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新型微生物传感器的应用研究

作　者: 李婷
导　师: 何凤姣
学　校: 湖南大学
专　业: 分析化学
关键词: MSPQC传感器乙酰胺绿脓杆菌沙门氏菌 MSRV培养基 PS VSV G蛋白 PS-IDE-ECS传感器跨膜电流
分类号: TP212.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

微生物的检测、鉴定要求涉及到分析化学、生命科学等众多领域,本文充分利用电化学传感器和串联式压电传感器的响应特性,与微生物的新陈代谢特征及微观生命活性相结合,设计了三种微生物传感器,使信息的提取更加准确容易,测定更加快速方便,可用于实时或在位检测。鉴于此开展了以下研究工作:1.提出一种利用多通道串联式压电传感器（MSPQC）快速鉴定及计数绿脓杆菌的新方法。绿脓杆菌的鉴定是基于一种新的改良的乙酰胺培养基,这种改良的乙酰胺培养基可以选择性的培养绿脓杆菌,并在MSPQC上有优良的信号。对绿脓杆菌的计数是基于MSPQC获得的频率突变时间（FDT）与培养基中绿脓杆菌初始浓度的对数值在10¹08 cfu ml^-1范围内成线性关系。（R=-0.984）。检测下限为10 cfu ml^-1。2.提出在多通道串联式压电传感器上用间接法检出鉴定沙门氏菌。这基于新生霉素和孔雀绿共同抑制革兰氏阳性菌和除沙门氏菌以外的革兰氏阴性菌的生长,沙门氏菌在MSRV培养基上生长并释放出CO₂,被KOH接收液吸收,导致电导变化。MSPQC间接法能实时监测KOH接收液电导的变化,电导变化伴随着频移的产生,从而能达到检测和鉴定沙门氏菌的目的。3.提出一种用磷脂酰丝氨酸（PS）修饰的叉指电极-电化学传感器（PS-IDE-ECS）检测水泡性口炎病毒（VSV）的方法。在本工作中,修饰了PS的叉指电极用作探头。探头直接与电化学工作站相连。PS作为受体能吸附VSV G蛋白,主导VSV插入PS膜内,并在膜表面形成孔洞,在恒定电压下,膜两侧产生跨膜电流,从而达到检测目的。

全文目录

目录  5-8
摘要  8-9
Abstract  9-11
第1章绪论  11-28
  1.1 微生物的新陈代谢概述  11-14
    1.1.1 新陈代谢理论  11-12
    1.1.2 微生物代谢特异性研究  12
    1.1.3 微生物新陈代谢的应用领域  12-14
  1.2 新型微生物测定方法  14-16
    1.2.1 细胞成分分析法  14-16
    1.2.2 生物电化学方法  16
  1.3 水泡性口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus，VS)诊断的研究进展  16-23
    1.3.1 临床诊断  17-18
    1.3.2 流行病学诊断  18
    1.3.3 病理学诊断  18
    1.3.4 微生物学诊断  18-19
    1.3.5 免疫学诊断  19-21
    1.3.6 病毒核酸的检测与分析  21-23
  1.4 病毒感染与病毒受体  23-27
    1.4.1 病毒受体的本质及特征  23-25
    1.4.2 受体介导病毒进入细胞  25-26
    1.4.3 作为配体的病毒结构  26-27
  1.5 论文构思与展望  27-28
第2章 MSPQC 法对绿脓杆菌进行快速鉴定及计数  28-34
  2.1 前言  28-29
  2.2 实验用品及方法  29-30
    2.2.1 菌种  29
    2.2.2 培养基成分及配制  29
    2.2.3 仪器  29-30
    2.2.4 MSPQC 法  30
    2.2.5 ISO22717:2006  30
  2.3 结果与讨论  30-33
    2.3.1 改良乙酰胺培养基  30
    2.3.2 MSPQC 选择性检出绿脓杆菌  30-32
    2.3.3 不同浓度的绿脓的检出曲线  32-33
    2.3.4 MSPQC 法与传统方法、SPQC 及IDE-SPQC 方法相比  33
  2.4 小结  33-34
第3章 MSPQC 间接法对沙门氏菌进行快速检出鉴定  34-42
  3.1 前言  34-35
  3.2 实验用品及方法  35-37
    3.2.1 菌种  35
    3.2.2 培养基成分及配制  35-36
    3.2.3 仪器  36-37
    3.2.4 MSPQC 法  37
    3.2.5 ISO 6579: 2002 法  37
  3.3 结果与讨论  37-41
    3.3.1 MSPQC 间接法选择性检出沙门氏菌  37-38
    3.3.2 两种经典沙门氏菌选择性培养基在MSPQC 上的信号比较  38
    3.3.3 MSRV 培养基加入抑菌剂前后在MSPQC 上的信号差异  38-39
    3.3.4 KOH 接收液浓度的选定  39-40
    3.3.5 MSPQC 间接法选择性检出沙门氏菌  40
    3.3.6 MSPQC 间接法与传统法相比  40-41
  3.4 小结  41-42
第4章新型PS-IDE-ECS 体系检测水泡性口炎病毒  42-51
  4.1 前言  42-43
  4.2 实验部分  43-47
    4.2.1 实验用品  43-44
    4.2.2 实验步骤  44-47
  4.3 结果与讨论  47-49
    4.3.1 裸叉指电极、16-HS 膜电极、16-HS/PS 膜电极的表征  47-48
    4.3.2 PS-IDE-ECS 对 VSV 的典型响应曲线  48
    4.3.3 电镜结果  48-49
    4.3.4 PS-IDE 电极表面反应示意图  49
  4.4 小结  49-51
结论  51-52
参考文献  52-62
附录本文作者相关论文题录  62-63
致谢  63

新型微生物传感器的应用研究

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