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建立大月龄胎儿血管和瓣膜组织库的初步研究
作 者: 唐秀杰
导 师: 邢泉生
学 校: 青岛大学
专 业: 心胸外科
关键词: 胎儿 血管和瓣膜组织库 冷冻保存 光镜 电镜
分类号: R726.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2003年
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内容摘要
目的 新生儿、小婴儿心外科的迅速发展为寻找合适的血管和瓣膜替代材料提出了迫切要求,结合成人同种异体组织库的实际经验,初步建立大月龄胎儿血管和瓣膜组织库,并通过形态学研究对建库方法、保存效果等进行评估。 方法 同种异体材料取自脑死亡胎儿15例,胎龄28~40周。无菌条件下取材、修剪制备,其中带瓣膜主动脉15条、带瓣膜肺动脉8条。先依次用冷冻保护液1号液和冷冻保护液2号液浸泡,后放置于4℃冰箱冷平衡,特制无菌冷冻袋包装。用液氮蒸气梯度降温方法完成降温,-196℃长期保存。复温前后光镜观察血管形态、扫描电镜观察动脉和瓣膜内皮细胞完整情况、透射电镜观察细胞超微结构。 结果 一、血管及瓣膜修剪后和解冻后分别取样送细菌室做细菌和霉菌培养,结果均为阴性。 二、光镜观察显示:解冻后的主动脉内皮下层、中膜平滑肌细胞、胶原纤维、弹力纤维、外膜的基本结构与正常新鲜组织相同。中膜平滑肌细胞核固缩、浓染,未见急性损坏样改变,可见局部粘液样变性以及部分内皮细胞脱落现象。 三、扫描电镜观察显示:解冻后的主动脉部分血管内皮细胞脱落,内皮下层暴露。 四、透射电镜观察显示:解冻后的主动脉部分血管内皮细胞脱落,胶原纤维和弹力纤维形态结构正常,排列整齐,部分细胞线粒体结构及周围基质发生空泡样改变。 结论 一、初步建立了综合采集、长期冻存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的方法和主要技术指标。 二、严格的无菌操作可取代影响组织活性的抗生素灭菌法。 三、改进的液氮蒸汽梯度降温法,较程序控制降温仪降温简单,冷冻效果更可靠。 四、光镜及电镜观察结果显示改良的冷冻保存方法保存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的效果良好。 五、为大月龄胎儿血管和瓣膜组织库的完善、深入进行活性和免疫性研究以及下一步的临床应用打下基础。
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全文目录
目录 2-3 中文摘要 3-5 英文摘要 5-7 前言 7-8 材料和方法 8-11 结果 11-18 讨论 18-24 结论 24-25 参考文献 25-28 致谢 28-29 文献综述 29-48
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中图分类: > 医药、卫生 > 儿科学 > 小儿外科学 > 小儿各生理系统外科学
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