学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

EB病毒潜伏膜蛋白2A（LMP2A）重组腺病毒转染树突状细胞治疗小鼠移植瘤模型的研究

作　者: 孙华
导　师: 姚堃
学　校: 南京医科大学
专　业: 微生物
关键词: EB病毒 潜伏膜蛋白2A(LMp2A) 树突状细胞(DC) 细胞毒性T细胞(CTL) 免疫治疗 重组腺病毒 肿瘤 动物模型
分类号: R73-36
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
下　载: 81次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的 构建表达EB病毒LMP2A的小鼠移植肿瘤模型，用EB病毒LMP2A重组腺病毒转染小鼠树突状细胞治疗该小鼠肿瘤模型并评价其疗效，为研究以DC为基础的EBV相关肿瘤的免疫治疗提供有益资料。 方法 将EB病毒LMP2A基因克隆至逆转录质粒pLXSN中，重组质粒用脂质体Clonfectin转入BALB／c小鼠来源的骨髓瘤细胞SP2／0，经G418筛选获得阳性克隆并经PCR、RT-PCR、间接免疫荧光、流式细胞仪鉴定。腹股沟皮下接种该细胞入BALB／c小鼠得到移植瘤模型，两周后切除肿瘤组织并作苏木素-伊红(H&E)染色切片。Inaba法分离并体外诱导BALB／c小鼠骨髓树突状细胞，第七天用重组腺病毒转染树突状细胞并以脂多糖(LPS)诱导成熟。流式细胞术鉴定树突状细胞表面分子的表达，MLR法检测树突状细胞刺激同种异体淋巴细胞增殖能力。树突状细胞皮下回输小鼠荷瘤模型，观察肿瘤生长情况、生存期。LDH释放法检测小鼠体内CTL的杀伤活性。标准ELISA法检测特异性CTL的IFN-γ分泌情况。 结果：构建出含EB病毒LMP2A基因的逆转录质粒，获得表达EB病毒LMP2A的SP2／0-LMP2A细胞，该细胞在BALB／c小鼠产生肿块。利用含有EB病毒LMP2A的重组腺病毒将LMP2A转入小鼠树突状细胞，该树突状细胞可以在体内诱导出针对EB病毒LMP2A的特异性CTL，诱导出的CTL对表达LMP2A的肿瘤细胞有较强的杀伤能力，并可分泌Th1型细胞因子IFN-γ。用转染后的树突状细胞输入荷瘤小鼠，可以明显抑制肿瘤的生长，延长荷瘤小鼠的生存期。 结论：将EB病毒LMP2A基因整合入BALB／c小鼠来源的肿瘤细胞SP2／0细胞并表达。成功地构建表达EB病毒潜伏膜蛋白2A(LMP2A)的小鼠移植瘤模型。为树突状细胞治疗EB病毒相关肿瘤的动物试验奠定基础。利用含有EB病毒LMP2A的重组腺病毒将LMP2A转入 南京医科大学硕士学位论文小鼠树突状细胞，该树突状细胞可以在体内诱导出针对EB病毒LMPZA的特异性CTL，诱导出的C几对表达LMPZA的肿瘤细胞有较强的杀伤能力，并可分泌Thl型细胞因子IFN一丫。用转染后的树突状细胞输入荷瘤小鼠，可以明显抑制肿瘤的生长，延长荷瘤小鼠的生存期.上述结果提示回输EBV LMPZA重组腺病毒转染的DC是一种可行有效的诱导EBV LMPZA特异性CTL办法。为以树突状细胞为基J出的EB病毒相关肿瘤免疫治疗提供了有益的资料。

全文目录


英文缩写词  3-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
研究背景  9-21
第一部分 表达EB病毒潜伏膜蛋白2A(LMP2A)的小鼠移植瘤模型的建立  21-35
  材料和方法  21-27
  结果  27-31
  讨论  31-35
第二部分 EB病毒LMP2A重组腺病毒转染小鼠骨髓树突状细胞治疗小鼠移植瘤模型的研究  35-47
  材料和方法  35-38
  结果  38-42
  讨论  42-47
小结  47-49
致谢  49-50
综述  50-59
硕士期间发表的文章  59

相似论文

  1. 普洱茶抑制乳腺癌SHZ-88细胞及保护亚基胍诱导的胃癌前病变和放疗损伤的作用,R285.5
  2. 沙利度胺衍生物的设计合成及抗肿瘤活性研究,R965
  3. 阿托伐醌类似物的设计、合成及其抗肿瘤活性研究,R914
  4. 低分子量亨氏马尾藻岩藻聚糖硫酸酯的制备及抗肿瘤活性研究,TS254.9
  5. 鬼臼毒素衍生物的设计、合成及抗肿瘤活性研究,R284
  6. 喹喔啉-1，4-二氧化物衍生物的设计、合成及抗肿瘤活性研究,R914
  7. 酢浆草提取物体外抗肿瘤和抗氧化研究,R285
  8. TRAIL对肿瘤侵润CD4~+CD25~+ Treg的调节作用,R730.2
  9. 条斑紫菜（Porphyra yezoensis）R-藻红蛋白的生物修饰及活性保护研究,TS201.21
  10. 猪TNF-α单克隆抗体制备与PRRSV感染猪肺泡巨噬细胞TNF-α变化规律研究,S858.28
  11. 独活寄生汤对兔腰椎间盘突出症模型体内肿瘤坏死因子影响的实验研究,R285.5
  12. 蜂毒素对人肝癌HepG-2细胞株裸鼠移植瘤生长的抑制作用及部分机制研究,R735.7
  13. 背景抑制磁共振全身弥散加权成像（DWIBS）与hPET/CT临床价值对比研究,R445.2
  14. 甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪肝炎大鼠的治疗作用及部分机制研究,R575.5
  15. 高频电磁场治疗兔内置入物感染的实验研究,R687.3
  16. 动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型组织形态学和超微结构观察及颈椎间盘TNF-α、IL-1β的表达,R681.55
  17. 维生素A和孟鲁司特对哮喘大鼠气道炎症细胞及Th1/Th2平衡的影响,R725.6
  18. 联合检测血清TPS，CEA，CYFRA21-1，NSE在肺癌诊断中的临床价值,R734.2
  19. Toll样受体4信号通路在脂多糖促进肺癌细胞增殖中的机制探讨,R734.2
  20. 治疗性沟通系统对妇科恶性肿瘤术后伴发轻、中度抑郁患者的干预研究,R473.73
  21. 儿童传染性单核细胞增多症的临床特征,R725.1

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 肿瘤学实验研究 > 治疗实验
© 2012 www.xueweilunwen.com