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电离辐射和紫杉醇诱导的多核细胞形成中SPATA5L1、Cyclin B2表达的变化

作　者: 杨丹
导　师: 许玉杰
学　校: 苏州大学
专　业: 放射医学
关键词: 电离辐射紫杉醇 KB细胞多核细胞 SPATA5L1 Cyclin B2
分类号: R739.8
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

背景及目的:电离辐射与紫杉醇协同作用,可以诱导体外培养的人口腔上皮癌KB细胞产生G2/M期阻滞,形成多核细胞,并最终造成死亡。先前通过基因芯片筛选研究发现在经过电离辐射和/或紫杉醇作用后,有10条与细胞分裂有关的基因存在差异表达。本研究旨在通过Real-time PCR和Western Blot定量分析其中两条基因SPATA5L1、Cyclin B2的表达变化来揭示G2/M期阻滞及多核细胞形成的分子机制。方法:不同剂量60Coγ射线照射联合不同浓度紫杉醇作用于KB细胞,用以下实验观察受照细胞的变化:(1)倒置显微镜观察细胞形态学的变化,细胞克隆形成实验检测细胞增殖抑制效应;(2)利用Real-time PCR技术检测SPATA5L1基因表达随照射剂量和药物浓度变化的情况;(3)Western Blot实验检测电离辐射联合紫杉醇对KB细胞内SPATA5L1、Cyclin B2蛋白含量的影响。结果:(1)电离辐射和紫杉醇协同作用能显著抑制KB细胞的生长增殖,且这种协同效应是照射剂量和药物浓度依赖性的;(2)KB细胞经电离辐射、紫杉醇或两者联合作用后,形成大量多核细胞,并最终死亡;(3)Real-time PCR结果表明,KB细胞受到不同剂量照射、40nmol/L紫杉醇和两者联合作用后SPATA5L1的表达明显上调;(4)Western Blot检测结果表明,KB细胞在受到6Gy以下不同剂量的电离辐射或电离辐射与40 nmol/L紫杉醇协同作用后,SPATA5L1的表达量明显增加,但同时Cyclin B2的表达量则下降。结论:多核细胞形成是电离辐射与紫杉醇协同作用诱导KB细胞生长增殖抑制的主要原因之一。可能的分子机制是细胞有丝分裂相关蛋白SPATA5L1上调表达和Cyclin B2适度的下调表达。Cyclin B2的下调表达导致有丝分裂纺锤体形成抑制,而SPATA5L1上调表达可能干扰细胞收缩环的功能。最终结果是在细胞分裂的过程中,细胞核分裂后细胞质的分裂被阻止,形成多核细胞,并最终造成死亡。

全文目录

中文摘要  4-5
Abstract  5-8
前言  8-11
第一部分电离辐射和紫杉醇对KB 细胞生长与增殖的影响  11-19
  一、实验材料  11-12
  二、实验方法  12-14
  三、实验结果  14-17
  四、讨论  17-18
  五、小结  18-19
第二部分电离辐射和紫杉醇对KB 细胞SPATA5L1 基因表达的影响  19-28
  一、实验材料  19-20
  二、实验方法  20-23
  三、实验结果  23-25
  四、讨论  25-27
  五、小结  27-28
第三部分电离辐射和紫杉醇对KB 细胞内SPATA5L1、Cyclin B2 蛋白含量的影响  28-36
  一、实验材料  28-30
  二、实验方法  30-32
  三、实验结果  32-33
  四、讨论  33-34
  五、小结  34-36
全文总结  36-38
参考文献  38-41
综述  41-55
  参考文献  50-55
攻读硕士学位出版或公开发表的文章  55-56
致谢  56-57

电离辐射和紫杉醇诱导的多核细胞形成中SPATA5L1、Cyclin B2表达的变化

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