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雷公藤多甙防治大鼠EAE疗效及机制探讨

作　者: 马慧芝
导　师: 谭利明
学　校: 中南大学
专　业: 神经病学
关键词: EAE 雷公藤多甙 泼尼松 NF-κB p65 TNF-α
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要


目的：观察雷公藤多甙(tripterygium wifordii polyglycosidium，TWP)对Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)干预的影响，比较两组不同剂量TWP与泼尼松(prednisone，PRD)的疗效差别，探讨其可能的免疫调节机制。方法：用豚鼠脊髓匀浆(guinea pig spinal cord homogenate，GP-SCH)+完全福氏佐剂(complete freund’s adguvant，CFA)十百日咳疫苗原浆液(pertussis vaccine，PV)致敏Wistar大鼠，建立EAE模型。并选用TWP、PRD干预治疗。65只Wistar大鼠随机分成5组：对照组5只(用生理盐水代替GP-SCH)，EAE组、TWPⅠ组(EAE+TWP10mg／kg·d)、TWPⅡ组(EAE+TWP 30 mg／kg·d)和PRD组(EAE+PRD 5mg／kg·d)各15只。TWPⅠ组、TWPⅡ组、PRD组大鼠在抗原免疫后第1天开始，分别给予相应药物干预，每天一次，直到处死前一天。对照组在免疫后15天全部处死。其余四组在抗原免疫后根据处死时间不同又各自在组内分为第11天、第15天、第21天处死三个亚组。观察各组大鼠发病情况并进行神经功能评分。取大鼠脑和脊髓组织切片进行检测：采用苏木素—伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色+罗克沙尔坚牢蓝(luxol fast blue，LFB)髓鞘染色，在光镜下进行炎性病灶计数。免疫组化方法检测各组大鼠脑组织内核转录因子-κB p65 (nuclear factor KappaB，NF-κB p65)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)的表达情况。采用SPSS13.0软件包进行统计学分析。结果：1．对照组大鼠发病率为0％。EAE组大鼠发病率为93.3％，约抗原免疫后11天开始发病，第15天临床症状达高峰。从发病开始，持续10～12天后病情缓解。免疫后第15天组织病理学改变也最明显。光镜下可见中枢神经系统(central nervous，CNS)白质内小血管周围袖套样炎性细胞浸润，部分可见神经元变性、坏死以及脱髓鞘改变。干预组大鼠发病率较低(TWPⅠ组73.3％，TWPⅡ组53.5％，PRD组46.7％)，潜伏期相对延长1～2天。临床症状明显减轻。CNS内炎性病灶明显减少(干预组与EAE组比较有显著差异，P＜0.05；TWPⅡ组、PRD组分别与TWPⅠ组比较有显著差异，P＜0.05；TWPⅡ组与PRD组比较无显著差异，P＞0.05)。2．EAE组：与对照组比较，第11天EAE组大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α表达水平明显增高，差异有显著性(P＜0.05)。与第11天比较，第15天大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α表达水平明显增高，差异有显著性(P＜0.05)。与第15天比较，第21天NF-κB p65、TNF-α表达水平明显降低，差异有显著性(P＜0.05)。3．TWPⅠ组、TWPⅡ组、PRD组：与对照组比较，第11天各干预组大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α表达水平明显增高，差异有显著性(P＜0.05)。与第11天比较，第15天大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α表达水平明显增高，差异有显著性(P＜0.05)。与第15天比较，第21天NF-κB p65、TNF-α表达水平明显降低，差异有显著性(P＜0.05)。与同期EAE组比较，各干预组大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α表达水平明显降低，差异有显著性(P＜0.05)。与同期TWPⅠ组比较，TWPⅡ组、PRD组大鼠脑组织内NF-κB p65、TNF-α表达水平降低更明显，均有显著性差异(P＜0.05)。TWPⅡ组与PRD组比较，差异无显著性(P＞0.05)。结论：1．NF-κB p65、TNF-α可能参与EAE发病。2．TWP能有效干预EAE大鼠发病，在一定程度上呈剂量相关性，其机制可能与下调NF-κB p65、TNF-α表达有关。

全文目录


中文摘要  4-7
英文摘要  7-11
缩写词简表  11-12
前言  12-14
第一章 材料与方法  14-19
  1.1 实验材料和仪器  14-15
  1.2 实验步骤和方法  15-18
  1.3 统计分析  18-19
第二章 结果  19-28
  2.1 临床发病情况及神经功能评分  19
  2.2 病理观察结果  19-20
  2.3 免疫组化结果  20-21
  2.4 图和表  21-28
第三章 讨论  28-33
  3.1 Wistar大鼠EAE模型的特点  28-29
  3.2 NF-κB p56的生物学特性及对EAE模型的影响  29-30
  3.3 TNF-α的生物学特性及对EAE模型的影响  30-31
  3.4 雷公藤、泼尼松对EAE模型的影响  31-33
第四章 结论  33-34
参考文献  34-38
综述  38-48
致谢  48

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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