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溶血磷脂酸对体外培养人视网膜色素上皮细胞CD95因子表达的影响

作　者: 陈家欣
导　师: 徐国兴
学　校: 福建医科大学
专　业: 眼科学
关键词: 视网膜色素上皮细胞细胞因子传代培养免疫学流式细胞术细胞杀伤实验
分类号: R77
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

目的:研究溶血磷脂酸对体外培养人视网膜色素上皮细胞CD95因子表达的影响,探索hRPE细胞移植前LPA促增繁殖的适宜浓度。方法:取第三代人视网膜色素上皮细胞,用MTT法初步筛选LPA的促细胞增殖的适宜浓度,采用流式细胞术作出LPA对CD95表达的浓度和时间曲线。用流式细胞术Annexin-V/PI双标法比较各种不同LPA浓度下hRPE细胞的凋亡率、坏死率及比较不同浓度LPA对anti-CD95 IgM诱导的细胞凋亡的保护作用,并用细胞杀伤实验来检测不同浓度LPA对hRPE细胞的保护作用。结果:LPA对hRPE细胞有促增殖作用。10uM是接近饱和的浓度。40u M以上的浓度,细胞增殖率开始下降。80uM以上浓度开始对细胞有毒性作用,细胞凋亡率和坏死率均增加。LPA能抑制CD95的表达。0-40uM范围内,CD95表达率随LPA浓度增加而减少,40uM时表达率随作用时间延长而减少(组间比较P<0.05)。LPA能抑制hRPE细胞凋亡。在0-40uM范围内,LPA对hRPE细胞自身及anti-CD95 IgM诱导的凋亡均有抑制作用,细胞凋亡率随着浓度增加而减少(组间比较P<0.05)。LPA能使hRPE细胞逃避CTL的杀伤作用。在0-40uM范围内,CTL对hRPE细胞的杀伤作用,随着LPA溶度增加而减少(组间比较P<0.05)。LPA对CD95表达率的影响和对CTL杀伤率影响呈正相关关系(平均荧光强度r=0.994,P<0.01,阳性细胞率r=0.996,P<0.01)。结论:LPA能通过抑制CD95表达来促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,使hRPE细胞逃避CTL的杀伤。40uM是LPA促hRPE细胞增殖的理想浓度。

全文目录

缩略词表  4-5
中文摘要  5-6
英文摘要  6-8
前言  8-10
材料与方法  10-16
结果  16-26
讨论  26-34
结论  34-35
参考文献  35-40
综述  40-49
  参考文献  46-49
致谢  49

溶血磷脂酸对体外培养人视网膜色素上皮细胞CD95因子表达的影响

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