫描技术分析诱导20天后的外周血TCR Vβ亚家族的优势利用和克隆性增殖的特点；同时用CCK-8试剂盒检测对白血病细胞株NB4和K562的细胞毒性；利用流式细胞术检测细胞表面CD3~+细胞中CD4和CD8分子的表达情况；并利用ELISA方法检测培养液上清中IFN-γ、IL-4、IL-10细胞因子的分泌水平。结果：限制性表达和克隆性增殖的TCR Vβ亚家族T细胞均可见于PML-RARα多肽单独及联合SEA诱导后的外周血T细胞；而经SEA单独诱导后的外周血T细胞仅表现出了对TCR Vβ亚家族T细胞的优势利用。经CCK-8检测细胞杀伤活性，显示诱导后的T细胞均具有较强的细胞毒作用，且PML-RARα多肽联合SEA诱导的T细胞比二者单独诱导的T细胞表现出更强烈的细胞毒作用。流式细胞术结果显示经PML-RARα多肽或联合SEA诱导后T细胞(CD3~+细胞)，以CD8~+ CTL增殖为主。ELISA结果显示，经PML-RARα多肽单独及联合SEA诱导后，上清中Th1型细胞因子IFN-γ水平明显升高；Th2型细胞因子(IL-4，IL-10)水平低下。结论：PML-RARα多肽在体外联合SEA诱导外周血T细胞增殖以CD8~+ CTL为主，呈克隆性增殖，此优势增殖的克隆性T细胞具有特异性细胞毒作用，该细胞毒作用强于单独应用PML-RARα多肽或SEA诱导后的T细胞，故SEA可以协同PML-RARα多肽增强其对T细胞的特异性诱导作用。

全文目录


中文摘要  4-5
英文摘要  5-7
目录  7-9
一 前言  9-23
  1 APL与PML-RARα研究背景  9-11
  2 APL治疗的现状及发展趋势  11-15
  3 超抗原SEA抗肿瘤的研究现状  15-19
  4 TCR基因重排研究在肿瘤及白血病研究中的应用  19-22
  5 本实验的研究目的、内容及意义  22-23
二 材料和方法  23-36
  1 主要实验仪器和耗材  23-24
  2 主要实验材料和试剂  24-26
  3 本研究的技术路线  26
  4 实验方法  26-36
三 结果  36-58
  1 外周血单个核细胞的提取  36
  2 SEA对外周血MNC作用的最佳浓度  36-37
  3 PML-RARα多肽诱导外周血T细胞增殖情况  37-38
  4 RNA提取、cDNA合成情况  38-39
  5 诱导前后外周血T细胞的TCR Vβ亚家族表达和克隆性分析  39-43
  6 特异性诱导后外周血T细胞的杀伤活性分析  43-46
  7 T淋巴细胞亚群的检测  46-51
  8 培养液上清中细胞因子水平的检测  51-58
四 讨论  58-74
  1 超抗原SEA刺激PBMC的增殖  58-60
  2 特异性抗原诱导外周血MNC的培养  60
  3 SEA联合PML-RARα多肽对外周血T细胞TCR V β亚家族基因谱系及克隆性的影响  60-67
  4 诱导后外周血T细胞对白血病细胞株的特异性杀伤活性分析  67-68
  5 特异性抗原诱导后T细胞亚群的变化  68-71
  6 小结  71-74
五 结论  74-75
参考文献  75-84
附录一 英文缩略词表  84-85
附录二 在学期间发表论文清单  85
附录三 本研究基金项目  85-86
致谢  86

相似论文

  1. 冬凌草甲素诱导急性早幼粒白血病细胞凋亡与分化的研究,R285
  2. 全反式维甲酸、亚砷酸对白血病NB4细胞CD44变异体表达的影响,R733.7
  3. 纳米金传感器的构建及其对急性早幼粒细胞白血病的初步实验研究,R733.71
  4. 人急性早幼粒细胞白血病的MRD监测及临床应用研究,R733.71
  5. 塞来昔布对急性早幼粒细胞白血病细胞株作用及其机制的体外研究,R733.71
  6. 丹参酮ⅡA诱导急性早幼粒细胞性白血病分化机制的研究,R733.71
  7. 硒化壳聚糖对急性早幼粒细胞性白血病NB4细胞的作用及其机制探讨,R733.7
  8. 急性早幼粒细胞白血病患者FLT3基因突变与表达及其临床意义,R733.7
  9. 实时定量PCR检测PML/RARα mRNA技术平台的建立及其在急性早幼粒细胞白血病中的应用,R733.7
  10. 多通道生物传感芯片用于检测急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因的实验研究,R733.7
  11. 实时定量PCR动态监测急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因的研究及临床意义,R733.7
  12. APL白血病多元微球阵列的定量方法研究,R446.61
  13. 逆转录病毒载体介导的急性早幼粒细胞白血病小鼠模型的建立,R733.7
  14. 组蛋白脱乙酰基酶抑制剂苯丁酸钠诱导人类白血病细胞系细胞周期阻滞和分子机制的初步研究,R733.7
  15. L型PML-RARα融合基因不同剪接异构体对维甲酸诱导分化的影响及与剪接因子hnRNPA1、ASF/SF2的相关性研究,R733.7
  16. APL细胞和PML-RARα疫苗诱导体内外免疫应答的研究,R733.71
  17. 纳米金胶/壳聚糖电化学DNA生物传感器的构建及检测实验研究,R733.7
  18. BCR/ABL和SEA双基因重组载体的构建和表达及SEA联合K562细胞对CD3ε链的影响,R73-36
  19. 糖基转移酶pp-GalNac-T在白血病细胞诱导分化中生物学功能的研究,R733.7
  20. PML/RARα融合基因检测及与RARα基因发生断裂融合的新伙伴基因的筛选方法的建立,R733.71

中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学免疫学
© 2012 www.xueweilunwen.com